የ SARS-COV-2 ገለልተኛ የፀረ-ተበትናል ምርመራ መሣሪያ (ኤሊሳ)
【መርህ】
የ SARS-CAV-2 ገለልተኛ የፀረ-ተበትን የማጠራቀሚያ ቁሳቁስ በተወዳዳሪ ኤሊሳ ዘዴ ላይ የተመሠረተ ነው.
የተጻፈ ተቀባዩ ጎራ (ሪባርድ) ንፁህ ጎራ (ሪባርድ), ፕሮቲን ከቫይረስ ስፒክ (ቶች) ፕሮቲን እና ከአስተናጋጅ ህዋስ በመጠቀም
ተቀባዮች Ac2, ይህ ፈተና ይህ ፈተና ቫይረስን ለማቃለል የተነደፈ ነው.
መለዋወጫዎች, የጥራት መቆጣጠሪያዎች እና የፕላዝማ ናሙናዎች በተናጥል በተናጥል በጥሩ ሁኔታ የተደባለቁ ናቸው
ቡፋር የጦር መሣሪያን የያዘ ጎድጓዳ ውስጥ በትናንሽ ቱቦዎች ውስጥ ቅልጥፍናዎችን ይጫናል. ከዚያ ድብልቅዎቹ ተስተካክለዋል
የማይንቀሳቀሱ የስታትስ ካሲ-ኮቭ -2 RBD ቁራጭ (RBD) የያዙ ማይክሮሎቶች ጉድጓዶች ለ
የመገጣጠም. በ 30 ደቂቃው የመታጠቢያ ገንዳ ውስጥ, በአካባቢያቸው ውስጥ ያለው የ RBD ልዩ ፀረ-ተፋሰስ, QC እና
ናሙናዎች ለተለየ አንደበተ-ገዳይ ጉድጓዶች ውስጥ የተዘበራረቀ የ RBD ን ለማፍሰስ ለተወሰነ ደረጃ ከጠዋቱ 2-HRP ጋር ይወዳደራሉ. በኋላ
የመታጠቢያው ጉድጓዱ, ጉድጓዶቹ UNDUND BACE2- HRP Prujug ን ለማስወገድ ድሃዎች 4 ጊዜ ይታጠባሉ. መፍትሄ
ከዚያ ከ 20 ደቂቃዎች ውስጥ ለ 20 ደቂቃዎች ያህል የታከለ ሲሆን ይህም የመድኃኒት ልማት ሀ
ሰማያዊ ቀለም. የቀለም እድገቱ ከ 1N ኤች ኤች.አይ.ቪ. በተጨማሪ ሲሆን, እና የመገናኛ ቦታው ነው
ከ 450 ኤን ኤም ኤም ኤም ኤን. የተቋቋመው የቀለም መጠን ከ ጋር ተመጣጣኝ ነው
የኢንዛይም መጠን ያለው መጠን, እና በተመሳሳይ መንገድ ከተሰጡት መመዘኛዎች ጋር ተያያዥነት ያለው ነው.
በተሰጡት ማሊሪያዎች ከተመሠረተ ካሪቲንግ ካምፖች ጋር በማነፃፀር, ትኩረቱ
ባልታወቁ ናሙና ውስጥ ፀረ እንግዳ አካላትን ገለልተኛ ማመንጨት ከዚያ ይሰላል.
【ቁሳቁሶች የሚፈለጉት ግን አልሰጡም】
1. የተረበሸ ወይም የተበላሸ ውሃ
2. ትክክለኛ ቧንቧዎች: 10μl, 100μl, 200 000 ሚሊ
3. ሊለያይ የሚችል ፓይፕቲስት ምክሮች
4. ማይክሮፕላስ አንባቢ በ 450nm ውስጥ የማንበብ ችሎታ ያለው.
5. የሚባባስ ወረቀት
6. ግራፍ ወረቀት
7. የአይቲ ሪክስ ድብልቅ ወይም ተመጣጣኝ
【የኒሚሚክ ስብስብ እና ማከማቻ】
1. K2-edta ን የያዙ ቱቦዎች እና የፕላዝማ ናሙናዎች ለዚህ ስብስብ ጥቅም ላይ ሊውሉ ይችላሉ.
2. ናሙናዎች ከ 2 ° ሴ እስከ 4 ዲግሪ ሴንቲግሬድ እስከ 8 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ድረስ ሊከማቹ ይችላሉ.
