ಟೆಸ್ಟ್‌ಸೀಲಾಬ್ಸ್ SARS-CoV-2 ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ (ELISA)
ಸಣ್ಣ ವಿವರಣೆ:
SARS-CoV-2 ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪರೀಕ್ಷಾ ಕ್ಯಾಸೆಟ್ ಒಂದು ಕ್ಷಿಪ್ರ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇ ಆಗಿದೆ. ಈ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಕೊರೊನಾವೈರಸ್ ಕಾಯಿಲೆ 2019 ರ ವಿರುದ್ಧ ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಗುಣಾತ್ಮಕ ಪತ್ತೆಗಾಗಿ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇದನ್ನು ಮಾನವನ ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತ, ಸೀರಮ್ ಅಥವಾ ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಮಾದರಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಬಳಸಬಹುದು. ಈ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಮಾನವನ ಕಾದಂಬರಿ ವಿರೋಧಿ ಕೊರೊನಾವೈರಸ್ ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಟೈಟರ್‌ಗಳ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡುವಲ್ಲಿ ಸಹಾಯಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ.
 ತ್ವರಿತ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು: ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ-ನಿಖರ ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ | ಲ್ಯಾಬ್-ಗ್ರೇಡ್ ನಿಖರತೆ: ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಮತ್ತು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ |
| ಎಲ್ಲಿಯಾದರೂ ಪರೀಕ್ಷಿಸಿ: ಲ್ಯಾಬ್ ಭೇಟಿ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ. | ಪ್ರಮಾಣೀಕೃತ ಗುಣಮಟ್ಟ: 13485, CE, Mdsap ಕಂಪ್ಲೈಂಟ್ |
| ಸರಳ ಮತ್ತು ಸುವ್ಯವಸ್ಥಿತ: ಬಳಸಲು ಸುಲಭ, ಯಾವುದೇ ತೊಂದರೆ ಇಲ್ಲ. | ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಅನುಕೂಲತೆ: ಮನೆಯಲ್ಲಿಯೇ ಆರಾಮವಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಿ |
【ತತ್ವ】
SARS-CoV-2 ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ELISA ವಿಧಾನವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ.
ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಗ್ರಾಹಕ ಬಂಧಕ ಡೊಮೇನ್ (RBD), ವೈರಲ್ ಸ್ಪೈಕ್ (S) ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನಿಂದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮತ್ತು ಆತಿಥೇಯ ಕೋಶವನ್ನು ಬಳಸುವುದು.
ಗ್ರಾಹಕ ACE2, ಈ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ವೈರಸ್-ಹೋಸ್ಟ್ ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಅನುಕರಿಸುವಂತೆ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಕ್ಯಾಲಿಬ್ರೇಟರ್‌ಗಳು, ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ಸೀರಮ್ ಅಥವಾ ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಬೆರೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
hACE2-HRP ಕಾಂಜುಗೇಟ್ ಹೊಂದಿರುವ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಸಣ್ಣ ಕೊಳವೆಗಳಲ್ಲಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ನಂತರ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು ಒಳಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ
ನಿಶ್ಚಲವಾದ ಮರುಸಂಯೋಜಿತ SARS-CoV-2 RBD ತುಣುಕು (RBD) ಹೊಂದಿರುವ ಮೈಕ್ರೋಪ್ಲೇಟ್ ಬಾವಿಗಳು
30 ನಿಮಿಷಗಳ ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಷನ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಕ್ಯಾಲಿಬ್ರೇಟರ್‌ಗಳಲ್ಲಿ RBD ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯ, QC ಮತ್ತು
ಬಾವಿಗಳಲ್ಲಿ ನಿಶ್ಚಲಗೊಳಿಸಲಾದ RBD ಯನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಂಧಕಕ್ಕಾಗಿ ಮಾದರಿಗಳು hACE2-HRP ಯೊಂದಿಗೆ ಸ್ಪರ್ಧಿಸುತ್ತವೆ. ನಂತರ
ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಶನ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಬಾವಿಗಳನ್ನು 4 ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬಂಧಿಸದ hACE2-HRP ಕಾಂಜುಗೇಟ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ.
ನಂತರ TMB ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ 20 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ a
ನೀಲಿ ಬಣ್ಣ. 1N HCl ಸೇರಿಸಿದಾಗ ಬಣ್ಣ ಬೆಳವಣಿಗೆ ನಿಲ್ಲುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ
ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೋಮೆಟ್ರಿಕ್‌ನಲ್ಲಿ 450 nm ನಲ್ಲಿ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ರೂಪುಗೊಂಡ ಬಣ್ಣದ ತೀವ್ರತೆಯು ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿರುತ್ತದೆ
ಇರುವ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣ, ಮತ್ತು ಅದೇ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾದ ಮಾನದಂಡಗಳ ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ ವಿಲೋಮವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ.
ಒದಗಿಸಲಾದ ಮಾಪನಾಂಕ ನಿರ್ಣಯಕಾರಕಗಳಿಂದ ರೂಪುಗೊಂಡ ಮಾಪನಾಂಕ ನಿರ್ಣಯ ರೇಖೆಯೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಸಾಂದ್ರತೆಯು
ನಂತರ ಅಜ್ಞಾತ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ.
【ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಸಾಮಗ್ರಿಗಳು ಆದರೆ ಒದಗಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ】
1. ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ಅಥವಾ ಅಯಾನೀಕರಿಸಿದ ನೀರು
2. ನಿಖರವಾದ ಪೈಪೆಟ್‌ಗಳು: 10μL, 100μL, 200μL ಮತ್ತು 1 mL
3. ಬಿಸಾಡಬಹುದಾದ ಪೈಪೆಟ್ ಸಲಹೆಗಳು
4. 450nm ನಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಓದುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವಿರುವ ಮೈಕ್ರೋಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್.
5. ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಾಗದ
6. ಗ್ರಾಫ್ ಪೇಪರ್
7. ವೋರ್ಟೆಕ್ಸ್ ಮಿಕ್ಸರ್ ಅಥವಾ ತತ್ಸಮಾನ
【ಮಾದರಿ ಸಂಗ್ರಹ ಮತ್ತು ಸಂಗ್ರಹಣೆ】
1. K2-EDTA ಹೊಂದಿರುವ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾದ ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಈ ಕಿಟ್‌ಗಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು.
2. ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಮುಚ್ಚಿಡಬೇಕು ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಮುನ್ನ 2 °C - 8 °C ನಲ್ಲಿ 48 ಗಂಟೆಗಳವರೆಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.
ಹೆಚ್ಚು ಕಾಲ (6 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ) ಹಿಡಿದಿಟ್ಟುಕೊಳ್ಳಲಾದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಮೊದಲು -20 °C ನಲ್ಲಿ ಒಮ್ಮೆ ಮಾತ್ರ ಫ್ರೀಜ್ ಮಾಡಬೇಕು.
ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫ್ರೀಜ್-ಥಾ ಚಕ್ರಗಳನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ.
ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್
【ಕಾರಕ ತಯಾರಿ】
1. ಎಲ್ಲಾ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಶೈತ್ಯೀಕರಣದಿಂದ ಹೊರತೆಗೆದು ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ ಮರಳಲು ಬಿಡಬೇಕು.
(20° ರಿಂದ 25°C) ಬಳಸಿದ ತಕ್ಷಣ ಎಲ್ಲಾ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.
2. ಎಲ್ಲಾ ಮಾದರಿಗಳು ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೊದಲು ಸುಳಿಯಬೇಕು.
3. hACE2-HRP ದ್ರಾವಣ ತಯಾರಿಕೆ: hACE2-HRP ಸಾರವನ್ನು 1: 51 ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವ ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ.
ಬಫರ್. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 100 μL hACE2-HRP ಸಾರವನ್ನು 5.0mL HRP ಡಿಲ್ಯೂಷನ್ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ
hACE2-HRP ದ್ರಾವಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ.
4. 1× ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣ ತಯಾರಿಕೆ: 20× ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಅಯಾನೀಕರಿಸಿದ ಅಥವಾ ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರಿನಿಂದ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ a
1:19 ರ ಪರಿಮಾಣ ಅನುಪಾತ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 20 mL 20× ವಾಶ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು 380 mL ಡಿಯೋನೈಸ್ಡ್ ಅಥವಾ
1× ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣದ 400 ಮಿಲಿ ತಯಾರಿಸಲು ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರು.
【ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನ】
1. ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ, ತಯಾರಾದ hACE2-HRP ದ್ರಾವಣದ ಸುಮಾರು 120μL.
2. ಪ್ರತಿ ಟ್ಯೂಬ್‌ನಲ್ಲಿ 6 μL ಕ್ಯಾಲಿಬ್ರೇಟರ್‌ಗಳು, ಅಪರಿಚಿತ ಮಾದರಿಗಳು, ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.
3. ಹಂತ 2 ರಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಿದ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಮಿಶ್ರಣದ 100μL ಅನ್ನು ಅನುಗುಣವಾದ ಮೈಕ್ರೋಪ್ಲೇಟ್ ಬಾವಿಗಳಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ
ಪೂರ್ವನಿರ್ಧರಿತ ಪರೀಕ್ಷಾ ಸಂರಚನೆಗೆ.
3. ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಪ್ಲೇಟ್ ಸೀಲರ್ ನಿಂದ ಮುಚ್ಚಿ 37°C ನಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವು ಕೊಡಿ.
4. ಪ್ಲೇಟ್ ಸೀಲರ್ ತೆಗೆದು, ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ ಸುಮಾರು 300 μL 1× ವಾಶ್ ದ್ರಾವಣದಿಂದ ನಾಲ್ಕು ಬಾರಿ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ತೊಳೆಯಿರಿ.
5. ತೊಳೆಯುವ ಹಂತಗಳ ನಂತರ ಬಾವಿಗಳಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವ ದ್ರವವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಪೇಪರ್ ಟವಲ್ ಮೇಲೆ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಟ್ಯಾಪ್ ಮಾಡಿ.
6. ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 100 μL TMB ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು 20 - 25°C ನಲ್ಲಿ 20 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕತ್ತಲೆಯಲ್ಲಿ ಇಡಬೇಕು.
7. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಲು ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 50 μL ಸ್ಟಾಪ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ.
8. ಮೈಕ್ರೋಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್‌ನಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು 450 nm ನಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಓದಿ (ಉಪಕರಣವಾಗಿ 630nm
ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಖರತೆಯ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಗಾಗಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ).