Testsealabs SARS-CoV-2 neutraliserande antikroppsdetekteringskit (ELISA)
Kort beskrivning:
SARS-CoV-2-testkassetten för neutraliserande antikroppar är en snabb kromatografisk immunanalys. Denna analys är utformad för kvalitativ detektion av neutraliserande antikroppar mot coronavirussjukdom 2019. Den kan användas med humana helblods-, serum- eller plasmaprover. Testet fungerar som ett hjälpmedel för att utvärdera nivåerna av humana neutraliserande antikroppstitrar mot det nya coronaviruset.
 Snabba resultat: Labbnoggranna på några minuter | Precision i laboratorieklass: Tillförlitlig och pålitlig |
| Testa var som helst: Inget labbesök krävs | Certifierad kvalitet: 13485, CE, Mdsap-kompatibel |
| Enkelt och strömlinjeformat: Lätt att använda, inget krångel | Ultimat bekvämlighet: Testa bekvämt hemma |
【PRINCIP】
SARS-CoV-2-neutraliserande antikroppsdetektionskit är baserat på kompetitiv ELISA-metodik.
Med hjälp av renad receptorbindande domän (RBD), protein från viralt spikprotein (S) och värdcellen
receptorn ACE2, detta test är utformat för att efterlikna den neutraliserande interaktionen mellan virus och värd.
Kalibratorer, kvalitetskontroller och serum- eller plasmaprover blandas väl individuellt i utspädning
buffert innehållande hACE2-HRP-konjugat alikvoterat i små rör. Därefter överförs blandningarna i
mikroplattbrunnarna innehållande immobiliserat rekombinant SARS-CoV-2 RBD-fragment (RBD) för
inkubation. Under den 30 minuter långa inkubationen mäts den RBD-specifika antikroppen i kalibratorerna, QC och
proverna kommer att konkurrera med hACE2-HRP om specifik bindning till RBD immobiliserad i brunnarna. Efter
Under inkubationen tvättas brunnarna fyra gånger för att avlägsna obundet hACE2-HRP-konjugat. En lösning av
TMB tillsätts sedan och inkuberas i 20 minuter vid rumstemperatur, vilket resulterar i utvecklingen av en
blå färg. Färgutvecklingen stoppas med tillsats av 1N HCl, och absorbansen är
mätt spektrofotometriskt vid 450 nm. Intensiteten hos den bildade färgen är proportionell mot
mängden närvarande enzym och är omvänt relaterad till mängden standarder som analyseras på samma sätt.
Genom jämförelse med kalibreringskurvan som bildats av de medföljande kalibratorerna, bestämdes koncentrationen av
neutraliserande antikroppar i det okända provet beräknas sedan.
【NÖDVÄNDIG MATERIAL MEN EJ TILLHANDAHÅLLNA】
1. Destillerat eller avjoniserat vatten
2. Precisionspipetter: 10 μL, 100 μL, 200 μL och 1 ml
3. Engångspipettspetsar
4. Mikroplattläsare som kan läsa absorbans vid 450 nm.
5. Absorberande papper
6. Rutat papper
7. Vortexblandare eller motsvarande
【PROVINSAMLING OCH FÖRVARING】
1. Serum- och plasmaprover insamlade i rör innehållande K2-EDTA kan användas för detta kit.
2. Proverna ska förses med lock och kan förvaras i upp till 48 timmar vid 2–8 °C före analys.
Prover som förvaras under en längre tid (upp till 6 månader) bör frysas endast en gång vid -20 °C före analys.
Undvik upprepade frys- och upptiningscykler.
PROTOKOLL
【Reagensberedning】
1. Alla reagenser måste tas ut ur kylen och få återgå till rumstemperatur före användning.
(20° till 25°C). Förvara alla reagenser i kylskåpet omedelbart efter användning.
2. Alla prover och kontroller ska vortexas före användning.
3. Beredning av hACE2-HRP-lösning: Späd hACE2-HRP-koncentratet i utspädningsförhållandet 1:51 med Dilution
Buffert. Späd till exempel ut 100 μL hACE2-HRP-koncentrat med 5,0 ml HRP-utspädningsbuffert till
gör en hACE2-HRP-lösning.
4. Beredning av 1× tvättlösning: Späd 20× tvättlösningen med avjoniserat eller destillerat vatten med en
volymförhållande på 1:19. Späd till exempel 20 ml av 20× tvättlösning med 380 ml avjoniserad eller
destillerat vatten för att göra 400 ml 1× tvättlösning.
【Testprocedur】
1. Alikvotera 120 μL av den beredda hACE2-HRP-lösningen i separata rör.
2. Tillsätt 6 μL kalibratorer, okända prover och kvalitetskontroller i varje rör och blanda väl.
3. Överför 100 μL av varje blandning som framställts i steg 2 till motsvarande mikroplattbrunnar enligt anvisningarna.
till fördesignad testkonfiguration.
3. Täck plattan med plattförseglare och inkubera vid 37 °C i 30 minuter.
4. Ta bort plattförseglaren och tvätta plattan med cirka 300 μL 1× tvättlösning per brunn fyra gånger.
5. Knacka plattan mot en pappershandduk för att avlägsna eventuell kvarvarande vätska i brunnarna efter tvättstegen.
6. Tillsätt 100 μL TMB-lösning till varje brunn och inkubera plattan i mörker vid 20–25 °C i 20 minuter.
7. Tillsätt 50 μL stopplösning i varje brunn för att stoppa reaktionen.
8. Läs av absorbansen i mikroplattläsaren vid 450 nm inom 10 minuter (630 nm som tillbehör är
rekommenderas för högre precisionsprestanda).