টেস্টসিল্যাবস SARS-CoV-2 নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি ডিটেকশন কিট (ELISA)
ছোট বিবরণ:
SARS-CoV-2 নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি টেস্ট ক্যাসেট হল একটি দ্রুত ক্রোমাটোগ্রাফিক ইমিউনোঅ্যাসে। এই পরীক্ষাটি করোনাভাইরাস রোগ 2019 এর বিরুদ্ধে নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডিগুলির গুণগত সনাক্তকরণের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে। এটি মানুষের পুরো রক্ত, সিরাম বা প্লাজমা নমুনার সাথে ব্যবহার করা যেতে পারে। পরীক্ষাটি মানব অ্যান্টি-নভেল করোনাভাইরাস নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি টাইটারের মাত্রা মূল্যায়নে সহায়তা হিসেবে কাজ করে।
 দ্রুত ফলাফল: কয়েক মিনিটের মধ্যেই ল্যাব-নির্ভুল | ল্যাব-গ্রেড নির্ভুলতা: নির্ভরযোগ্য এবং বিশ্বাসযোগ্য |
| যেকোনো জায়গায় পরীক্ষা করুন: ল্যাব পরিদর্শনের প্রয়োজন নেই | সার্টিফাইড কোয়ালিটি: ১৩৪৮৫, সিই, এমডিএসএপি অনুগত |
| সহজ এবং সুবিন্যস্ত: ব্যবহারে সহজ, ঝামেলামুক্ত | চূড়ান্ত সুবিধা: ঘরে বসে আরামে পরীক্ষা করুন |
【নীতি】
SARS-CoV-2 নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি ডিটেকশন কিটটি প্রতিযোগিতামূলক ELISA পদ্ধতির উপর ভিত্তি করে তৈরি।
পরিশোধিত রিসেপ্টর বাইন্ডিং ডোমেন (RBD), ভাইরাল স্পাইক (S) প্রোটিন এবং হোস্ট কোষ থেকে প্রোটিন ব্যবহার করে
রিসেপ্টর ACE2, এই পরীক্ষাটি ভাইরাস-হোস্ট নিরপেক্ষ মিথস্ক্রিয়া অনুকরণ করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে।
ক্যালিব্রেটর, মান নিয়ন্ত্রণ, এবং সিরাম বা প্লাজমা নমুনা পৃথকভাবে পাতলা করে ভালোভাবে মিশ্রিত করা হয়
ছোট টিউবে hACE2-HRP কনজুগেট ধারণকারী বাফার। তারপর মিশ্রণগুলি স্থানান্তরিত হয়
মাইক্রোপ্লেট কূপগুলিতে স্থির রিকম্বিন্যান্ট SARS-CoV-2 RBD ফ্র্যাগমেন্ট (RBD) রয়েছে যার জন্য
৩০ মিনিটের ইনকিউবেশনের সময়, ক্যালিব্রেটরগুলিতে RBD নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি, QC এবং
কূপগুলিতে স্থির থাকা RBD-কে নির্দিষ্টভাবে বাঁধার জন্য নমুনাগুলি hACE2-HRP-এর সাথে প্রতিযোগিতা করবে। পরে
ইনকিউবেশনের সময়, আনবাউন্ড hACE2-HRP কনজুগেট অপসারণের জন্য কূপগুলি 4 বার ধোয়া হয়। এর একটি দ্রবণ
এরপর TMB যোগ করা হয় এবং ঘরের তাপমাত্রায় 20 মিনিটের জন্য সেবন করা হয়, যার ফলে একটি
নীল রঙ। 1N HCl যোগ করার সাথে সাথে রঙের বিকাশ বন্ধ হয়ে যায় এবং শোষণ ক্ষমতা বৃদ্ধি পায়
450 nm এ বর্ণালীগতি পরিমাপ করা হয়েছে। গঠিত রঙের তীব্রতা সমানুপাতিক
উপস্থিত এনজাইমের পরিমাণ, এবং একইভাবে পরীক্ষা করা মানের পরিমাণের সাথে বিপরীতভাবে সম্পর্কিত।
প্রদত্ত ক্যালিব্রেটর দ্বারা গঠিত ক্রমাঙ্কন বক্ররেখার সাথে তুলনা করে, এর ঘনত্ব
তারপর অজানা নমুনায় নিরপেক্ষ অ্যান্টিবডি গণনা করা হয়।
