Testsealabs SARS-CoV-2 උදාසීන කිරීමේ ප්රතිදේහ හඳුනාගැනීමේ කට්ටලය (ELISA)
කෙටි විස්තරය:
SARS-CoV-2 උදාසීන ප්රතිදේහ පරීක්ෂණ කැසට් පටය යනු වේගවත් වර්ණදේහ ප්රතිශක්තිකරණ විශ්ලේෂණයකි. මෙම විශ්ලේෂණය 2019 කොරෝනා වයිරස් රෝගයට එරෙහිව උදාසීන කරන ප්රතිදේහවල ගුණාත්මක හඳුනාගැනීම සඳහා නිර්මාණය කර ඇත. එය මිනිස් සම්පූර්ණ රුධිරය, සෙරුමය හෝ ප්ලාස්මා නිදර්ශක සමඟ භාවිතා කළ හැකිය. මෙම පරීක්ෂණය මානව නව කොරෝනා වෛරස් උදාසීන කරන ප්රතිදේහ ටයිටර මට්ටම් ඇගයීමට ආධාරකයක් ලෙස සේවය කරයි.
 වේගවත් ප්රතිඵල: මිනිත්තු කිහිපයකින් රසායනාගාර නිරවද්යතාවය | රසායනාගාර ශ්රේණියේ නිරවද්යතාවය: විශ්වාසදායක සහ විශ්වාසදායක |
| ඕනෑම තැනක පරීක්ෂා කරන්න: රසායනාගාර චාරිකා අවශ්ය නොවේ. | සහතික කළ ගුණාත්මකභාවය: 13485, CE, Mdsap අනුකූල |
| සරල සහ විධිමත්: භාවිතයට පහසු, කරදරයකින් තොරව | උපරිම පහසුව: නිවසේදී සුවපහසු ලෙස පරීක්ෂා කරන්න |
【මූලධර්මය】
SARS-CoV-2 උදාසීන කිරීමේ ප්රතිදේහ හඳුනාගැනීමේ කට්ටලය තරඟකාරී ELISA ක්රමවේදය මත පදනම් වේ.
පවිත්ර කළ ප්රතිග්රාහක බන්ධන වසම (RBD), වෛරස් ස්පයික් (S) ප්රෝටීනයෙන් ලැබෙන ප්රෝටීන් සහ ධාරක සෛලය භාවිතා කිරීම.
ප්රතිග්රාහක ACE2, මෙම පරීක්ෂණය වෛරස්-ධාරක උදාසීන අන්තර්ක්රියා අනුකරණය කිරීම සඳහා නිර්මාණය කර ඇත.
ක්රමාංකන යන්ත්ර, තත්ත්ව පාලන සහ සෙරුමය හෝ ප්ලාස්මා සාම්පල තනි තනිව තනුක කිරීමේදී හොඳින් මිශ්ර කර ඇත.
කුඩා නල වල hACE2-HRP සංයුක්ත අඩංගු බෆරය. ඉන්පසු මිශ්රණ මාරු කරනු ලැබේ.
නිශ්චල ප්රතිසංයෝජක SARS-CoV-2 RBD කොටස (RBD) අඩංගු ක්ෂුද්ර තහඩු ළිං සඳහා
මිනිත්තු 30 ක පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කාලය තුළ, ක්රමාංකන යන්ත්රවල RBD නිශ්චිත ප්රතිදේහය, QC සහ
ළිංවල නිශ්චල කර ඇති RBD නිශ්චිත බන්ධනය සඳහා සාම්පල hACE2-HRP සමඟ තරඟ කරනු ඇත. පසුව
ඉන්කියුබේෂන් අතරතුර, නොබැඳි hACE2-HRP සංයුක්තය ඉවත් කිරීම සඳහා ළිං 4 වතාවක් සෝදා හරිනු ලැබේ.
ඉන්පසු TMB එකතු කර කාමර උෂ්ණත්වයේ දී මිනිත්තු 20ක් පුර්ව ලියාපදිංචි කරනු ලැබේ, එහි ප්රතිඵලයක් ලෙස a වර්ධනය වේ.
නිල් වර්ණය. 1N HCl එකතු කිරීමත් සමඟ වර්ණ වර්ධනය නතර වන අතර අවශෝෂණය
වර්ණාවලි ඡායාරූපමිතිකව 450 nm දී මනිනු ලැබේ. සාදන ලද වර්ණයෙහි තීව්රතාවය සමානුපාතික වේ.
පවතින එන්සයිම ප්රමාණය, සහ ඒ ආකාරයෙන්ම පරීක්ෂා කරන ලද ප්රමිති ප්රමාණයට ප්රතිලෝමව සම්බන්ධ වේ.
සපයන ලද ක්රමාංකන යන්ත්ර මගින් සාදන ලද ක්රමාංකන වක්රය සමඟ සංසන්දනය කිරීමෙන්, සාන්ද්රණය
නොදන්නා සාම්පලයේ උදාසීන කරන ප්රතිදේහ ගණනය කරනු ලැබේ.
