Pasgan Lorgaidh Antibodies Neodrachaidh SARS-CoV-2 Testsealabs (ELISA)

Tuairisgeul Goirid:

 

’S e deuchainn imdhíon-chròmatagrafach luath a th’ ann an Caiséad Deuchainn Antibodies Neodrachaidh SARS-CoV-2. Tha an deuchainn seo air a dhealbhadh airson lorg càileachdail antibodies neodrachaidh an aghaidh Galar Coronavirus 2019. Faodar a chleachdadh le sampallan fala slàn, serum, no plasma daonna. Tha an deuchainn na chuideachadh ann a bhith a’ measadh ìrean titers antibodies neodrachaidh an aghaidh coronaviruses ùr daonna.

 

gouToraidhean Luath: Cruinneas Obrach-lann ann am Mionaidean gouMionaideachd Ìre-lann: Earbsach & Earbsach
gouDeuchainn an àite sam bith: Chan eil feum air tadhal air an obair-lann  gouCàileachd Dearbhte: 13485, CE, a rèir Mdsap
gouSìmplidh & Sruthlaichte: Furasta a chleachdadh, gun duilgheadas sam bith  gouGoireasachd as Fheàrr: Dèan deuchainn gu comhfhurtail aig an taigh

Mion-fhiosrachadh Toraidh

Tagaichean Bathar

PRIONNSABAIL

Tha an inneal lorg antibodies neodrachaidh SARS-CoV-2 stèidhichte air modh-obrach ELISA farpaiseach.

A’ cleachdadh àrainn ceangail gabhadair glan (RBD), pròtain bhon phròtain spìc bhìorasach (S) agus cealla an aoigh

gabhadair ACE2, tha an deuchainn seo air a dhealbhadh gus an eadar-obrachadh neodachaidh bhìoras-aoigh aithris.

Tha calibratairean, smachdan càileachd, agus sampallan serum no plasma air am measgachadh gu math leotha fhèin ann an caolachadh.

bufair anns a bheil conjugáit hACE2-HRP air a roinn ann an tiùban beaga. An uairsin thèid na measgachaidhean a ghluasad a-steach

na tobraichean meanbh-phlàta anns a bheil criomag RBD ath-chuingealaichte SARS-CoV-2 neo-ghluasadach (RBD) airson

goir. Rè an goir 30-mionaid, an antibody sònraichte RBD anns na calibratairean, QC agus

Bidh sampallan a’ farpais ris an hACE2-HRP airson ceangal sònraichte ris an RBD a tha air a ghluasad anns na tobraichean. Às dèidh

Rè an goir, thèid na tobraichean a nighe 4 tursan gus an conjugáit hACE2-HRP neo-cheangailte a thoirt air falbh. Fuasgladh de

An uair sin, thèid TMB a chur ris agus a ghoir airson 20 mionaid aig teòthachd an t-seòmair, agus mar thoradh air sin bidh

dath gorm. Tha leasachadh an dath air a stad le bhith a’ cur 1N HCl ris, agus tha an gabhail a-steach

air a thomhas gu speactrofotomeatrach aig 450 nm. Tha dian an dath a chaidh a chruthachadh co-rèireach ris an

meud einnsein a tha an làthair, agus tha e co-cheangailte gu neo-dhìreach ri meud nan inbhean a chaidh a dhearbhadh san aon dòigh.

Tro choimeas ris a’ lùb chalabrachaidh a chruthaich na calibratairean a chaidh a thoirt seachad, dùmhlachd

an uair sin thèid antibodies neodrachaidh san sampall neo-aithnichte obrachadh a-mach.

