Kit de detecção de anticorpos neutralizantes (ELISA) Testsealabs SARS-CoV-2
Descrição curta:
O Cassete de Teste de Anticorpos Neutralizantes para SARS-CoV-2 é um imunoensaio cromatográfico rápido. Este ensaio foi desenvolvido para a detecção qualitativa de anticorpos neutralizantes contra a Doença do Coronavírus 2019. Pode ser utilizado com amostras de sangue total, soro ou plasma humano. O teste serve como auxiliar na avaliação dos níveis de títulos de anticorpos neutralizantes humanos contra o novo coronavírus.
 Resultados rápidos: precisão laboratorial em minutos | Precisão de nível laboratorial: confiável e confiável |
| Teste em qualquer lugar: não é necessária visita ao laboratório | Qualidade Certificada: 13485, CE, Compatível com Mdsap |
| Simples e otimizado: fácil de usar, sem complicações | Máxima conveniência: teste confortavelmente em casa |
【PRINCÍPIO】
O Kit de Detecção de Anticorpos Neutralizantes SARS-CoV-2 é baseado na metodologia ELISA competitiva.
Usando o domínio de ligação ao receptor purificado (RBD), proteína da proteína spike viral (S) e a célula hospedeira
receptor ACE2, este teste foi desenvolvido para imitar a interação neutralizante vírus-hospedeiro.
Calibradores, controles de qualidade e amostras de soro ou plasma são misturados individualmente e bem em diluição
tampão contendo conjugado hACE2-HRP aliquotado em pequenos tubos. Em seguida, as misturas são transferidas para
os poços da microplaca contendo fragmento RBD (RBD) recombinante SARS-CoV-2 imobilizado para
incubação. Durante a incubação de 30 minutos, o anticorpo específico RBD nos calibradores, QC e
As amostras competirão com o hACE2-HRP pela ligação específica do RBD imobilizado nos poços.
Após a incubação, os poços são lavados 4 vezes para remover o conjugado hACE2-HRP não ligado. Uma solução de
O TMB é então adicionado e incubado por 20 minutos à temperatura ambiente, resultando no desenvolvimento de um
cor azul. O desenvolvimento da cor é interrompido com a adição de HCl 1N, e a absorbância é
medido espectrofotometricamente a 450 nm. A intensidade da cor formada é proporcional à
quantidade de enzima presente e é inversamente relacionada à quantidade de padrões analisados da mesma maneira.
Através da comparação com a curva de calibração formada pelos calibradores fornecidos, a concentração de
Os anticorpos neutralizantes na amostra desconhecida são então calculados.
【MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO FORNECIDOS】
1. Água destilada ou deionizada
2. Pipetas de precisão: 10μL, 100μL, 200μL e 1 mL
3. Ponteiras de pipeta descartáveis
4. Leitor de microplacas capaz de ler absorbância a 450 nm.
5. Papel absorvente
6. Papel milimetrado
7. Misturador Vortex ou equivalente
【COLETA E ARMAZENAMENTO DE AMOSTRAS】
1. Amostras de soro e plasma coletadas em tubos contendo K2-EDTA podem ser usadas para este kit.
2. As amostras devem ser tampadas e podem ser armazenadas por até 48 horas a 2 °C - 8 °C antes da análise.
Amostras mantidas por um período mais longo (até 6 meses) devem ser congeladas apenas uma vez a -20 °C antes do ensaio.
Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.
PROTOCOLO
【Preparação de reagentes】
1. Todos os reagentes devem ser retirados da refrigeração e deixados retornar à temperatura ambiente antes do uso.
(20° a 25°C). Conservar todos os reagentes na geladeira imediatamente após o uso.
2. Todas as amostras e controles devem ser agitados antes do uso.
3. Preparação da solução de hACE2-HRP: Diluir o concentrado de hACE2-HRP na proporção de diluição de 1:51 com solução de diluição
Tampão. Por exemplo, diluir 100 μL de concentrado de hACE2-HRP com 5,0 mL de tampão de diluição de HRP para
faça uma solução hACE2-HRP.
4. Preparação da solução de lavagem 1×: Dilua a solução de lavagem 20× com água deionizada ou destilada com um
proporção de volume de 1:19. Por exemplo, diluir 20 mL de solução de lavagem 20× com 380 mL de solução deionizada ou
água destilada para fazer 400 mL de solução de lavagem 1×.
【Procedimento de teste】
1. Em tubos separados, aliquote 120μL da solução hACE2-HRP preparada.
2. Adicione 6 μL de calibradores, amostras desconhecidas e controles de qualidade em cada tubo e misture bem.
3. Transfira 100μL de cada mistura preparada na etapa 2 para os poços correspondentes da microplaca de acordo com a
para configuração de teste pré-projetada.
3. Cubra a placa com Plate Sealer e incubar a 37°C por 30 minutos.
4. Remova o selador de placa e lave a placa com aproximadamente 300 μL de solução de lavagem 1× por poço, quatro vezes.
5. Bata a placa em papel-toalha para remover o líquido residual nos poços após as etapas de lavagem.
6. Adicione 100 μL de solução TMB a cada poço e incubar a placa no escuro a 20 - 25°C por 20 minutos.
7. Adicione 50 μL de solução de parada a cada poço para interromper a reação.
8. Leia a absorbância no leitor de microplacas a 450 nm em 10 minutos (630 nm como acessório é
recomendado para desempenho de maior precisão).