کیت تشخیص آنتیبادی خنثیکننده SARS-CoV-2 (ELISA) Testselabs
نتایج سریع: دقت آزمایشگاهی در عرض چند دقیقه دقت در حد آزمایشگاه: قابل اعتماد و اطمینان امکان آزمایش در هر مکانی: بدون نیاز به مراجعه حضوری به آزمایشگاه کیفیت دارای گواهینامه: ۱۳۴۸۵، CE، Mdsap سادگی و کارایی: استفاده آسان، بدون دردسر راحتی نهایی: آزمایش راحت در خانه
【کاربرد مورد نظر】
کیت تشخیص آنتیبادی خنثیکننده SARS-CoV-2 یک روش سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) رقابتی است که برای تشخیص کیفی و نیمه کمی آنتیبادیهای خنثیکننده کل SARS-CoV-2 در سرم و پلاسمای انسان در نظر گرفته شده است. کیت تشخیص آنتیبادی خنثیکننده SARS-CoV-2 میتواند به عنوان کمکی در شناسایی افراد با پاسخ ایمنی تطبیقی به SARS-CoV-2، که نشان دهنده عفونت اخیر یا قبلی است، استفاده شود. کیت تشخیص آنتیبادی خنثیکننده SARS-CoV-2 نباید برای تشخیص عفونت حاد SARS-CoV-2 استفاده شود.
【مقدمه】
عفونتهای ویروس کرونا معمولاً پاسخهای آنتیبادی خنثیکننده را القا میکنند. میزان تبدیل سرمی در بیماران کووید-۱۹ به ترتیب در روز ۷ و ۱۴ پس از شروع علائم ۵۰٪ و ۱۰۰٪ است. تا آنجا که به دانش ما مربوط است، آنتیبادی خنثیکننده ویروس مربوطه در خون به عنوان هدفی برای تعیین اثربخشی آنتیبادی شناخته میشود و غلظت بالاتر آنتیبادی خنثیکننده نشان دهنده اثربخشی محافظتی بالاتر است. آزمایش خنثیسازی کاهش پلاک (PRNT) به عنوان استاندارد طلایی برای تشخیص آنتیبادیهای خنثیکننده شناخته شده است. با این حال، به دلیل توان عملیاتی پایین و نیاز بیشتر به عملکرد، PRNT برای تشخیص سرمی در مقیاس بزرگ و ارزیابی واکسن کاربردی نیست. کیت تشخیص آنتیبادی خنثیکننده SARS-CoV-2 بر اساس روش سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم رقابتی (ELISA) است که میتواند آنتیبادی خنثیکننده را در نمونه خون تشخیص دهد و همچنین به طور خاص به سطوح غلظت این نوع آنتیبادی دسترسی پیدا کند.
【روش آزمایش】
۱. در لولههای جداگانه، ۱۲۰ میکرولیتر از محلول hACE2-HRP آماده شده را به طور مساوی بریزید.
۲. ۶ میکرولیتر از کالیبراتورها، نمونههای مجهول و کنترلهای کیفی را در هر لوله اضافه کرده و خوب مخلوط کنید.
۳. ۱۰۰ میکرولیتر از هر مخلوط تهیه شده در مرحله ۲ را طبق پیکربندی آزمایش از پیش طراحی شده به چاهکهای میکروپلیت مربوطه منتقل کنید.
۳. پلیت را با Plate Sealer بپوشانید و به مدت ۶۰ دقیقه در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد انکوبه کنید.
۴. درزگیر پلیت را بردارید و پلیت را با تقریباً ۳۰۰ میکرولیتر از ۱× محلول شستشو در هر چاهک، چهار بار بشویید.
۵. پلیت را روی حوله کاغذی بزنید تا مایع باقیمانده در چاهکها پس از مراحل شستشو خارج شود.
۶. ۱۰۰ میکرولیتر محلول TMB را به هر چاهک اضافه کنید و پلیت را به مدت ۲۰ دقیقه در تاریکی و دمای ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتیگراد انکوبه کنید.
۷. برای توقف واکنش، ۵۰ میکرولیتر محلول متوقفکننده به هر چاهک اضافه کنید.
۸. جذب را در دستگاه میکروپلیت ریدر در طول موج ۴۵۰ نانومتر ظرف ۱۰ دقیقه بخوانید (برای عملکرد دقیقتر، استفاده از طول موج ۶۳۰ نانومتر به عنوان وسیله جانبی توصیه میشود).