【අවශ්ය ද්රව්ය නමුත් සපයා නැත】
1. ආසවනය කළ හෝ ඩයෝනීකරණය කළ ජලය
2. නිරවද්ය පයිප්ප: 10μL, 100μL, 200μL සහ 1 mL
3. ඉවත දැමිය හැකි පයිප්ප ඉඟි
4. 450nm දී අවශෝෂණය කියවීමේ හැකියාව ඇති ක්ෂුද්ර තහඩු කියවනය.
5. අවශෝෂක කඩදාසි
6. ප්රස්ථාර කඩදාසි
7. වෝටෙක්ස් මික්සර් හෝ ඊට සමාන
【විශේෂිත එකතු කිරීම සහ ගබඩා කිරීම】
1. K2-EDTA අඩංගු නලවල එකතු කරන ලද සෙරුමය සහ ප්ලාස්මා සාම්පල මෙම කට්ටලය සඳහා භාවිතා කළ හැක.
2. සාම්පල ආවරණය කළ යුතු අතර පරීක්ෂා කිරීමට පෙර 2 °C - 8 °C උෂ්ණත්වයකදී පැය 48ක් දක්වා ගබඩා කළ හැක.
දිගු කාලයක් (මාස 6ක් දක්වා) රඳවා තබා ගන්නා ලද නිදර්ශක, පරීක්ෂා කිරීමට පෙර -20 °C දී එක් වරක් පමණක් ශීත කළ යුතුය.
නැවත නැවත කැටි-දියවන චක්ර වළක්වා ගන්න.
කෙටුම්පත
【ප්රතික්රියාකාරක සකස් කිරීම】
1. සියලුම ප්රතික්රියාකාරක ශීතකරණයෙන් පිටතට ගෙන භාවිතයට පෙර කාමර උෂ්ණත්වයට නැවත පැමිණීමට ඉඩ දිය යුතුය.
(20° සිට 25°C දක්වා). භාවිතයෙන් පසු වහාම සියලුම ප්රතික්රියාකාරක ශීතකරණයේ ගබඩා කරන්න.
2. සියලුම සාම්පල සහ පාලන භාවිතයට පෙර සුළි සුළඟට දැමිය යුතුය.
3. hACE2-HRP ද්රාවණය සකස් කිරීම: hACE2-HRP සාන්ද්රණය 1:51 තනුක අනුපාතයට තනුක කිරීම සමඟ තනුක කරන්න.
බෆරය. උදාහරණයක් ලෙස, hACE2-HRP සාන්ද්රණය 100 μL ක් HRP තනුක බෆරය 5.0mL සමඟ තනුක කරන්න
hACE2-HRP විසඳුමක් සාදන්න.
4. 1× සේදීමේ ද්රාවණය සකස් කිරීම: 20× සේදීමේ ද්රාවණය අයනීකරණය කළ හෝ ආසවනය කළ ජලයෙන් තනුක කරන්න.
පරිමාව අනුපාතය 1:19. උදාහරණයක් ලෙස, 20× වොෂ් ද්රාවණයෙන් 20 mL ක්, අයනීකරණය කළ හෝ 380 mL සමඟ තනුක කරන්න.
1× සේදීමේ ද්රාවණයෙන් මිලි ලීටර් 400ක් සෑදීමට ආස්රැත ජලය.
【පරීක්ෂණ ක්රියා පටිපාටිය】
1. වෙනම නලවල, සකස් කළ hACE2-HRP ද්රාවණයෙන් 120μL පමණ එකතු කරන්න.
2. සෑම නළයකටම ක්රමාංකන යන්ත්ර 6 μL, නොදන්නා සාම්පල, තත්ත්ව පාලන එකතු කර හොඳින් මිශ්ර කරන්න.
3. පියවර 2 හි සකස් කරන ලද සෑම මිශ්රණයකින්ම 100μL බැගින් අනුරූප ක්ෂුද්ර තහඩු ළිංවලට මාරු කරන්න.
පෙර සැලසුම් කළ පරීක්ෂණ වින්යාසයට.
3. තහඩුව ප්ලේට් සීලර් එකකින් ආවරණය කර 37°C දී විනාඩි 30ක් ඉන්කියුබේට් කරන්න.
4. තහඩු මුද්රා යන්ත්රය ඉවත් කර, ළිඳකට ආසන්න වශයෙන් 300 μL 1× සේදීමේ ද්රාවණයකින් තහඩුව හතර වතාවක් සෝදන්න.
5. සේදීමේ පියවරෙන් පසු ළිංවල ඉතිරිව ඇති දියර ඉවත් කිරීම සඳහා කඩදාසි තුවායක් මත තහඩුව තට්ටු කරන්න.
6. සෑම ළිඳකටම TMB ද්රාවණය 100 μL බැගින් එකතු කර, තහඩුව අඳුරු තැනක 20 - 25°C උෂ්ණත්වයකදී විනාඩි 20ක් පුර්ව ගන්වන්න.
7. ප්රතික්රියාව නැවැත්වීම සඳහා සෑම ළිඳකටම Stop Solution 50 μL බැගින් එක් කරන්න.
8. මිනිත්තු 10ක් ඇතුළත 450 nm දී ක්ෂුද්ර තහඩු කියවනයේ අවශෝෂණය කියවන්න (උපාංගයක් ලෙස 630nm
ඉහළ නිරවද්යතා කාර්ය සාධනයක් සඳහා නිර්දේශ කෙරේ).