Testsealabs SARS-CoV-2:ta neutraloivien vasta-aineiden havaitsemispakkaus (ELISA)
Lyhyt kuvaus:
SARS-CoV-2-neutraloivien vasta-aineiden testikasetti on nopea kromatografinen immunomääritys. Tämä määritys on suunniteltu koronavirustautia 2019 vastaan suunnattujen neutraloivien vasta-aineiden kvalitatiiviseen havaitsemiseen. Sitä voidaan käyttää ihmisen kokoveri-, seerumi- tai plasmanäytteiden kanssa. Testi toimii apuna arvioitaessa ihmisen uuden koronaviruksen vasta-aineiden neutraloivien vasta-aineiden tasoja.
 Nopeita tuloksia: Laboratoriotason tarkkuutta minuuteissa | Laboratorioluokan tarkkuus: Luotettava ja uskottava |
| Testaa missä tahansa: Ei vaadi laboratoriokäyntiä | Sertifioitu laatu: 13485, CE, MDSAPI-yhteensopiva |
| Yksinkertainen ja virtaviivainen: Helppokäyttöinen, vaivaton | Äärimmäistä kätevyyttä: Testaa mukavasti kotona |
【PERIAATE】
SARS-CoV-2-virusta neutraloivan vasta-aineen havaitsemispakkaus perustuu kilpailevaan ELISA-menetelmään.
Käyttämällä puhdistettua reseptoria sitovaa domeenia (RBD), viruksen piikkiproteiinista (S) peräisin olevaa proteiinia ja isäntäsolua
reseptori ACE2, tämä testi on suunniteltu jäljittelemään viruksen ja isännän neutraloivaa vuorovaikutusta.
Kalibraattorit, laatukontrollit ja seerumi- tai plasmanäytteet sekoitetaan erikseen hyvin laimennusvaiheessa.
hACE2-HRP-konjugaattia sisältävä puskuri jaetaan pieniin putkiin. Sitten seokset siirretään
mikrolevykaivot, jotka sisältävät immobilisoitua rekombinanttia SARS-CoV-2 RBD-fragmenttia (RBD)
inkubointi. 30 minuutin inkuboinnin aikana RBD-spesifinen vasta-aine kalibraattoreissa, laadunvalvonnassa ja
näytteet kilpailevat hACE2-HRP:n kanssa spesifisestä sitoutumisesta kaivoihin immobilisoituun RBD:hen. Tämän jälkeen
inkuboinnin aikana kuopat pestään neljä kertaa sitoutumattoman hACE2-HRP-konjugaatin poistamiseksi. Liuos, jossa on
Sitten lisätään TMB:tä ja inkuboidaan 20 minuuttia huoneenlämmössä, jolloin kehittyy
sininen väri. Värin kehittyminen pysäytetään lisäämällä 1N HCl:a, ja absorbanssi on
mitattuna spektrofotometrisesti 450 nm:ssä. Muodostuneen värin intensiteetti on verrannollinen
läsnä olevan entsyymin määrästä ja on kääntäen verrannollinen samalla tavalla analysoitujen standardien määrään.
Vertaamalla toimitettujen kalibraattoreiden muodostamaan kalibrointikäyrään, pitoisuus
Tuntemattoman näytteen neutraloivien vasta-aineiden määrä lasketaan sitten.
【VAADITTAVAT, MUTTA EI TOIMITETA TOIMITUKSEEN】
1. Tislattu tai deionisoitu vesi
2. Tarkkuuspipettejä: 10 μL, 100 μL, 200 μL ja 1 ml
3. Kertakäyttöiset pipetinkärjet
4. Mikrolevylukija, joka pystyy lukemaan absorbanssin 450 nm:ssä.
5. Imeytyvä paperi
6. Ruutupaperi
7. Vortex-sekoitin tai vastaava
【NÄYTTEEN KERÄYS JA SÄILYTYS】
1. Tässä pakkauksessa voidaan käyttää K2-EDTA:ta sisältäviin putkiin kerättyjä seerumi- ja plasmanäytteitä.
2. Näytteet on suljettava korkilla, ja niitä voidaan säilyttää enintään 48 tuntia 2–8 °C:ssa ennen määritystä.
Pidempään (enintään 6 kuukautta) säilytetyt näytteet tulee pakastaa vain kerran -20 °C:ssa ennen määritystä.
Vältä toistuvia pakastus-sulatusjaksoja.
PROTOKOLLA
【Reagenssien valmistus】
1. Kaikki reagenssit on otettava jääkaapista ja annettava niiden lämmetä huoneenlämpöön ennen käyttöä.
(20–25 °C). Säilytä kaikki reagenssit jääkaapissa heti käytön jälkeen.
2. Kaikki näytteet ja kontrollit on vorteksoitava ennen käyttöä.
3. hACE2-HRP-liuoksen valmistus: Laimenna hACE2-HRP-konsentraatti laimennussuhteeseen 1:51 laimennusaineella
Puskuri. Esimerkiksi laimenna 100 μl hACE2-HRP-konsentraattia 5,0 ml:lla HRP-laimennuspuskuria
tee hACE2-HRP-liuos.
4. 1× pesuliuoksen valmistus: Laimenna 20× pesuliuos deionisoidulla tai tislatulla vedellä, jossa on
tilavuussuhde 1:19. Esimerkiksi laimenna 20 ml 20× pesuliuosta 380 ml:lla deionisoitua tai
tislattua vettä 400 ml:n 1× pesuliuoksen valmistamiseksi.
【Testausmenettely】
1. Ota erillisiin putkiin 120 μl valmistettua hACE2-HRP-liuosta.
2. Lisää jokaiseen putkeen 6 μL kalibraattoreita, tuntemattomia näytteitä ja laatukontrolleja ja sekoita hyvin.
3. Siirrä 100 μL kutakin vaiheessa 2 valmistettua seosta vastaaviin mikrolevyn kaivoihin ohjeiden mukaisesti.
ennalta suunniteltuun testikonfiguraatioon.
3. Peitä levy levytiivisteellä ja inkuboi 37 °C:ssa 30 minuuttia.
4. Poista levyn tiiviste ja pese levy noin 300 μl:lla 1× pesuliuosta kuoppaa kohden neljä kertaa.
5. Kopauta levyä talouspaperia vasten poistaaksesi jäännösnesteen kuopista pesuvaiheiden jälkeen.
6. Lisää 100 μl TMB-liuosta jokaiseen kuoppaan ja inkuboi levyä pimeässä 20–25 °C:ssa 20 minuuttia.
7. Lisää 50 μL pysäytysliuosta jokaiseen kuoppaan reaktion pysäyttämiseksi.
8. Lue absorbanssi mikrolevylukijalla 450 nm:ssä 10 minuutin kuluessa (630 nm lisävarusteena).
suositellaan tarkemman suorituskyvyn saavuttamiseksi).