Testsealabs komplet za odkrivanje nevtralizirajočih protiteles proti SARS-CoV-2 (ELISA)
Kratek opis:
Kaseta za testiranje nevtralizirajočih protiteles proti SARS-CoV-2 je hitri imunološki kromatografski test. Ta test je zasnovan za kvalitativno odkrivanje nevtralizirajočih protiteles proti koronavirusni bolezni 2019. Uporablja se lahko z vzorci polne človeške krvi, seruma ali plazme. Test služi kot pomoč pri ocenjevanju ravni titrov nevtralizirajočih protiteles proti novemu koronavirusu pri ljudeh.
 Hitri rezultati: laboratorijsko natančni v nekaj minutah | Laboratorijska natančnost: zanesljivo in zaupanja vredno |
| Testirajte kjer koli: obisk laboratorija ni potreben | Certificirana kakovost: 13485, CE, skladno z Mdsap |
| Preprosto in poenostavljeno: Enostavna uporaba, brez težav | Vrhunsko udobje: Udobno testiranje doma |
【NAČELO】
Komplet za odkrivanje nevtralizirajočih protiteles proti SARS-CoV-2 temelji na kompetitivni metodologiji ELISA.
Z uporabo prečiščene vezavne domene receptorjev (RBD), beljakovine iz virusne konice (S) in gostiteljske celice
receptor ACE2, je ta test zasnovan tako, da posnema nevtralizirajočo interakcijo med virusom in gostiteljem.
Kalibratorji, kontrolni vzorci kakovosti in vzorci seruma ali plazme se posamično dobro premešajo v razredčitveni raztopini.
pufer, ki vsebuje konjugat hACE2-HRP, alikvotno razdeljen v majhne epruvete. Nato se zmesi prenesejo v
vdolbinice mikroplošče, ki vsebujejo imobiliziran rekombinantni fragment RBD (RBD) SARS-CoV-2 za
inkubacija. Med 30-minutno inkubacijo so bila specifična protitelesa RBD v kalibratorjih, kontroli kakovosti in
Vzorci bodo tekmovali s hACE2-HRP za specifično vezavo na RBD, imobiliziran v vdolbinicah. Po
inkubacije se vdolbinice 4-krat sperejo, da se odstrani nevezani konjugat hACE2-HRP. Raztopina
Nato dodamo TMB in inkubiramo 20 minut pri sobni temperaturi, kar povzroči razvoj
modra barva. Razvoj barve se ustavi z dodatkom 1N HCl in absorbanca je
izmerjeno spektrofotometrično pri 450 nm. Intenzivnost nastale barve je sorazmerna z
količina prisotnega encima in je obratno sorazmerna s količino standardov, analiziranih na enak način.
S primerjavo s kalibracijsko krivuljo, ki jo oblikujejo priloženi kalibratorji, se določi koncentracija
Nato se izračuna število nevtralizirajočih protiteles v neznanem vzorcu.
【POTREBNI MATERIALI, KI NISO DODANI】
1. Destilirana ali deionizirana voda
2. Precizne pipete: 10 μL, 100 μL, 200 μL in 1 mL
3. Konice pipet za enkratno uporabo
4. Čitalnik mikroplošč, ki lahko odčita absorbanco pri 450 nm.
5. Vpojni papir
6. Milimetrski papir
7. Vortex mešalnik ali enakovreden
【ZBIRANJE IN SHRANJEVANJE VZORCEV】
1. Za ta komplet se lahko uporabijo vzorci seruma in plazme, zbrani v epruvetah, ki vsebujejo K2-EDTA.
2. Vzorce je treba zapreti in jih pred testiranjem shranjevati do 48 ur pri temperaturi od 2 °C do 8 °C.
Vzorce, ki se hranijo dlje časa (do 6 mesecev), je treba pred analizo zamrzniti le enkrat pri -20 °C.
Izogibajte se ponavljajočim se ciklom zamrzovanja in odmrzovanja.
PROTOKOL
【Priprava reagenta】
1. Vse reagente je treba pred uporabo vzeti iz hladilnika in jih pustiti, da se ohladijo na sobno temperaturo.
(20 °C do 25 °C). Vse reagente takoj po uporabi shranite v hladilniku.
2. Vse vzorce in kontrolne mešanice je treba pred uporabo premešati v vrtincu.
3. Priprava raztopine hACE2-HRP: Koncentrat hACE2-HRP razredčite z raztopino v razmerju 1:51.
Pufer. Na primer, 100 μL koncentrata hACE2-HRP razredčite s 5,0 ml puferja za redčenje HRP, da dosežete
pripravite raztopino hACE2-HRP.
4. Priprava 1× raztopine za izpiranje: 20× raztopino za izpiranje razredčite z deionizirano ali destilirano vodo z
volumsko razmerje 1:19. Na primer, 20 ml 20× raztopine za izpiranje razredčite s 380 ml deionizirane ali
destilirano vodo za pripravo 400 ml 1× raztopine za izpiranje.
【Preskusni postopek】
1. V ločene epruvete odmerite po 120 μL pripravljene raztopine hACE2-HRP.
2. V vsako epruveto dodajte 6 μL kalibratorjev, neznanih vzorcev in kontrol kakovosti ter dobro premešajte.
3. V ustrezne vdolbinice mikroplošče prenesite 100 μL vsake mešanice, pripravljene v 2. koraku, v skladu z navodili.
na vnaprej načrtovano testno konfiguracijo.
3. Ploščo pokrijte z zaščitno folijo za plošče in inkubirajte pri 37 °C 30 minut.
4. Odstranite tesnilo plošče in ploščo štirikrat sperite s približno 300 μL raztopine za izpiranje 1× na vdolbinico.
5. Po pranju ploščo potrkajte po papirnati brisači, da odstranite preostalo tekočino v vdolbinicah.
6. V vsako vdolbinico dodajte 100 μL raztopine TMB in ploščo inkubirajte v temi pri 20–25 °C 20 minut.
7. V vsako vdolbinico dodajte 50 μL raztopine za zaustavitev reakcije.
8. V 10 minutah odčitajte absorbanco na čitalniku mikroplošč pri 450 nm (630 nm kot dodatna oprema).
priporočljivo za večjo natančnost delovanja).