Testsealabs SARS-CoV-2 չեզոքացնող հակամարմինների հայտնաբերման հավաքածու (ELISA)
Կարճ նկարագրություն՝
SARS-CoV-2 չեզոքացնող հակամարմինների թեստային կասետը արագ քրոմատոգրաֆիկ իմունաանալիզ է: Այս վերլուծությունը նախատեսված է կորոնավիրուսային հիվանդություն 2019-ի դեմ չեզոքացնող հակամարմինների որակական հայտնաբերման համար: Այն կարող է օգտագործվել մարդու ամբողջական արյան, շիճուկի կամ պլազմայի նմուշների հետ: Թեստը ծառայում է որպես օգնություն մարդու նոր կորոնավիրուսի դեմ չեզոքացնող հակամարմինների տիտրերի մակարդակը գնահատելու համար:
 Արագ արդյունքներ. լաբորատոր ճշգրտություն րոպեների ընթացքում | Լաբորատոր մակարդակի ճշգրտություն. հուսալի և վստահելի |
| Թեստավորում ցանկացած վայրում. լաբորատոր այցելություն պարտադիր չէ | Հավաստագրված որակ՝ 13485, CE, Mdsap համապատասխան |
| Պարզ և հարմարեցված. հեշտ օգտագործման, առանց որևէ խնդրի | Առավելագույն հարմարավետություն. Հարմարավետ թեստ անցկացրեք տանը |
【ՍԿԶԲՈՒՆՔ】
SARS-CoV-2-ը չեզոքացնող հակամարմինների հայտնաբերման հավաքածուն հիմնված է մրցակցային ELISA մեթոդաբանության վրա։
Օգտագործելով մաքրված ընկալիչ կապող դոմեն (RBD), վիրուսային սպիկ (S) սպիտակուցից ստացված սպիտակուց և հյուրընկալող բջջից
ACE2 ընկալիչի հետ կապված, այս թեստը նախագծված է վիրուս-տիրոջ չեզոքացնող փոխազդեցությունը ընդօրինակելու համար։
Կալիբրատորները, որակի վերահսկիչները և շիճուկի կամ պլազմայի նմուշները առանձին-առանձին լավ խառնվում են նոսրացման մեջ։
hACE2-HRP կոնյուգատ պարունակող բուֆերը բաժանված է փոքր խողովակների մեջ։ Այնուհետև խառնուրդները տեղափոխվում են
միկրոպլետային խոռոչները, որոնք պարունակում են անշարժացված ռեկոմբինանտ SARS-CoV-2 RBD հատված (RBD)
ինկուբացիա։ 30 րոպեանոց ինկուբացիայի ընթացքում, RBD-ի հատուկ հակամարմինը կալիբրատորներում, QC-ում և
նմուշները կմրցեն hACE2-HRP-ի հետ՝ RBD-ի հետ ամրացված հատուկ կապման համար։
ինկուբացիայի ընթացքում անցքերը լվանում են 4 անգամ՝ hACE2-HRP չկապված կոնյուգատը հեռացնելու համար։
Այնուհետև ավելացվում է TMB և ինկուբացվում 20 րոպե սենյակային ջերմաստիճանում, որի արդյունքում առաջանում է
կապույտ գույն։ Գույնի զարգացումը դադարեցվում է 1N HCl-ի ավելացմամբ, և կլանումը
չափվել է սպեկտրոֆոտոմետրիկորեն 450 նմ-ում: Առաջացող գույնի ինտենսիվությունը համեմատական է
առկա ֆերմենտի քանակը և հակադարձ համեմատական է նույն ձևով վերլուծված ստանդարտների քանակին։
Համեմատելով տրամադրված կալիբրատորների կողմից ձևավորված տրամաչափման կորի հետ՝ կոնցենտրացիան
այնուհետև հաշվարկվում է անհայտ նմուշում չեզոքացնող հակամարմինների քանակը։
【ՊԱՀԱՆՋՎՈՂ, ԲԱՅՑ ՉՏՐԱՄԱԴՐՎԱԾ ՆՅՈՒԹԵՐ】
1. Թորած կամ ապաիոնացված ջուր
2. Ճշգրիտ պիպետներ՝ 10μL, 100μL, 200μL և 1 մլ
