ٽيسٽ سليبس ICH-CPV-CDV IgG ٽيسٽ کٽ

ڪتن جي متعدي هيپاٽائيٽس/پاروو وائرس/ڊسٽمپر وائرس IgG اينٽي باڊي ٽيسٽ ڪِٽ (ICH/CPV/CDV IgG ٽيسٽ ڪِٽ) ڪتن جي متعدي هيپاٽائيٽس وائرس (ICH)، ڪتن جي پاروو وائرس (CPV) ۽ ڪتن جي ڊسٽمپر وائرس (CDV) لاءِ ڪتن جي IgG اينٽي باڊي جي سطحن جو نيم مقداري طور تي جائزو وٺڻ لاءِ ٺهيل آهي.

ڪٽ مواد

ڊيزائن ۽ اصول

هر ڪارٽريج ۾ ٻہ جزا پيڪ ٿيل آهن: چاٻي، جيڪا حفاظتي ايلومينيم ورق سان بند ٿيل هيٺئين حصي ۾ هڪ ڊيسيڪنٽ سان گڏ جمع ڪئي ويندي آهي، ۽ حل تيار ڪندي، جيڪي حفاظتي ايلومينيم ورق سان بند ٿيل مٿين حصي ۾ الڳ الڳ جمع ڪيا ويندا آهن.

هر ڪارٽريج ۾ هڪ نموني جي جاچ لاءِ سڀ ضروري ري ايجنٽس شامل آهن. مختصر ۾، جڏهن ڪي کي مٿي واري ڪمپارٽمينٽ 1 ۾ داخل ڪيو ويندو آهي ۽ ڪجهه منٽن لاءِ انڪيوبيٽ ڪيو ويندو آهي، جنهن ۾ رت جو نمونو جمع ڪيو ويو آهي، ته ٿلهي ٿيل رت جي نموني ۾ مخصوص IgG اينٽي باڊيز، جيڪڏهن موجود هجي، ته داخل ٿيل ڪي تي مختلف ڊسڪريٽ جڳهن تي متحرڪ ٿيل ICH، CPV يا CDV ريڪومبيننٽ اينٽيجنز سان ڳنڍيل هوندا. پوءِ ڪي کي وقت جي وقفن تي قدم بہ قدم باقي مٿين ڪمپارٽمينٽن ۾ منتقل ڪيو ويندو. جڳهن تي پابند مخصوص IgG اينٽي باڊيز کي مٿين ڪمپارٽمينٽ 3 ۾ ليبل ڪيو ويندو، جنهن ۾ اينٽي ڪينائن IgG اينزائم ڪنجوگيٽ شامل آهن ۽ آخري نتيجا ڪي تي جامني-نيرو اسپاٽ جي طور تي پيش ڪيا ويندا جيڪي مٿي ۾ ترقي ڪيا ويندا.

ڪمپارٽمينٽ 6، جنهن ۾ سبسٽريٽ شامل آهي. اطمينان بخش نتيجي لاءِ، ڌوئڻ جا مرحلا متعارف ڪرايا ويا آهن. مٿئين ڪمپارٽمينٽ 2 ۾، رت جي نموني اندر بيحد IgG ۽ ٻيا مادا هٽايا ويندا. مٿئين ڪمپارٽمينٽ 4 ۽ 5 ۾، بيحد يا

اضافي اينٽي ڪينائن IgG اينزائم ڪنجوگيٽ کي مناسب طور تي ختم ڪيو ويندو. آخر ۾، مٿين ڪمپارٽمينٽ 7 ۾، مٿين ڪمپارٽمينٽ 6 ۾ سبسٽريٽ ۽ بائونڊڊ اينزائم ڪنجوگيٽ مان ترقي ڪيل اضافي ڪروموسوم کي هٽايو ويندو. ڪارڪردگي جي صحيحيت جي تصديق ڪرڻ لاءِ، ڪي جي مٿئين سڀ کان وڏي جاءِ تي هڪ ڪنٽرول پروٽين متعارف ڪرايو ويندو آهي. ڪامياب ٽيسٽنگ عمل کي ختم ڪرڻ کان پوءِ جامني-نيري رنگ ۾ هڪ جڳهه نظر اچڻ گهرجي.

اسٽوريج

1. ڪٽ کي عام ريفريجريشن (2~8℃) هيٺ ذخيرو ڪريو.

ڪٽ کي منجمد نه ڪريو.