ናሙናዎች ረዘም ላለ ጊዜ (እስከ 6 ወሮች) ረዘም ላለ ጊዜ (እስከ 6 ወሮች) ከቀዘቀዙ በፊት ከ ATS0 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ሴሬድ ውስጥ የቀዘቀዙ መሆን አለባቸው.
ተደጋግሞ የቀዘቀዙ ዑደቶችን ያስወግዱ.
ፕሮቶኮል
【ተከላካይ ዝግጅት】
1. ሁሉም ተዳራሪዎች ከማቀዝቀዣ መወሰድ አለባቸው እና ከመጠቀምዎ በፊት ወደ ክፍሉ ሙቀት እንዲመለሱ ተፈቅዶላቸዋል
(ከ 20 ° እስከ 25 ° ሴ). ከተጠቀሙ በኋላ ወዲያውኑ በማቀዝቀዣው ውስጥ በማቀዝቀዣው ውስጥ ያድኑ.
2. ሁሉም ናሙናዎች እና መቆጣጠሪያዎች ከመጠቀምዎ በፊት በፖስታ መደረግ አለባቸው.
3. የ HEACE2-HRP የአስተያየት ዝግጅት-አተገባበር በ 1: 5: 5: 5: 5: 5: 5: 5: 5: 5 በ 1: 5: 5 ላይ ያተኩራል
ቋት ለምሳሌ, 100 μl የ HACE2-HRP HRP HRP DRAME HUFER ከ 5.0ml ጋር ያተኩሩ
የሃውልት 2-HRP መፍትሄ ያድርጉ.
4. 1 × የማንሻው ዝግጅት: - የ 20 × የማጠቢያ ማጠቢያ መፍትሄን ከሃደደ ወይም ከተቀነሰ ውሃ ጋር ይደባለቃል ሀ
የ 1 19 የድምፅ መጠን. ለምሳሌ, 20 ሚሊየን 20 × 20 × የማጠቢያ ማጠቢያ ማስተላለፊያው ከ 380 ሚ.ግ.
የ 1 × የማጠቢያ ማጠቢያው መፍትሄ 400 ሚ.ግ.
【የሙከራ አሠራር】
1. በተናጥል ቱቦዎች ውስጥ, ከተዘጋጀው የጦር2-ኤች.አይ.ፒ.ፒ. መፍትሔ 120 μኤል.
2. በእያንዳንዱ ቱቦ ውስጥ ያልተለመዱ ናሙናዎችን, ያልታወቁ ናሙናዎችን, የማያውቁ ናሙናዎችን, እና በጥሩ ሁኔታ ይደባለቁ.
3. በደረጃ 2 መሠረት በየደረጃው 100 μል ያስተላልፉ
ለተገደበ የሙከራ ውቅር.
3. ሳህኑን በፕላስተር Sheiter ይሸፍኑ እና ለ 30 ደቂቃዎች በ 37 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ ይሸፍኑ.
4. ጠፍጣፋውን የባህር ማጠቢያውን ያስወግዱ እና ሳህኑን ያስወግዱ እና ሳህን በግምት ለአራት ጊዜ አራት ጊዜ በግምት 300 × የማጠቢያ ማጠቢያ ማጠቢያው ጋር ይታጠቡ.
5. እርምጃዎችን ከታጠቡ በኋላ ቀሪ ፈሳሹን ለማስወገድ በምርጫ ፎጣ ላይ ያለውን ሳህን መታ ያድርጉ.
6. ለእያንዳንዱ በጥሩ ሁኔታ 100 μ ልቶች መፍትሄ ያክሉ እና ሳህን በ 20 - 25 ° ሴ ለ 20 ደቂቃዎች በጨለማ ውስጥ ያካሂዱ.
7. ምላሹን ለማቆም ለእያንዳንዱ መልካም ነገር 50 μL የማቆሚያ መፍትሄ ያክሉ.
8. በ 10 ደቂቃዎች ውስጥ ማይክሮፕላስ አንባቢው ውስጥ ባለው በ 10 ደቂቃዎች ውስጥ በ 10 ደቂቃዎች ውስጥ (630nm)
ለከፍተኛ ትክክለኛ አፈፃፀም የሚመከር).