ટેસ્ટસીલેબ્સ SARS-CoV-2 ન્યુટ્રલાઇઝિંગ એન્ટિબોડી ડિટેક્શન કીટ (ELISA)
ટૂંકું વર્ણન:
SARS-CoV-2 ન્યુટ્રલાઈઝિંગ એન્ટિબોડી ટેસ્ટ કેસેટ એક ઝડપી ક્રોમેટોગ્રાફિક ઇમ્યુનોસે છે. આ પરીક્ષણ કોરોનાવાયરસ રોગ 2019 સામે ન્યુટ્રલાઈઝિંગ એન્ટિબોડીઝની ગુણાત્મક શોધ માટે રચાયેલ છે. તેનો ઉપયોગ માનવ આખા રક્ત, સીરમ અથવા પ્લાઝ્મા નમૂનાઓ સાથે કરી શકાય છે. આ પરીક્ષણ માનવ એન્ટિ-નોવેલ કોરોનાવાયરસ ન્યુટ્રલાઈઝિંગ એન્ટિબોડી ટાઇટર્સના સ્તરનું મૂલ્યાંકન કરવામાં સહાયક તરીકે કામ કરે છે.
 ઝડપી પરિણામો: મિનિટોમાં લેબ-સચોટ | લેબ-ગ્રેડ ચોકસાઇ: વિશ્વસનીય અને વિશ્વસનીય |
| ગમે ત્યાં પરીક્ષણ કરો: કોઈ લેબ મુલાકાત જરૂરી નથી | પ્રમાણિત ગુણવત્તા: ૧૩૪૮૫, સીઈ, એમડીએસએપી સુસંગત |
| સરળ અને સુવ્યવસ્થિત: ઉપયોગમાં સરળ, કોઈ મુશ્કેલી નહીં | અંતિમ સુવિધા: ઘરે આરામથી પરીક્ષણ કરો |
【સિદ્ધાંત】
SARS-CoV-2 ન્યુટ્રલાઇઝિંગ એન્ટિબોડી ડિટેક્શન કીટ સ્પર્ધાત્મક ELISA પદ્ધતિ પર આધારિત છે.
શુદ્ધ રીસેપ્ટર બંધનકર્તા ડોમેન (RBD), વાયરલ સ્પાઇક (S) પ્રોટીન અને યજમાન કોષમાંથી પ્રોટીનનો ઉપયોગ કરીને
રીસેપ્ટર ACE2, આ પરીક્ષણ વાયરસ-હોસ્ટ તટસ્થ ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની નકલ કરવા માટે રચાયેલ છે.
કેલિબ્રેટર્સ, ગુણવત્તા નિયંત્રણો અને સીરમ અથવા પ્લાઝ્મા નમૂનાઓ વ્યક્તિગત રીતે મંદનમાં સારી રીતે મિશ્રિત કરવામાં આવે છે.
નાના ટ્યુબમાં hACE2-HRP કન્જુગેટ ધરાવતું બફર. પછી મિશ્રણને
માઇક્રોપ્લેટ કુવાઓ જેમાં સ્થિર રિકોમ્બિનન્ટ SARS-CoV-2 RBD ફ્રેગમેન્ટ (RBD) હોય છે
૩૦-મિનિટના ઇન્ક્યુબેશન દરમિયાન, કેલિબ્રેટરમાં RBD વિશિષ્ટ એન્ટિબોડી, QC અને
કુવાઓમાં સ્થિર RBD ને ચોક્કસ બંધન માટે નમૂનાઓ hACE2-HRP સાથે સ્પર્ધા કરશે. પછી
ઉષ્માનિયંત્રણ દરમિયાન, અનબાઉન્ડ hACE2-HRP કન્જુગેટ દૂર કરવા માટે કુવાઓને 4 વખત ધોવામાં આવે છે.
ત્યારબાદ TMB ઉમેરવામાં આવે છે અને ઓરડાના તાપમાને 20 મિનિટ માટે ઉકાળવામાં આવે છે, જેના પરિણામે a નો વિકાસ થાય છે
વાદળી રંગ. 1N HCl ના ઉમેરા સાથે રંગ વિકાસ અટકી જાય છે, અને શોષણ થાય છે
450 nm પર સ્પેક્ટ્રોફોટોમેટ્રિકલી માપવામાં આવે છે. રચાયેલા રંગની તીવ્રતા પ્રમાણસર છે
હાજર એન્ઝાઇમની માત્રા, અને તે જ રીતે પરીક્ષણ કરાયેલા ધોરણોની માત્રા સાથે વિપરીત રીતે સંબંધિત છે.
પૂરા પાડવામાં આવેલ કેલિબ્રેટર્સ દ્વારા રચાયેલ કેલિબ્રેશન વળાંક સાથે સરખામણી કરીને, ની સાંદ્રતા
પછી અજાણ્યા નમૂનામાં એન્ટિબોડીઝને તટસ્થ કરવાની ગણતરી કરવામાં આવે છે.
【જરૂરી સામગ્રી પણ પૂરી પાડવામાં આવતી નથી】
૧. નિસ્યંદિત અથવા ડીઆયોનાઇઝ્ડ પાણી
2. ચોકસાઇવાળા પીપેટ્સ: 10μL, 100μL, 200μL અને 1 mL
3. નિકાલજોગ પીપેટ ટીપ્સ
૪. ૪૫૦nm પર શોષકતા વાંચવા સક્ષમ માઇક્રોપ્લેટ રીડર.
