Testsealabs SARS-CoV-2 neitralizējošo antivielu noteikšanas komplekts (ELISA)
Īss apraksts:
SARS-CoV-2 neitralizējošo antivielu testa kasete ir ātra hromatogrāfiska imūnanalīze. Šī analīze ir paredzēta neitralizējošo antivielu pret 2019. gada koronavīrusa slimību kvalitatīvai noteikšanai. To var izmantot ar cilvēka pilnasinīm, seruma vai plazmas paraugiem. Tests kalpo kā palīglīdzeklis cilvēka antivielu pret jauno koronavīrusu neitralizējošo antivielu titru līmeņa novērtēšanā.
 Ātri rezultāti: laboratorijas precizitāte dažu minūšu laikā | Laboratorijas līmeņa precizitāte: uzticama un drošticama |
| Pārbaudiet jebkur: nav nepieciešams apmeklēt laboratoriju | Sertificēta kvalitāte: 13485, CE, atbilst Mdsap prasībām |
| Vienkāršs un optimizēts: viegli lietojams, bez problēmām | Maksimāla ērtība: ērti pārbaudiet mājās |
【PRINCIPS】
SARS-CoV-2 neitralizējošo antivielu noteikšanas komplekts ir balstīts uz konkurējošu ELISA metodoloģiju.
Izmantojot attīrītu receptoru saistošo domēnu (RBD), vīrusu tapas (S) proteīna proteīnu un saimniekšūnu
receptoru ACE2, šis tests ir izstrādāts, lai atdarinātu vīrusa un saimnieka neitralizējošo mijiedarbību.
Kalibratori, kvalitātes kontroles un seruma vai plazmas paraugi tiek atsevišķi labi sajaukti atšķaidīšanas procesā.
buferšķīdumu, kas satur hACE2-HRP konjugātu, sadala alikvotās mazās mēģenēs. Pēc tam maisījumus pārnes
mikroplašu iedobes, kas satur imobilizētu rekombinanto SARS-CoV-2 RBD fragmentu (RBD)
inkubācija. 30 minūšu inkubācijas laikā RBD specifiskās antivielas kalibratoros, kvalitātes kontrolē un
paraugi konkurēs ar hACE2-HRP par specifisku saistīšanos ar iedobēs imobilizēto RBD. Pēc tam
Inkubācijas laikā iedobes tiek mazgātas 4 reizes, lai atdalītu nesaistīto hACE2-HRP konjugātu. Šķīdums, kas satur
Pēc tam pievieno TMB un inkubē 20 minūtes istabas temperatūrā, kā rezultātā attīstās
zilā krāsā. Krāsas attīstība tiek apturēta, pievienojot 1N HCl, un absorbcija ir
mērīts spektrofotometriski pie 450 nm. Izveidojušās krāsas intensitāte ir proporcionāla
esošā enzīma daudzums un ir apgriezti proporcionāls tādā pašā veidā analizēto standartu daudzumam.
Salīdzinot ar kalibrēšanas līkni, ko veido pievienotie kalibratori, koncentrācija
Pēc tam tiek aprēķināts neitralizējošo antivielu daudzums nezināmajā paraugā.
【NEPIECIEŠAMIE, BET NAV NODROŠINĀTIE MATERIĀLI】
1. Destilēts vai dejonizēts ūdens
2. Precīzijas pipetes: 10 μL, 100 μL, 200 μL un 1 ml
3. Vienreizlietojamie pipešu uzgaļi
4. Mikroplašu lasītājs, kas spēj nolasīt absorbciju pie 450 nm.
5. Absorbējošs papīrs
6. Milimetru papīrs
7. Vorteksa maisītājs vai līdzvērtīgs
【PARAUGU SAVĀKŠANA UN GLABĀŠANA】
1. Šim komplektam var izmantot seruma un plazmas paraugus, kas savākti mēģenēs ar K2-EDTA.
2. Paraugi ir jāaizver, un tos var uzglabāt līdz 48 stundām 2 °C–8 °C temperatūrā pirms analīzes veikšanas.
Paraugi, kas tiek glabāti ilgāku laiku (līdz 6 mēnešiem), pirms analīzes jāveic tikai vienu reizi sasaldējot -20 °C temperatūrā.
Izvairieties no atkārtotiem sasaldēšanas-atkausēšanas cikliem.
PROTOKOLS
【Reaģenta sagatavošana】
1. Pirms lietošanas visi reaģenti jāizņem no ledusskapja un jāļauj tiem sasilt līdz istabas temperatūrai.
(20° līdz 25°C). Pēc lietošanas visus reaģentus nekavējoties uzglabājiet ledusskapī.
2. Visi paraugi un kontroles pirms lietošanas jāsakrata vorteksā.
3. hACE2-HRP šķīduma pagatavošana: atšķaidiet hACE2-HRP koncentrātu atšķaidīšanas attiecībā 1:51 ar atšķaidīšanas
Buferšķīdums. Piemēram, atšķaidiet 100 μL hACE2-HRP koncentrāta ar 5,0 ml HRP atšķaidīšanas buferšķīduma, lai
Pagatavojiet hACE2-HRP šķīdumu.
4. 1× mazgāšanas šķīduma pagatavošana: Atšķaidiet 20× mazgāšanas šķīdumu ar dejonizētu vai destilētu ūdeni, izmantojot
tilpuma attiecība 1:19. Piemēram, atšķaidiet 20 ml 20× mazgāšanas šķīduma ar 380 ml dejonizēta vai
destilēts ūdens, lai pagatavotu 400 ml 1× mazgāšanas šķīduma.
【Testa procedūra】
1. Atsevišķās mēģenēs sadaliet 120 μL sagatavotā hACE2-HRP šķīduma.
2. Katrā mēģenē pievienojiet 6 μL kalibratoru, nezināmu paraugu, kvalitātes kontroles un labi samaisiet.
3. Pārnesiet 100 μL katra 2. solī sagatavotā maisījuma atbilstošajās mikroplašu iedobēs saskaņā ar
iepriekš izstrādātai testa konfigurācijai.
3. Pārklājiet plati ar plākšņu blīvēšanas līdzekli un inkubējiet 37°C temperatūrā 30 minūtes.
4. Noņemiet plāksnes blīvējumu un nomazgājiet plāksni ar aptuveni 300 μL 1× mazgāšanas šķīduma uz iedobi četras reizes.
5. Pēc mazgāšanas darbībām uzsitiet pa plāksni pret papīra dvieli, lai noņemtu atlikušo šķidrumu no iedobēm.
6. Katrā iedobē pievienojiet 100 μL TMB šķīduma un inkubējiet plati tumsā 20–25 °C temperatūrā 20 minūtes.
7. Katrā iedobē pievienojiet 50 μL apturēšanas šķīduma, lai apturētu reakciju.
8. Nolasiet absorbcijas mērījumus mikroplašu lasītājā pie 450 nm 10 minūšu laikā (630 nm ir pieejams kā piederums).
ieteicams augstākai precizitātei).