SARS-CoV-2 neutraliserende antistofdetektionssæt （ELISA)
【Påtænkt brug】
SARS-CoV-2 neutraliserende antistofdetektionssæt er et konkurrencedygtigt enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) beregnet til kvalitativ og semi-kvantitativ detektion af total neutraliserende antistoffer mod SARS-COV-2 i humant serum og plasma. SARS-COV-2 neutraliserende antistofdetektionssæt kan bruges som en hjælp til at identificere individer med et adaptivt immunrespons på SARS-COV-2, hvilket indikerer for nylig eller tidligere infektion. SARS-COV-2 neutraliserende antistofdetektionssæt bør ikke bruges til at diagnosticere akut SARS-COV-2-infektion.
【INDLEDNING】
Coronavirus -infektioner inducerer typisk neutraliserende antistofresponser. Serokonversionshastighederne hos COVID-19-patienter er henholdsvis 50% og 100% på dag 7 og 14 postsymptomets begyndelse. For at præsentere viden er tilsvarende virusneutraliserende antistof i blod et anerkendt som et mål til bestemmelse af antistofeffektivitet og højere koncentration af det neutraliserende antistof indikerer højere beskyttelseseffektivitet. Plaque -reduktionsneutraliseringstest (PRNT) er blevet anerkendt som guldstandarden til påvisning af neutraliserende antistoffer. På grund af sin lave gennemstrømning og højere krav til drift er PRNT imidlertid ikke praktisk til serodiagnose og vaccineevaluering i stor skala og vaccineevaluering. SARS-COV-2 neutraliserende antistofdetektionssæt er baseret på konkurrencedygtige enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) metodologi, som kan detektere det neutraliserende antistof i blodprøve samt specielt få adgang til koncentrationsniveauerne for denne type antistof.
【Testprocedure】
1. I separate rør, aliquot 120 μl af den forberedte HACE2-HRP-opløsning.
2.add 6 μl kalibratorer, ukendte prøver, kvalitetskontrol i hvert rør og bland godt.
3.Transfer 100 μl af hver blanding fremstillet i trin 2 til tilsvarende mikropladebrønde i henhold til forudindstillet testkonfiguration.
3.Kover pladen med pladesætning, og inkuber ved 37 ° C i 60 minutter.
4. Fjern pladesætningen, og vask pladen med omtrentlige 300 μl 1 × vaskeopløsning pr. Brønd i fire gange.
5. Tap pladen på papirhåndklæde for at fjerne resterende væske i brøndene efter vask af trin.
6.Dd 100 μl TMB -opløsning på hver brønd og inkuber pladen i mørke ved 20 - 25 ° C i 20 minutter.
7.Tilfælde 50 μl stopopløsning til hver brønd for at stoppe reaktionen.
8. Læs absorbansen i mikropladelæser ved 450 nm inden for 10 minutter (630nm som tilbehør anbefales til højere præcisionsydelse.