3. Միանգամյա օգտագործման պիպետի ծայրեր
4. Միկրոթիթեղի կարդացող սարք, որը կարող է կարդալ 450 նմ-ում աբսորբցիան։
5. Ներծծող թուղթ
6. Գրաֆիկական թուղթ
7. Մրրիկ խառնիչ կամ համարժեք
【ՆՄՈՒՇՆԵՐԻ ՀԱՎԱՔԱԳՐՈՒՄ ԵՎ ՊԱՀՊԱՆՈՒՄ】
1. Այս հավաքածուի համար կարող են օգտագործվել K2-EDTA պարունակող խողովակներում հավաքված շիճուկի և պլազմայի նմուշներ:
2. Նմուշները պետք է փակվեն կափարիչով և կարող են պահվել մինչև 48 ժամ 2°C - 8°C ջերմաստիճանում՝ նախքան փորձարկումը։
Երկար ժամանակ (մինչև 6 ամիս) պահված նմուշները պետք է սառեցվեն միայն մեկ անգամ՝ -20°C ջերմաստիճանում, նախքան վերլուծությունը։
Խուսափեք սառեցման-հալեցման կրկնվող ցիկլերից։
Արձանագրություն
【Ռեակտիվի պատրաստում】
1. Բոլոր ռեակտիվները պետք է հանվեն սառնարանից և օգտագործելուց առաջ թողնվեն սենյակային ջերմաստիճանի։
(20°-ից 25°C): Բոլոր ռեակտիվները օգտագործելուց անմիջապես հետո պահեք սառնարանում:
2. Բոլոր նմուշներն ու վերահսկիչները պետք է պտույտներով խառնվեն օգտագործելուց առաջ։
3. hACE2-HRP լուծույթի պատրաստում. hACE2-HRP կոնցենտրատը նոսրացրեք 1:51 նոսրացման հարաբերակցությամբ՝ նոսրացմամբ։
Բուֆեր։ Օրինակ, նոսրացրեք hACE2-HRP կոնցենտրատի 100 մկլ-ը HRP նոսրացման բուֆերի 5.0 մլ-ով մինչև
պատրաստել hACE2-HRP լուծույթ։
4. 1× լվացման լուծույթի պատրաստում. 20× լվացման լուծույթը նոսրացրեք ապաիոնացված կամ թորած ջրով՝ օգտագործելով
ծավալային հարաբերակցությունը՝ 1:19: Օրինակ, նոսրացրեք 20 մլ 20× լվացման լուծույթը 380 մլ ապաիոնացված կամ
թորած ջուր՝ 400 մլ 1× լվացման լուծույթ պատրաստելու համար։
【Փորձարկման ընթացակարգ】
1. Առանձին խողովակների մեջ ալիքվոտեք 120 մկլ պատրաստված hACE2-HRP լուծույթից։
2. Յուրաքանչյուր խողովակի մեջ ավելացրեք 6 մկլ տրամաչափիչներ, անհայտ նմուշներ, որակի վերահսկիչներ և լավ խառնեք։
3. 2-րդ քայլում պատրաստված յուրաքանչյուր խառնուրդից 100 մկլ տեղափոխեք համապատասխան միկրոպլանշետի անցքերի մեջ՝ համաձայն
նախապես մշակված թեստային կարգավորման համար։
3. Ծածկեք ափսեն ափսեի կնքիչով և ինկուբացրեք 37°C ջերմաստիճանում 30 րոպե։
4. Հեռացրեք թիթեղի կնքիչը և լվացեք թիթեղը մոտավորապես 300 մկլ 1× լվացման լուծույթով յուրաքանչյուր փոսիկի համար՝ չորս անգամ։
5. Լվանալու քայլերից հետո թիթեղը թեթևակի հարվածեք թղթե սրբիչին՝ անցքերի մեջ մնացորդային հեղուկը հեռացնելու համար:
6. Յուրաքանչյուր փոսիկի մեջ ավելացրեք 100 մկլ TMB լուծույթ և ինկուբացրեք ափսեն մութ տեղում 20-25°C ջերմաստիճանում 20 րոպե։
7. Ռեակցիան դադարեցնելու համար յուրաքանչյուր փոսիկի մեջ ավելացրեք 50 մկլ կանգառի լուծույթ։
8. 10 րոպեի ընթացքում (630 նմ որպես լրացուցիչ) կարդացեք միկրոպլանշետի ընթերցիչում աբսորբցիան
խորհուրդ է տրվում ավելի բարձր ճշգրտության աշխատանքի համար):