Kit de detección de anticuerpos neutralizantes del SARS-CoV-2 (ELISA) de Testsealabs
Descripción breve:
El casete de prueba de anticuerpos neutralizantes del SARS-CoV-2 es un inmunoensayo cromatográfico rápido. Este ensayo está diseñado para la detección cualitativa de anticuerpos neutralizantes contra la enfermedad por coronavirus 2019. Puede utilizarse con muestras de sangre completa, suero o plasma humano. La prueba sirve como ayuda para evaluar los niveles de anticuerpos neutralizantes humanos contra el nuevo coronavirus.
 Resultados rápidos: precisión de laboratorio en minutos | Precisión de grado de laboratorio: confiable y digna de confianza |
| Prueba en cualquier lugar: no requiere visita al laboratorio | Calidad certificada: 13485, CE, compatible con Mdsap |
| Simple y optimizado: fácil de usar, sin complicaciones | Máxima comodidad: Realice la prueba cómodamente en casa |
【PRINCIPIO】
El kit de detección de anticuerpos neutralizantes del SARS-CoV-2 se basa en la metodología ELISA competitiva.
Utilizando el dominio de unión al receptor (RBD) purificado, la proteína de la proteína de la espiga viral (S) y la célula huésped
receptor ACE2, esta prueba está diseñada para imitar la interacción neutralizante virus-huésped.
Los calibradores, los controles de calidad y las muestras de suero o plasma se mezclan bien individualmente en dilución.
Tampón que contiene conjugado hACE2-HRP, alicuotado en tubos pequeños. Luego, las mezclas se transfieren a
Los pocillos de la microplaca que contienen el fragmento RBD del SARS-CoV-2 recombinante inmovilizado (RBD) para
Incubación. Durante la incubación de 30 minutos, el anticuerpo específico de RBD en los calibradores, QC y
Las muestras competirán con hACE2-HRP por la unión específica al RBD inmovilizado en los pocillos. Después
Tras la incubación, los pocillos se lavan cuatro veces para eliminar el conjugado hACE2-HRP no unido. Una solución de
Luego se agrega TMB y se incuba durante 20 minutos a temperatura ambiente, lo que da como resultado el desarrollo de una
color azul. El desarrollo del color se detiene con la adición de HCl 1N y la absorbancia es
medido espectrofotométricamente a 450 nm. La intensidad del color formado es proporcional a la
cantidad de enzima presente y está inversamente relacionada con la cantidad de estándares analizados de la misma manera.
A través de la comparación con la curva de calibración formada por los calibradores proporcionados, se determinó la concentración de
Luego se calculan los anticuerpos neutralizantes en la muestra desconocida.
【MATERIALES REQUERIDOS PERO NO PROPORCIONADOS】
1. Agua destilada o desionizada
2. Pipetas de precisión: 10 μL, 100 μL, 200 μL y 1 mL
3. Puntas de pipeta desechables
4. Lector de microplacas capaz de leer absorbancia a 450 nm.
5. Papel absorbente
6. Papel cuadriculado
7. Mezclador de vórtice o equivalente
【RECOLECCIÓN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS】
1. Las muestras de suero y plasma recolectadas en tubos que contienen K2-EDTA se pueden utilizar para este kit.
2. Las muestras deben taparse y pueden almacenarse hasta 48 horas a 2 °C - 8 °C antes del análisis.
Las muestras conservadas durante un período prolongado (hasta 6 meses) deben congelarse solo una vez a -20 °C antes del ensayo.
Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.
PROTOCOLO
【Preparación de reactivos】
1. Todos los reactivos deben sacarse del refrigerador y dejarse que vuelvan a temperatura ambiente antes de su uso.
(20° a 25°C). Conserve todos los reactivos en el refrigerador inmediatamente después de su uso.
2. Todas las muestras y controles deben agitarse antes de su uso.
3. Preparación de la solución hACE2-HRP: Diluya el concentrado de hACE2-HRP en una proporción de dilución de 1:51 con Dilución
Tampón. Por ejemplo, diluya 100 μL de concentrado de hACE2-HRP con 5,0 mL de tampón de dilución de HRP para
Prepare una solución hACE2-HRP.
4. Preparación de la solución de lavado 1×: Diluya la solución de lavado 20× con agua desionizada o destilada con un
relación de volumen de 1:19. Por ejemplo, diluya 20 ml de solución de lavado 20× con 380 ml de solución desionizada o
agua destilada para preparar 400 mL de solución de lavado 1×.
【Procedimiento de prueba】
1. En tubos separados, tome una alícuota de 120 μL de la solución hACE2-HRP preparada.
2. Agregue 6 μL de calibradores, muestras desconocidas y controles de calidad en cada tubo y mezcle bien.
3. Transfiera 100 μL de cada mezcla preparada en el paso 2 a los pocillos de microplaca correspondientes según
a configuración de prueba prediseñada.
3. Cubra la placa con sellador de placas e incube a 37 °C durante 30 minutos.
4. Retire el sellador de placa y lave la placa con aproximadamente 300 μL de solución de lavado 1× por pocillo cuatro veces.
5. Golpee la placa sobre una toalla de papel para eliminar el líquido residual en los pocillos después de los pasos de lavado.
6. Agregue 100 μL de solución TMB a cada pocillo e incube la placa en la oscuridad a 20-25 °C durante 20 minutos.
7. Agregue 50 μL de solución de parada a cada pocillo para detener la reacción.
8. Lea la absorbancia en el lector de microplacas a 450 nm dentro de 10 minutos (630 nm como accesorio es
recomendado para un rendimiento de mayor precisión).