Testsealabs SARS-CoV-2 neutraliserende antistofdetektionskit (ELISA)
Kort beskrivelse:
SARS-CoV-2-neutraliserende antistoftestkassetten er en hurtig kromatografisk immunoassay. Denne analyse er designet til kvalitativ detektion af neutraliserende antistoffer mod Coronavirus Disease 2019. Den kan bruges med humane fuldblods-, serum- eller plasmaprøver. Testen tjener som en hjælp til at evaluere niveauerne af humane antistoftitre mod den nye coronavirus.
 Hurtige resultater: Laboratoriepræcise på få minutter | Præcision i laboratoriekvalitet: Pålidelig og troværdig |
| Test hvor som helst: Intet laboratoriebesøg påkrævet | Certificeret kvalitet: 13485, CE, Mdsap-kompatibel |
| Enkel og strømlinet: Nem at bruge, ingen besvær | Ultimativ bekvemmelighed: Test komfortabelt derhjemme |
【PRINCIP】
SARS-CoV-2-neutraliserende antistofdetektionskittet er baseret på en kompetitiv ELISA-metode.
Ved hjælp af oprenset receptorbindingsdomæne (RBD), protein fra det virale spike (S) protein og værtscellen
receptor ACE2, er denne test designet til at efterligne den neutraliserende interaktion mellem virus og vært.
Kalibratorer, kvalitetskontroller og serum- eller plasmaprøver blandes individuelt godt i fortynding.
buffer indeholdende hACE2-HRP-konjugat alikvoteret i små rør. Derefter overføres blandingerne i
mikropladebrøndene indeholdende immobiliseret rekombinant SARS-CoV-2 RBD-fragment (RBD) til
inkubation. I løbet af den 30 minutter lange inkubation måles det RBD-specifikke antistof i kalibratorerne, QC og
prøverne vil konkurrere med hACE2-HRP om specifik binding til det RBD, der er immobiliseret i brøndene. Efter
Under inkubationen vaskes brøndene 4 gange for at fjerne ubundet hACE2-HRP-konjugat. En opløsning af
TMB tilsættes derefter, og der inkuberes i 20 minutter ved stuetemperatur, hvilket resulterer i udviklingen af en
blå farve. Farveudviklingen stoppes ved tilsætning af 1N HCl, og absorbansen er
målt spektrofotometrisk ved 450 nm. Intensiteten af den dannede farve er proportional med
mængden af tilstedeværende enzym og er omvendt proportional med mængden af standarder, der analyseres på samme måde.
Ved sammenligning med kalibreringskurven dannet af de medfølgende kalibratorer, blev koncentrationen af
neutraliserende antistoffer i den ukendte prøve beregnes derefter.
【NØDVENDIGE MATERIALER, DER IKKE LEVERES】
1. Destilleret eller deioniseret vand
2. Præcisionspipetter: 10 μL, 100 μL, 200 μL og 1 ml
3. Engangspipettespidser
4. Mikropladelæser, der kan aflæse absorbans ved 450 nm.
5. Absorberende papir
6. Millimeterpapir
7. Vortex-blander eller tilsvarende
【PRØVEINDSAMLING OG OPBEVARING】
1. Serum- og plasmaprøver indsamlet i rør indeholdende K2-EDTA kan anvendes til dette kit.
2. Prøver skal forsegles og kan opbevares i op til 48 timer ved 2 °C - 8 °C før analyse.
Prøver, der opbevares i længere tid (op til 6 måneder), bør kun fryses én gang ved -20 °C før analyse.
Undgå gentagne fryse-optøningscyklusser.
PROTOKOL
【Reagensforberedelse】
1. Alle reagenser skal tages ud af køleskabet og have stuetemperatur før brug.
(20° til 25°C). Opbevar alle reagenser i køleskabet straks efter brug.
2. Alle prøver og kontroller skal vortexes før brug.
3. Forberedelse af hACE2-HRP-opløsning: Fortynd hACE2-HRP-koncentratet i fortyndingsforholdet 1:51 med Dilution
Buffer. Fortynd f.eks. 100 μL hACE2-HRP-koncentrat med 5,0 ml HRP-fortyndingsbuffer til
Lav en hACE2-HRP-opløsning.
4. Forberedelse af 1× vaskeopløsning: Fortynd 20× vaskeopløsningen med deioniseret eller destilleret vand med en
volumenforhold på 1:19. Fortynd f.eks. 20 ml 20× vaskeopløsning med 380 ml deioniseret eller
destilleret vand for at lave 400 ml 1× vaskeopløsning.
【Testprocedure】
1. Udfør en alikvot på 120 μL af den klargjorte hACE2-HRP-opløsning i separate rør.
2. Tilsæt 6 μL kalibratorer, ukendte prøver og kvalitetskontroller i hvert rør, og bland godt.
3. Overfør 100 μL af hver blanding, der er fremstillet i trin 2, til de tilsvarende mikropladebrønde i henhold til
til en foruddesignet testkonfiguration.
3. Dæk pladen med pladeforsegler og inkuber ved 37 °C i 30 minutter.
4. Fjern pladeforsegleren, og vask pladen fire gange med ca. 300 μL 1× vaskeopløsning pr. brønd.
5. Bank pladen let mod et stykke køkkenrulle for at fjerne resterende væske i brøndene efter vasketrinnene.
6. Tilsæt 100 μL TMB-opløsning til hver brønd, og inkuber pladen i mørke ved 20-25 °C i 20 minutter.
7. Tilsæt 50 μL stopopløsning til hver brønd for at stoppe reaktionen.
8. Aflæs absorbansen i mikropladelæseren ved 450 nm inden for 10 minutter (630 nm som tilbehør er
anbefales til ydeevne med højere præcision).