【প্রয়োজনীয় উপকরণ কিন্তু সরবরাহ করা হয়নি】
১. পাতিত বা ডিআয়নিত পানি
2. যথার্থ পাইপেট: 10μL, 100μL, 200μL এবং 1 মিলি
৩. ডিসপোজেবল পাইপেট টিপস
৪. মাইক্রোপ্লেট রিডার ৪৫০nm এ শোষণ ক্ষমতা পড়তে সক্ষম।
৫. শোষক কাগজ
৬. গ্রাফ পেপার
৭. ঘূর্ণি মিক্সার বা সমতুল্য
【সংগ্রহ এবং সংরক্ষণের নমুনা】
১. K2-EDTA ধারণকারী টিউবে সংগৃহীত সিরাম এবং প্লাজমা নমুনা এই কিটের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।
2. নমুনাগুলি ঢাকনা দিয়ে ঢেকে রাখা উচিত এবং পরীক্ষা করার আগে 2 °C - 8 °C তাপমাত্রায় 48 ঘন্টা পর্যন্ত সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
দীর্ঘ সময় ধরে (৬ মাস পর্যন্ত) রাখা নমুনাগুলি পরীক্ষার আগে -২০ ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় কেবল একবার হিমায়িত করা উচিত।
বারবার জমাট বাঁধার চক্র এড়িয়ে চলুন।
প্রোটোকল
【রিএজেন্ট প্রস্তুতি】
1. ব্যবহারের আগে সমস্ত রিএজেন্ট রেফ্রিজারেশন থেকে বের করে ঘরের তাপমাত্রায় ফিরে যেতে হবে।
(২০° থেকে ২৫° সেলসিয়াস)। ব্যবহারের পরপরই সমস্ত রিএজেন্ট ফ্রিজে সংরক্ষণ করুন।
2. ব্যবহারের আগে সমস্ত নমুনা এবং নিয়ন্ত্রণগুলিকে ঘূর্ণিঝড়িত করা উচিত।
৩. hACE2-HRP দ্রবণ প্রস্তুতি: hACE2-HRP ঘনত্বকে ১:৫১ ডিলিউশন অনুপাতে ডিলিউশন দিয়ে পাতলা করুন।
বাফার। উদাহরণস্বরূপ, 100 μL hACE2-HRP কনসেনট্রেটকে 5.0 মিলি HRP ডিলিউশন বাফারের সাথে পাতলা করুন যাতে
একটি hACE2-HRP দ্রবণ তৈরি করুন।
৪. ১× ওয়াশ সলিউশন প্রস্তুতি: ২০× ওয়াশ সলিউশন ডিআয়োনাইজড বা ডিস্টিলড জল দিয়ে পাতলা করুন।
আয়তনের অনুপাত ১:১৯। উদাহরণস্বরূপ, ২০ মিলি ২০× ওয়াশ সলিউশন ৩৮০ মিলি ডিআয়োনাইজড বা
৪০০ মিলি ১× ওয়াশ সলিউশন তৈরি করতে পাতিত জল।
【পরীক্ষা পদ্ধতি】
১. আলাদা টিউবে, প্রস্তুতকৃত hACE2-HRP দ্রবণের ১২০μL সমান করে মিশিয়ে নিন।
2. প্রতিটি টিউবে 6 μL ক্যালিব্রেটর, অজানা নমুনা, মান নিয়ন্ত্রণ যোগ করুন এবং ভালভাবে মিশ্রিত করুন।
৩. ধাপ ২-এ প্রস্তুত প্রতিটি মিশ্রণের ১০০μL সংশ্লিষ্ট মাইক্রোপ্লেট কূপে স্থানান্তর করুন
পূর্বনির্ধারিত পরীক্ষার কনফিগারেশনে।
৩. প্লেট সিলার দিয়ে প্লেটটি ঢেকে দিন এবং ৩৭°C তাপমাত্রায় ৩০ মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।
৪. প্লেট সিলারটি খুলে ফেলুন এবং প্রতি কূপে প্রায় ৩০০ μL ১× ওয়াশ সলিউশন দিয়ে প্লেটটি চারবার ধুয়ে ফেলুন।
৫. ধোয়ার পর কূপের অবশিষ্ট তরল অপসারণের জন্য কাগজের তোয়ালেতে প্লেটটি আলতো চাপুন।
৬. প্রতিটি কূপে ১০০ μL TMB দ্রবণ যোগ করুন এবং প্লেটটিকে ২০ - ২৫°C তাপমাত্রায় অন্ধকারে ২০ মিনিটের জন্য সেদ্ধ করুন।
৭. বিক্রিয়া বন্ধ করতে প্রতিটি কূপে ৫০ μL স্টপ সলিউশন যোগ করুন।
৮. ১০ মিনিটের মধ্যে ৪৫০ এনএম মাইক্রোপ্লেট রিডারে শোষণ ক্ষমতা পড়ুন (অ্যাক্সেসরি হিসেবে ৬৩০ এনএম)
উচ্চতর নির্ভুলতা কর্মক্ষমতার জন্য প্রস্তাবিত)।