2. ڪِٽ ۾ غير فعال حياتياتي مواد شامل آهي. ڪِٽ کي هٿ ۾ رکڻ گهرجي.

۽ مقامي صفائي جي گهرجن مطابق ضايع ڪيو وڃي.

ٽيسٽ جو طريقو

ٽيسٽ کان اڳ تياري:

1. ڪارٽريج کي ڪمري جي گرمي پد (20℃-30℃）) تي آڻيو ۽ ان کي ڪم جي بينچ تي رکو جيستائين ڪارٽريج جي ڀت تي موجود حرارتي ليبل ڳاڙهي رنگ جو نه ٿي وڃي.

2. چاٻي رکڻ لاءِ ڪم ڪندڙ بينچ تي هڪ صاف ٽشو پيپر رکو.

3. 10μL ڊسپينسر ۽ 10μL معياري پائيپٽ ٽِپس تيار ڪريو.

4. هيٺيون حفاظتي ايلومينيم ورق هٽايو ۽ ڪارٽريج جي هيٺئين حصي مان چاٻي کي صاف ٽشو پيپر تي اڇلايو.

5. ڪارٽريج کي ڪم واري بينچ تي سڌو رکو ۽ تصديق ڪريو ته مٿين ڪمپارٽمينٽ جا نمبر صحيح طرف ڏسي سگهجن ٿا (صحيح نمبر اسٽيمپ توهان جي سامهون). ڪارٽريج کي ٿورو ٽيپ ڪريو ته جيئن پڪ ٿئي ته مٿين ڪمپارٽمينٽ ۾ حل واپس هيٺئين طرف ڦرن.

ٽيسٽ ڪرڻ:

1. مٿين خانن تي حفاظتي ورق کي احتياط سان اشاري ۽ انگوٺي سان کاٻي کان ساڄي طرف کوليو جيستائين صرف مٿين خاني 1 کي ظاهر نه ٿئي.

2. معياري 10μL پائيپٽ ٽِپ استعمال ڪندي ڊسپينسر سيٽ سان ٽيسٽ ٿيل رت جو نمونو حاصل ڪريو.

سيرم يا پلازما جي جانچ لاءِ 5μL استعمال ڪريو.

پوري رت جي جانچ لاءِ 10μL استعمال ڪريو.

پلازما ۽ پوري رت جي گڏ ڪرڻ لاءِ EDTA يا هيپرين اينٽي ڪوگولنٽ ٽيوب جي سفارش ڪئي ويندي آهي.

3. نموني کي مٿئين خاني ۾ جمع ڪريو 1. پوءِ ڊسپينسر پلنگر کي ڪيترائي ڀيرا مٿي ۽ هيٺ ڪريو ته جيئن ملاوٽ حاصل ڪري سگهجي (ملائڻ وقت ٽپ ۾ هلڪو نيرو محلول ڪامياب نموني جمع ٿيڻ جي نشاندهي ڪري ٿو).

4. چاٻي کي چاٻي جي هولڊر کان وٺي آڱر ۽ آڱوٺي سان احتياط سان کڻو ۽ چاٻي کي مٿين ڪمپارٽمينٽ 1 ۾ داخل ڪريو (پڪ ڪريو ته چاٻي جي فروسٽنگ پاسي توهان جي سامهون آهي، يا تصديق ڪريو ته هولڊر تي نيم دائرو توهان جي سامهون ساڄي پاسي آهي). پوءِ چاٻي کي ملايو ۽ مٿي واري ڪمپارٽمينٽ 1 ۾ 5 منٽن لاءِ رکو.

5. حفاظتي ورق کي ساڄي پاسي مسلسل کوليو جيستائين صرف ڪمپارٽمينٽ 2 کي ظاهر نه ڪيو وڃي. هولڊر ذريعي چاٻي کڻو ۽ چاٻي کي ظاهر ٿيل ڪمپارٽمينٽ 2 ۾ داخل ڪريو. پوءِ چاٻي کي ملايو ۽ مٿي واري ڪمپارٽمينٽ 2 ۾ 1 منٽ لاءِ رکو.

6. حفاظتي ورق کي ساڄي پاسي مسلسل کوليو جيستائين صرف ڪمپارٽمينٽ 3 کي ظاهر نه ڪيو وڃي. هولڊر ذريعي چاٻي کڻو ۽ چاٻي کي بي نقاب ڪمپارٽمينٽ 3 ۾ داخل ڪريو. پوءِ چاٻي کي ملائي 5 منٽن لاءِ ڪمپارٽمينٽ 3 ۾ رکو.