૫. શોષક કાગળ
૬. ગ્રાફ પેપર
7. વોર્ટેક્સ મિક્સર અથવા સમકક્ષ
【સંગ્રહ અને સંગ્રહનો નમૂનો આપો】
1. K2-EDTA ધરાવતી ટ્યુબમાં એકત્રિત કરાયેલા સીરમ અને પ્લાઝ્મા નમૂનાઓનો ઉપયોગ આ કીટ માટે કરી શકાય છે.
2. નમૂનાઓ ઢાંકેલા હોવા જોઈએ અને પરીક્ષણ કરતા પહેલા 2 °C - 8 °C તાપમાને 48 કલાક સુધી સંગ્રહિત કરી શકાય છે.
લાંબા સમય સુધી (6 મહિના સુધી) રાખવામાં આવેલા નમૂનાઓને પરીક્ષણ પહેલાં -20 °C પર ફક્ત એક જ વાર સ્થિર કરવા જોઈએ.
વારંવાર ઠંડું-પીગળવાનું ચક્ર ટાળો.
પ્રોટોકોલ
【રીએજન્ટ તૈયારી】
1. બધા રીએજન્ટ્સને રેફ્રિજરેશનમાંથી બહાર કાઢવા જોઈએ અને ઉપયોગ કરતા પહેલા ઓરડાના તાપમાને પાછા ફરવા દેવા જોઈએ.
(૨૦° થી ૨૫° સે.). ઉપયોગ કર્યા પછી તરત જ બધા રીએજન્ટ્સને રેફ્રિજરેટરમાં સંગ્રહિત કરો.
2. ઉપયોગ કરતા પહેલા બધા નમૂનાઓ અને નિયંત્રણોને વમળમાં ફેરવવા જોઈએ.
3. hACE2-HRP સોલ્યુશન તૈયારી: hACE2-HRP કોન્સન્ટ્રેટને 1:51 ના ડાયલ્યુશન રેશિયો પર ડિલ્યુશન સાથે પાતળું કરો.
બફર. ઉદાહરણ તરીકે, 100 μL hACE2-HRP કોન્સન્ટ્રેટને 5.0mL HRP ડિલ્યુશન બફર સાથે પાતળું કરો જેથી
hACE2-HRP દ્રાવણ બનાવો.
૪. ૧× વોશ સોલ્યુશન તૈયારી: ૨૦× વોશ સોલ્યુશનને ડીઆયોનાઇઝ્ડ અથવા ડિસ્ટિલ્ડ પાણીથી પાતળું કરો.
૧:૧૯ નો વોલ્યુમ ગુણોત્તર. ઉદાહરણ તરીકે, ૨૦ મિલી ૨૦× વોશ સોલ્યુશનને ૩૮૦ મિલી ડીઆયોનાઇઝ્ડ અથવા
1× વોશ સોલ્યુશનનું 400 મિલી બનાવવા માટે નિસ્યંદિત પાણી.
【પરીક્ષણ પ્રક્રિયા】
1. અલગ ટ્યુબમાં, તૈયાર કરેલા hACE2-HRP દ્રાવણના 120μL જેટલા પ્રમાણમાં ભેળવો.
2. દરેક ટ્યુબમાં 6 μL કેલિબ્રેટર્સ, અજાણ્યા નમૂનાઓ, ગુણવત્તા નિયંત્રણો ઉમેરો અને સારી રીતે મિક્સ કરો.
૩. સ્ટેપ ૨ માં તૈયાર કરેલા દરેક મિશ્રણના ૧૦૦μL ને અનુરૂપ માઇક્રોપ્લેટ કુવામાં ટ્રાન્સફર કરો
પૂર્વ-ડિઝાઇન કરેલ પરીક્ષણ રૂપરેખાંકન માટે.
૩. પ્લેટને પ્લેટ સીલરથી ઢાંકી દો અને ૩૭°C પર ૩૦ મિનિટ માટે ઇન્ક્યુબેટ કરો.
4. પ્લેટ સીલર દૂર કરો અને પ્લેટને આશરે 300 μL 1× વોશ સોલ્યુશનથી ચાર વખત પ્રતિ કૂવામાં ધોઈ લો.
૫. ધોવાના પગલાં પછી કુવામાં રહેલ પ્રવાહીને દૂર કરવા માટે કાગળના ટુવાલ પર પ્લેટને ટેપ કરો.
6. દરેક કૂવામાં 100 μL TMB દ્રાવણ ઉમેરો અને પ્લેટને 20 - 25°C પર અંધારામાં 20 મિનિટ માટે ઉકાળો.
7. પ્રતિક્રિયા બંધ કરવા માટે દરેક કૂવામાં 50 μL સ્ટોપ સોલ્યુશન ઉમેરો.
8. માઇક્રોપ્લેટ રીડરમાં 10 મિનિટની અંદર 450 nm પર શોષકતા વાંચો (630nm સહાયક તરીકે છે)
ઉચ્ચ ચોકસાઇ કામગીરી માટે ભલામણ કરેલ).