1
2

STUTHAN A DH'FHEUMAR ACH NACH EIL AIR AN TOIRT SEACHAD

1. Uisge grùdaichte no dì-ionichte

2. Pìobaidean mionaideach: 10μL, 100μL, 200μL agus 1 mL

3. Molaidhean pipette cuidhteasach

4. Leughadair meanbh-phlàtaichean comasach air absorbance a leughadh aig 450nm.

5. Pàipear sùghaidh

6. Pàipear grafa

7. Measgadair vortex no co-ionann

Cruinneachadh is stòradh sampallan

1. Faodar sampallan serum is plasma a chaidh a chruinneachadh ann an tiùban anns a bheil K2-EDTA a chleachdadh airson a’ phacaid seo.

2. Bu chòir caip a chur air sampallan agus faodar an stòradh airson suas ri 48 uairean aig 2 °C - 8 °C mus tèid an deuchainn.

Cha bu chòir sampallan a thèid a chumail airson ùine nas fhaide (suas ri 6 mìosan) a reothadh ach aon uair aig -20 °C mus tèid an deuchainn a dhèanamh.

Seachain cearcallan reothadh is leaghadh a-rithist is a-rithist.

PROTACAL

3

Ullachadh Ath-ghnìomhaiche

1. Feumar na h-ath-bheachdan uile a thoirt a-mach às an fhrigeradair agus leigeil leotha tilleadh gu teòthachd an t-seòmair mus tèid an cleachdadh.

(20° gu 25°C). Glèidh na h-ath-bheachdan uile san fhrigeradair dìreach an dèidh an cleachdadh.

2. Bu chòir na sampallan agus na smachdan uile a mheasgachadh le vortex mus tèid an cleachdadh.

3. Ullachadh Fuasglaidh hACE2-HRP: Caolaich tiughad hACE2-HRP aig co-mheas caolachaidh 1:51 le Caolachadh

Bufair. Mar eisimpleir, caolaich 100 μL de dh’fhulangas hACE2-HRP le 5.0mL de Bhufair Caolachaidh HRP gu

fuasgladh hACE2-HRP a dhèanamh.

4. Ullachadh Fuasgladh Nighe 1×: Caolaich am Fuasgladh Nighe 20× le uisge dì-ionichte no grùdaichte le

co-mheas meud de 1:19. Mar eisimpleir, caolaich 20 mL de fhuasgladh nighe 20 × le 380 mL de dhì-ionichte no

uisge grùide gus 400 mL de fhuasgladh nighe 1× a dhèanamh.

Modh-obrach Deuchainn

1. Ann an tiùban fa leth, cuir 120μL den fhuasgladh hACE2-HRP ullaichte ann an co-phàirtean.

2. Cuir 6 μL de chalabradairean, sampallan neo-aithnichte, smachdan càileachd anns gach tiùb agus measgaich gu math.

3. Gluais 100μL de gach measgachadh a chaidh ullachadh ann an ceum 2 a-steach do thobraichean meanbh-phlàta co-fhreagarrach a rèir

gu rèiteachadh deuchainn ro-dhealbhaichte.

3. Còmhdaich am plàta le Plate Sealer agus goir aig 37°C airson 30 mionaid.

4. Thoir air falbh an Rònaiche Plàta agus nigh am plàta le timcheall air 300 μL de fhuasgladh nighe 1× gach tobar ceithir tursan.

5. Tap am plàta air searbhadair pàipeir gus leaghan a tha air fhàgail anns na tobraichean a thoirt air falbh às dèidh ceumannan an nighe.

6. Cuir 100 μL de fhuasgladh TMB ri gach tobar agus goir am plàta anns an dorchadas aig 20 - 25°C airson 20 mionaid.

7. Cuir 50 μL de Fhuasgladh Stad ri gach tobar gus an ath-bhualadh a stad.

8. Leugh an absorbance ann an leughadair microplate aig 450 nm taobh a-staigh 10 mionaidean (630nm mar ghoireas a tha ann).

air a mholadh airson coileanadh nas cruinne).

Cuir do theachdaireachd thugainn:

Cuir do theachdaireachd thugainn:

Sgrìobh do theachdaireachd an seo agus cuir thugainn i