SARS-CoV-2 Meneutralkan Kit Pengesanan Antibodi (ELISA)
【Penggunaan yang dimaksudkan】
SARS-COV-2 Meneutralkan Kit Pengesanan Antibodi adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang kompetitif (ELISA) yang dimaksudkan untuk pengesanan kualitatif dan separa kuantitatif antibodi meneutralkan kepada SARS-COV-2 dalam serum manusia dan plasma. Kit pengesanan antibodi SARS-Cov-2 yang meneutralkan boleh digunakan sebagai bantuan dalam mengenal pasti individu dengan tindak balas imun adaptif terhadap SARS-COV-2, yang menunjukkan jangkitan baru-baru ini atau terdahulu. Kit pengesanan antibodi SARS-COV-2 yang meneutralkan tidak boleh digunakan untuk mendiagnosis jangkitan SARS-COV-2 akut.
【Pengenalan】
Jangkitan coronavirus biasanya mendorong tindak balas antibodi meneutralkan. Kadar serokonversi pada pesakit Covid-19 adalah 50% dan 100% pada hari ke-7 dan 14 selepas gejala gejala. Untuk membentangkan pengetahuan, virus yang sama meneutralkan antibodi dalam darah adalah diiktiraf sebagai sasaran untuk menentukan keberkesanan antibodi dan kepekatan yang lebih tinggi daripada antibodi meneutralkan menunjukkan keberkesanan perlindungan yang lebih tinggi. Ujian peneutralan pengurangan plak (PRNT) telah diiktiraf sebagai standard emas untuk mengesan antibodi meneutralkan. Walau bagaimanapun, disebabkan oleh kelebihan yang rendah dan keperluan yang lebih tinggi untuk operasi, PRNT tidak praktikal untuk serodiagnosis berskala besar dan penilaian vaksin. SARS-COV-2 yang meneutralkan kit pengesanan antibodi adalah berdasarkan kepada metodologi ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim (ELISA) yang kompetitif, yang dapat mengesan antibodi yang meneutralkan dalam sampel darah serta mengakses tahap kepekatan antibodi jenis ini.
【Prosedur ujian】
1. Dalam tiub berasingan, aliquot 120μl penyelesaian HACE2-HRP yang disediakan.
2.add 6 μl calibrators, sampel yang tidak diketahui, kawalan kualiti dalam setiap tiub dan kacau dengan baik.
3.Transfer 100μl setiap campuran yang disediakan dalam langkah 2 ke dalam telaga mikroplat yang sepadan mengikut konfigurasi ujian yang telah direka bentuk.
3.Perahkan plat dengan pembalut plat dan inkubat pada suhu 37 ° C selama 60 minit.
4.Membuat pengedap plat dan basuh plat dengan kira -kira 300 μl larutan 1 × basuh setiap sumur selama empat kali.
5.Tap plat pada tuala kertas untuk mengeluarkan cecair sisa di telaga selepas mencuci langkah.
6.add 100 μl larutan TMB untuk setiap sumur dan mengeram plat dalam gelap pada 20 - 25 ° C selama 20 minit.
7.Add 50 μl penyelesaian berhenti ke setiap telaga untuk menghentikan reaksi.
8. Baca penyerapan dalam pembaca mikroplat pada 450 nm dalam masa 10 minit (630nm sebagai aksesori disyorkan untuk prestasi ketepatan yang lebih tinggi.
