SARS-COV-2 ანტისხეულების გამოვლენის ნაკრები （ELISA)

【განზრახული გამოყენება】

SARS-COV-2 ანტისხეულების გამოვლენის ნეიტრალიზაციის კომპლექტი არის კონკურენტული ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული გამოკვლევა (ELISA), რომელიც განკუთვნილია ადამიანის შრატში და პლაზმაში SARS-COV-2– ის მთლიანი ნეიტრალიზებული ანტისხეულების თვისებრივი და ნახევრად რაოდენობრივი გამოვლენისთვის. SARS- cov-2 ანტისხეულების გამოვლენის კომპლექტის განეიტრალება შეიძლება გამოყენებულ იქნას, როგორც დახმარება SARS- COV-2– ზე ადაპტირებული იმუნური პასუხის მქონე პირთა იდენტიფიცირებაში, რაც მიუთითებს ბოლოდროინდელ ან წინა ინფექციაზე. SARS-COV-2 ანტისხეულების გამოვლენის ნაკრები არ უნდა იქნას გამოყენებული მწვავე SARS-COV-2 ინფექციის დიაგნოზირებისთვის.

【შესავალი】

კორონავირუსის ინფექციები, როგორც წესი, იწვევს ანტისხეულების პასუხების განეიტრალებას. CovID-19 პაციენტებში სეროკონვერსიული განაკვეთები შეადგენს 50% და 100% 7 დღეს და 14 დღის შემდეგ. ცოდნის დასადგენად, სისხლში ანტისხეულების ანტისხეულების განეიტრალების შესაბამისი ვირუსი აღიარებულია, როგორც ანტისხეულების ეფექტურობის განსაზღვრის სამიზნე და ანტისხეულების ანტისხეულების უფრო მაღალი კონცენტრაცია მიუთითებს უფრო მაღალი დაცვის ეფექტურობაზე. დაფის შემცირების ნეიტრალიზაციის ტესტი (PRNT) აღიარებულია, როგორც ოქროს სტანდარტი ანტისხეულების განეიტრალების მიზნით. ამასთან, მისი დაბალი გამტარუნარიანობისა და ოპერაციის უფრო მაღალი მოთხოვნილების გამო, PRNT არ არის პრაქტიკული ფართომასშტაბიანი სეროდიაგენოზისა და ვაქცინების შეფასებისთვის. SARS-COV-2 ანტისხეულების გამოვლენის ნაკრები ნეიტრალიზაციის კომპლექტს ემყარება ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული გამოკვლევის (ELISA) მეთოდოლოგიაზე, რომელსაც შეუძლია აღმოაჩინოს ანტისხეულების ნეიტრალიზებული ანტისხეული, ისევე როგორც სპეციალურად წვდომა ამ ტიპის ანტისხეულების კონცენტრაციის დონეზე.

 【ტესტის პროცედურა】

1. ცალკეულ მილებში, მომზადებული HACE2-HRP ხსნარის 120μl.

2. კალიბრატორების 6 μl, უცნობი ნიმუშები, ხარისხის კონტროლი თითოეულ მილში და კარგად აურიეთ.

3. გადააკეთეთ 100 μl თითოეული ნარევი, რომელიც მომზადებულია მე -2 ნაბიჯში, შესაბამისი მიკროპლატის ჭაბურღილებში, წინასწარ განსაზღვრული ტესტის კონფიგურაციის მიხედვით.

3. დაასხით ფირფიტა ფირფიტა და ინკუბაცია 37 ° C ტემპერატურაზე 60 წუთის განმავლობაში.

4. დაასხით ფირფიტა და გაირეცხეთ ფირფიტა მიახლოებით 300 μl 1 × სარეცხი ხსნარით თითო ჭაბურღილზე ოთხჯერ.

5. დაასხით ფირფიტა ქაღალდის პირსახოცზე, რომ ამოიღოთ ნარჩენი სითხე ჭაბურღილებში, სარეცხი ნაბიჯების შემდეგ.

6. ADD 100 μl TMB ხსნარი თითოეულ ჭაბურღილზე და შეიტანეთ ფირფიტა სიბნელეში 20 - 25 ° C ტემპერატურაზე 20 წუთის განმავლობაში.

7.ADD 50 μl გაჩერების ხსნარი თითოეულ ჭაბურღილზე, რომ შეაჩერონ რეაქცია.

8. წაიკითხეთ შთანთქმის მიკროპლატის მკითხველში 450 ნმ -ზე 10 წუთში (630 ნმ, როგორც აქსესუარი, რეკომენდებულია უფრო მაღალი სიზუსტით.