Testsealabs SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒（ELISA）
简短描述：
SARS-CoV-2 中和抗体检测卡是一种快速色谱免疫分析方法。本检测旨在定性检测针对 2019 冠状病毒病的中和抗体。它可用于检测人体全血、血清或血浆样本。该检测可辅助评估人体抗新型冠状病毒中和抗体滴度水平。
 快速结果：几分钟内即可获得实验室准确结果 | 实验室级精度：可靠且值得信赖 |
| 随处测试：无需前往实验室 | 质量认证：符合 13485、CE、MDSAP 标准 |
| 简单流畅：易于使用，零麻烦 | 极致便捷：在家舒适测试 |
【原则】
SARS-CoV-2 中和抗体检测试剂盒基于竞争性 ELISA 方法。
使用纯化的受体结合域 (RBD)、病毒刺突 (S) 蛋白的蛋白质和宿主细胞
受体 ACE2，该测试旨在模拟病毒-宿主中和相互作用。
校准物、质量控制物以及血清或血浆样本分别在稀释液中充分混合
将含有 hACE2-HRP 结合物的缓冲液分装到小管中。然后将混合物转移至
含有固定化重组 SARS-CoV-2 RBD 片段（RBD）的微孔板孔用于
孵育。在 30 分钟的孵育过程中，校准品、QC 和
样品将与 hACE2-HRP 竞争与孔中固定的 RBD 进行特异性结合。之后
孵育结束后，将孔洗涤 4 次，以去除未结合的 hACE2-HRP 结合物。
然后加入 TMB 并在室温下孵育 20 分钟，从而形成
蓝色。加入1N HCl后停止显色，吸光度为
在450nm处进行分光光度测定。所形成颜色的强度与
存在的酶的量，并且与以相同方式测定的标准量成反比。
通过与所提供的校准品所形成的校准曲线进行比较，
然后计算未知样本中的中和抗体。
【需要但未提供的材料】
1.蒸馏水或去离子水
2.精密移液器：10μL、100μL、200μL、1mL
3. 一次性移液器吸头
4. 可读取450nm吸光度的微孔板读数仪。
5.吸水纸
6.方格纸
7. 涡旋搅拌器或同等设备
【样本采集和储存】
1. 本试剂盒可使用含有K2-EDTA的试管采集血清、血浆样本。
2. 样本应加盖并在检测前于 2 °C - 8 °C 下保存最多 48 小时。
保存时间较长（最长 6 个月）的样本应在检测前在 -20°C 下冷冻一次。
避免反复冻融循环。
协议
【试剂制备】
1. 所有试剂必须从冷藏室取出，并使其恢复到室温后再使用
（20° 至 25°C）。所有试剂使用后请立即放入冰箱保存。
2. 所有样品和对照品在使用前均应涡旋混合。
3. hACE2-HRP 溶液制备：将 hACE2-HRP 浓缩液按 1:51 的稀释比例稀释
缓冲液。例如，将 100 μL hACE2-HRP 浓缩液与 5.0 mL HRP 稀释缓冲液稀释至
制作 hACE2-HRP 溶液。
4. 1× 洗涤液制备：用去离子水或蒸馏水稀释 20× 洗涤液，稀释液量
体积比为 1:19。例如，将 20 mL 20× 洗涤液与 380 mL 去离子水或
蒸馏水配制400毫升1×洗涤液。
【测试程序】
1. 在单独的管中，分装 120μL 已配制的 hACE2-HRP 溶液。
2. 在每个管中加入 6 μL 校准品、未知样品、质量控制并充分混合。
3. 将步骤2中制备的每种混合物各100μL转移到相应的微孔板孔中
预先设计的测试配置。
3. 用 Plate Sealer 盖住培养板，在 37°C 下孵育 30 分钟。
4. 移除板密封膜，用每孔约 300 μL 1×洗涤液洗涤板四次。
5. 洗涤步骤后，将板在纸巾上轻拍以去除孔中残留的液体。
6. 在每个孔中加入 100 μL TMB 溶液，并在 20 - 25°C 的黑暗条件下孵育 20 分钟。
7. 每孔加入50 μL终止液，终止反应。
8. 在 10 分钟内用酶标仪读取 450 nm 处的吸光度（630nm 为附件）
建议用于更高精度的性能）。