7. حفاظتي ورق کي ساڄي پاسي مسلسل کوليو جيستائين صرف ڪمپارٽمينٽ 4 کي ظاهر نه ڪيو وڃي. هولڊر ذريعي چاٻي کڻو ۽ چاٻي کي ظاهر ٿيل ڪمپارٽمينٽ 4 ۾ داخل ڪريو. پوءِ چاٻي کي ملايو ۽ مٿي واري ڪمپارٽمينٽ 4 ۾ 1 منٽ لاءِ رکو.

8. حفاظتي ورق کي ساڄي پاسي مسلسل کوليو جيستائين صرف ڪمپارٽمينٽ 5 کي ظاهر نه ڪيو وڃي. هولڊر ذريعي چاٻي کڻو ۽ چاٻي کي ظاهر ٿيل ڪمپارٽمينٽ 5 ۾ داخل ڪريو. پوءِ چاٻي کي ملايو ۽ مٿي واري ڪمپارٽمينٽ 5 ۾ 1 منٽ لاءِ رکو.

9. حفاظتي ورق کي ساڄي پاسي مسلسل کوليو جيستائين صرف ڪمپارٽمينٽ 6 کي ظاهر نه ڪيو وڃي. هولڊر ذريعي چاٻي کڻو ۽ چاٻي کي ظاهر ٿيل ڪمپارٽمينٽ 6 ۾ داخل ڪريو. پوءِ چاٻي کي ملايو ۽ مٿي واري ڪمپارٽمينٽ 6 ۾ 5 منٽن لاءِ رکو.

10. حفاظتي ورق کي ساڄي پاسي مسلسل کوليو جيستائين صرف ڪمپارٽمينٽ 7 کي ظاهر نه ڪيو وڃي. هولڊر ذريعي چاٻي کڻو ۽ چاٻي کي ظاهر ٿيل ڪمپارٽمينٽ 7 ۾ داخل ڪريو. پوءِ چاٻي کي ملايو ۽ مٿي واري ڪمپارٽمينٽ 7 ۾ 1 منٽ لاءِ رکو.

11. مٿئين ڪمپارٽمينٽ 7 مان چاٻي ڪڍو ۽ نتيجن کي پڙهڻ کان اڳ ان کي ٽشو پيپر تي لڳ ڀڳ 5 منٽن تائين سڪي ڇڏيو.

نوٽس:

چاٻي جي سامهون واري پاسي جي فراسٽنگ پاسي کي نه ڇهو، جتي اينٽيجن ۽ ڪنٽرول پروٽين متحرڪ آهن (ٽيسٽ ۽ ڪنٽرول علائقو).

ملائڻ دوران هر مٿئين ڪمپارٽمينٽ جي اندروني ڀت تي چاٻي جي سامهون واري ڇيڙي جي ٻئي هموار پاسي کي جھڪائيندي ٽيسٽ ۽ ڪنٽرول واري علائقي کي ڇڪڻ کان پاسو ڪريو.

ملائڻ لاءِ، هر مٿئين خاني ۾ چاٻي کي 10 ڀيرا مٿي ڪرڻ ۽ هيٺ ڪرڻ جي سفارش ڪئي وئي آهي.

چاٻي منتقل ڪرڻ کان اڳ صرف ايندڙ هڪ مٿئين خاني کي ظاهر ڪريو.

جيڪڏهن ضروري هجي ته، هڪ کان وڌيڪ نمونن جي جاچ لاءِ مهيا ڪيل پالتو جانورن جا ليبل ڳنڍيو.

ٽيسٽ جا نتيجا ترجمو ڪرڻ

معياري رنگ اسڪيل سان چاٻي تي نتيجي ۾ ايندڙ جڳهن کي چيڪ ڪريو.

غلط:

ڪنٽرول واري جاءِ تي ڪو به نظر ايندڙ جامني-نيرو رنگ نظر نٿو اچي.

ناڪاري(-)

ٽيسٽ جي جڳهن تي ڪو به نظر ايندڙ جامني-نيرو رنگ نظر نٿو اچي.

مثبت (+)

ٽيسٽ جي جڳهن تي نظر ايندڙ جامني-نيرو رنگ ظاهر ٿئي ٿو.

مخصوص IgG اينٽي باڊيز جي ٽائيٽرز کي ٽن سطحن سان بيان ڪري سگهجي ٿو.