टेस्टसीलैब्स SARS-CoV-2 न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडी डिटेक्शन किट (ELISA)
संक्षिप्त वर्णन:
SARS-CoV-2 न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी टेस्ट कैसेट एक त्वरित क्रोमैटोग्राफिक इम्यूनोएसे है। यह परीक्षण कोरोनावायरस रोग 2019 के विरुद्ध न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी का गुणात्मक पता लगाने के लिए डिज़ाइन किया गया है। इसका उपयोग मानव संपूर्ण रक्त, सीरम या प्लाज्मा नमूनों के साथ किया जा सकता है। यह परीक्षण मानव एंटी-नोवेल कोरोनावायरस न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी टाइटर्स के स्तर का आकलन करने में सहायक होता है।
 तीव्र परिणाम: मिनटों में प्रयोगशाला-सटीक | लैब-ग्रेड परिशुद्धता: विश्वसनीय और भरोसेमंद |
| कहीं भी परीक्षण करें: लैब जाने की आवश्यकता नहीं | प्रमाणित गुणवत्ता: 13485, CE, Mdsap अनुपालक |
| सरल एवं सुव्यवस्थित: उपयोग में आसान, शून्य परेशानी | परम सुविधा: घर पर आराम से परीक्षण करें |
【सिद्धांत】
SARS-CoV-2 न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडी डिटेक्शन किट प्रतिस्पर्धी एलिसा पद्धति पर आधारित है।
शुद्ध रिसेप्टर बाइंडिंग डोमेन (आरबीडी), वायरल स्पाइक (एस) प्रोटीन और मेजबान कोशिका से प्रोटीन का उपयोग करना
रिसेप्टर ACE2 के लिए, यह परीक्षण वायरस-होस्ट निष्क्रियकरण अंतःक्रिया की नकल करने के लिए डिज़ाइन किया गया है।
अंशशोधक, गुणवत्ता नियंत्रण, और सीरम या प्लाज्मा नमूनों को अलग-अलग अच्छी तरह से मिलाया जाता है
hACE2-HRP संयुग्म युक्त बफर को छोटी नलियों में विभाजित किया जाता है। फिर मिश्रणों को
स्थिर पुनः संयोजक SARS-CoV-2 RBD खंड (RBD) युक्त माइक्रोप्लेट कुओं के लिए
ऊष्मायन। 30 मिनट के ऊष्मायन के दौरान, कैलिब्रेटर, क्यूसी और में आरबीडी विशिष्ट एंटीबॉडी
नमूने कुओं में स्थिर RBD के विशिष्ट बंधन के लिए hACE2-HRP के साथ प्रतिस्पर्धा करेंगे।
ऊष्मायन के दौरान, अनबाउंड hACE2-HRP संयुग्म को हटाने के लिए कुओं को 4 बार धोया जाता है।
फिर टीएमबी मिलाया जाता है और कमरे के तापमान पर 20 मिनट के लिए रखा जाता है, जिसके परिणामस्वरूप एक का विकास होता है
नीला रंग। 1N HCl मिलाने से रंग का विकास रुक जाता है, और अवशोषण
450 एनएम पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा गया। बनने वाले रंग की तीव्रता,
यह एंजाइम की उपस्थित मात्रा पर निर्भर करता है, तथा उसी प्रकार परखे गए मानकों की मात्रा से विपरीत रूप से संबंधित होता है।
प्रदान किए गए अंशशोधकों द्वारा गठित अंशांकन वक्र के साथ तुलना के माध्यम से, की सांद्रता
फिर अज्ञात नमूने में निष्क्रिय करने वाले एंटीबॉडी की गणना की जाती है।
