Kit de detección de anticorpos neutralizadores SARS-CoV-2 （ELISA)
【Uso previsto】
O kit de detección de anticorpos neutralizante SARS-CoV-2 é un ensaio inmunosorbente ligado á enzima (ELISA) ligado á enzima destinado a detección cualitativa e semi-cuantitativa de anticorpos neutralizadores totais a SARS-CoV-2 en soro e plasma humano. O kit de detección de anticorpos neutralizante SARS-COV-2 pode usarse como axuda para identificar a individuos cunha resposta inmune adaptativa ao SARS-Cov-2, o que indica unha infección recente ou previa. O kit de detección de anticorpos neutralizante SARS-CoV-2 non debe usarse para diagnosticar a infección aguda de SARS-Cov-2.
【Introdución】
As infeccións por coronavirus inducen normalmente as respostas de anticorpos neutralizantes. As taxas de seroconversión en pacientes covid-19 son do 50% e do 100% o día 7 e 14 do inicio dos síntomas post, respectivamente. Para presentar coñecemento, o anticorpo neutralizador do virus correspondente no sangue é un obxectivo recoñecido como obxectivo para determinar a eficacia dos anticorpos e unha maior concentración do anticorpo neutralizador indican unha maior eficacia de protección. A proba de neutralización da redución da placa (PRNT) foi recoñecida como o estándar de ouro para detectar anticorpos neutralizadores. Non obstante, debido ao seu baixo rendemento e a un maior requisito para o funcionamento, o PRNT non é práctico para o serodiagnóstico a gran escala e a avaliación da vacina. O kit de detección de anticorpos neutralizadores SARS-CoV-2 está baseado nunha metodoloxía de ensayo inmunosorbente ligada á enzima (ELISA) ligada á enzima, que pode detectar o anticorpo neutralizador na mostra de sangue así como acceder especialmente aos niveis de concentración deste tipo de anticorpos.
【Procedemento de proba】
1. En tubos separados, alícuota 120 µl da solución HACE2 HRP preparada.
2.ADD 6 µl de calibradores, mostras descoñecidas, controis de calidade en cada tubo e mestura ben.
3. Transferencia de 100 µl de cada mestura preparada no paso 2 en pozos de microplaca correspondentes segundo a configuración de proba prediseñada.
3. Cubra a placa con selador de placas e incuba a 37 ° C durante 60 minutos.
4. Elimine o selador de placas e lave a placa con 300 µl aproximada de solución de lavado 1 × por pozo durante catro veces.
5. Tapa a placa na toalla de papel para eliminar o líquido residual nos pozos despois do lavado.
6.ADD 100 µl de solución TMB a cada pozo e incubar a placa en escuridade a 20 - 25 ° C durante 20 minutos.
7.ADD 50 µl de solución de parada a cada pozo para deter a reacción.
8. Lea a absorbancia en Microplate Reader a 450 nm en 10 minutos (630 Nm como accesorio recoméndase para un maior rendemento de precisión.
