SARS-COV-2 Kit Deteksi Antibodi Netralisasi （ELISA)
【Tujuan penggunaan】
Kit Deteksi Antibodi SARS-COV-2 penetrral adalah uji imunosorben terkait enzim kompetitif (ELISA) yang dimaksudkan untuk deteksi kualitatif dan semi-kuantitatif dari antibodi penetralisir total terhadap SARS-COV-2 dalam serum dan plasma manusia. Kit Deteksi Antibodi Sars-COV-2 dapat digunakan sebagai bantuan dalam mengidentifikasi individu dengan respons imun adaptif terhadap SARS-COV-2, yang menunjukkan infeksi baru-baru ini atau sebelumnya. Kit Deteksi Antibodi SARS-COV-2 Netralisasi tidak boleh digunakan untuk mendiagnosis infeksi SARS-COV-2 akut.
【PERKENALAN】
Infeksi coronavirus biasanya menginduksi respons antibodi penetralisir. Tingkat serokonversi pada pasien COVID-19 masing-masing adalah 50% dan 100% pada hari ke 7 dan 14 onset gejala. Untuk menyajikan pengetahuan, antibodi penetral virus yang sesuai dalam darah adalah diakui sebagai target untuk menentukan kemanjuran antibodi dan konsentrasi antibodi penetralisir yang lebih tinggi menunjukkan kemanjuran perlindungan yang lebih tinggi. Tes netralisasi reduksi plak (PRNT) telah diakui sebagai standar emas untuk mendeteksi antibodi penetralisir. Namun, karena throughputnya yang rendah dan persyaratan yang lebih tinggi untuk operasi, PRNT tidak praktis untuk serodiagnosis skala besar dan evaluasi vaksin. Kit Deteksi Antibodi SARS-COV-2 penetrral didasarkan pada metodologi uji imunosorben terkait enzim (ELISA) yang kompetitif, yang dapat mendeteksi antibodi penetral dalam sampel darah serta mengakses tingkat konsentrasi antibodi ini secara khusus.
【Prosedur Uji】
1. Dalam tabung terpisah, alikuot 120μl dari larutan HACE2-HRP yang disiapkan.
2. Tambahkan 6 μl kalibrator, sampel yang tidak diketahui, kontrol kualitas di setiap tabung dan aduk rata.
3. Transfer 100μl dari masing -masing campuran yang disiapkan pada langkah 2 menjadi sumur mikro yang sesuai sesuai dengan konfigurasi uji yang telah dirancang.
3. Lemparkan pelat dengan pelat sealer dan inkubasi pada suhu 37 ° C selama 60 menit.
4. Tingkat pelat sealer dan cuci pelat dengan sekitar 300 μl larutan cuci 1 × per sumur selama empat kali.
5.Tap piring di atas handuk kertas untuk menghilangkan sisa cairan di sumur setelah mencuci tangga.
6. Tambahkan 100 μl larutan TMB untuk masing -masing sumur dan inkubasi pelat dalam gelap pada 20 - 25 ° C selama 20 menit.
7. Tambahkan 50 μl larutan berhenti untuk masing -masing sumur untuk menghentikan reaksi.
8. Baca absorbansi dalam pembaca mikro pada 450 nm dalam 10 menit (630Nm sebagai aksesori direkomendasikan untuk kinerja presisi yang lebih tinggi.