【आवश्यक सामग्री लेकिन उपलब्ध नहीं कराई गई】
1. आसुत या विआयनीकृत जल
2. सटीक पिपेट: 10μL, 100μL, 200μL और 1 mL
3. डिस्पोजेबल पिपेट टिप्स
4. माइक्रोप्लेट रीडर 450nm पर अवशोषण पढ़ने में सक्षम है।
5. शोषक कागज
6. ग्राफ पेपर
7. भंवर मिक्सर या समकक्ष
【नमूना संग्रह और भंडारण】
1. K2-EDTA युक्त ट्यूबों में एकत्रित सीरम और प्लाज्मा नमूनों का उपयोग इस किट के लिए किया जा सकता है।
2. नमूनों को ढक्कन लगाकर रखा जाना चाहिए तथा परीक्षण से पहले उन्हें 2°C - 8°C पर 48 घंटे तक भंडारित किया जा सकता है।
लम्बे समय तक रखे गए नमूनों (6 महीने तक) को परीक्षण से पहले केवल एक बार -20 डिग्री सेल्सियस पर जमाया जाना चाहिए।
बार-बार जमने-पिघलने के चक्र से बचें।
शिष्टाचार
【अभिकर्मक तैयारी】
1. सभी अभिकर्मकों को प्रशीतन कक्ष से बाहर निकालकर उपयोग से पहले कमरे के तापमान पर आने देना चाहिए।
(20° से 25° सेल्सियस) उपयोग के तुरंत बाद सभी अभिकर्मकों को रेफ्रिजरेटर में रखें।
2. उपयोग से पहले सभी नमूनों और नियंत्रणों को भंवरित किया जाना चाहिए।
3. hACE2-HRP समाधान तैयारी: hACE2-HRP सांद्र को 1:51 कमजोर पड़ने के अनुपात में पतला करें
बफर। उदाहरण के लिए, 100 μL hACE2-HRP सांद्र को 5.0mL HRP तनुकरण बफर के साथ तनु करें।
hACE2-HRP समाधान बनाएं।
4. 1× वॉश सॉल्यूशन तैयार करना: 20× वॉश सॉल्यूशन को विआयनीकृत या आसुत जल के साथ पतला करें
आयतन अनुपात 1:19। उदाहरण के लिए, 20 मिलीलीटर 20× वॉश सॉल्यूशन को 380 मिलीलीटर विआयनीकृत या
1× वॉश सॉल्यूशन के 400 एमएल बनाने के लिए आसुत जल।
【परीक्षण प्रक्रिया】
1. अलग-अलग ट्यूबों में, तैयार hACE2-HRP घोल के 120μL को अलग-अलग मात्रा में डालें।
2. प्रत्येक ट्यूब में 6 μL कैलिब्रेटर, अज्ञात नमूने, गुणवत्ता नियंत्रण डालें और अच्छी तरह मिलाएं।
3. चरण 2 में तैयार किए गए प्रत्येक मिश्रण के 100μL को संबंधित माइक्रोप्लेट कुओं में स्थानांतरित करें
पूर्वनिर्धारित परीक्षण कॉन्फ़िगरेशन के लिए.
3. प्लेट को प्लेट सीलर से ढक दें और 37°C पर 30 मिनट के लिए रख दें।
4. प्लेट सीलर निकालें और प्लेट को लगभग 300 μL 1× वॉश सॉल्यूशन के साथ प्रति वेल चार बार धोएं।
5. धुलाई के बाद कुओं में बचे हुए तरल को निकालने के लिए प्लेट को कागज़ के तौलिये पर थपथपाएं।
6. प्रत्येक वेल में 100 μL TMB घोल डालें और प्लेट को अंधेरे में 20-25°C पर 20 मिनट तक रखें।
7. प्रतिक्रिया को रोकने के लिए प्रत्येक वेल में 50 μL स्टॉप सॉल्यूशन डालें।
8. माइक्रोप्लेट रीडर में 10 मिनट के भीतर 450 एनएम पर अवशोषण पढ़ें (630 एनएम सहायक उपकरण के रूप में है)
उच्च परिशुद्धता प्रदर्शन के लिए अनुशंसित)।