Набор для выяўлення нейтралізуючых антыцелаў да SARS-CoV-2 (ІФА) Testsealabs
Кароткае апісанне:
Касета для тэставання на нейтралізуючыя антыцелы да SARS-CoV-2 — гэта хуткі імунахраматаграфічны аналіз. Гэты аналіз прызначаны для якаснага выяўлення нейтралізуючых антыцелаў супраць каранавіруснай хваробы 2019 года. Яго можна выкарыстоўваць з узорамі цэльнай крыві, сыроваткі або плазмы чалавека. Тэст служыць дапаможным сродкам для ацэнкі ўзроўню тытраў нейтралізуючых антыцелаў чалавека супраць новага каранавіруса.
 Хуткія вынікі: лабараторная дакладнасць за лічаныя хвіліны | Дакладнасць лабараторнага ўзроўню: надзейнасць і годнасць даверу |
| Тэставанне ў любым месцы: наведванне лабараторыі не патрабуецца | Сертыфікаваная якасць: 13485, CE, адпавядае стандартам Mdsap |
| Просты і аптымізаваны: лёгкі ў выкарыстанні, без праблем | Максімальная зручнасць: камфортнае тэставанне дома |
【ПРЫНЦЫП】
Набор для выяўлення нейтралізуючых антыцелаў да SARS-CoV-2 заснаваны на метадалогіі канкурэнтнага ІФА.
Выкарыстоўваючы ачышчаны рэцэптар-звязальны дамен (RBD), бялок з віруснага шыпавага (S) бялку і клетку-гаспадара
рэцэптар АПФ2, гэты тэст прызначаны для імітацыі нейтралізуючага ўзаемадзеяння віруса і гаспадара.
Калібратары, кантролі якасці і ўзоры сыроваткі або плазмы добра змешваюцца асобна ў разведзеным выглядзе.
буфер, які змяшчае кан'югат hACE2-HRP, размеркаваны па аліквотах у невялікія прабіркі. Затым сумесі пераносяць у
лункі мікрапланшэта, якія змяшчаюць імабілізаваны рэкамбінантны фрагмент RBD SARS-CoV-2 (RBD) для
інкубацыя. Падчас 30-хвіліннай інкубацыі спецыфічныя антыцелы RBD у калібратарах, кантроль якасці і
Узоры будуць канкураваць з hACE2-HRP за спецыфічнае звязванне з RBD, імабілізаваным у лунках. Пасля
Пасля інкубацыі лункі прамываюць 4 разы для выдалення незвязанага кан'югата hACE2-HRP. Раствор
Затым дадаюць ТМБ і інкубуюць на працягу 20 хвілін пры пакаёвай тэмпературы, што прыводзіць да развіцця
сіні колер. Развіццё колеру спыняецца даданнем 1N HCl, і паглынанне
вымяраецца спектрафатаметрычна пры 450 нм. Інтэнсіўнасць утворанага колеру прапарцыйная
колькасць прысутнага фермента і адваротна прапарцыйная колькасці стандартаў, аналізаваных такім жа чынам.
Шляхам параўнання з калібравальнай крывой, атрыманай з дапамогай прадастаўленых калібратараў, канцэнтрацыя
Затым вылічваецца колькасць нейтралізуючых антыцелаў у невядомым узоры.
【НЕАБХОДНЫЯ МАТЭРЫЯЛЫ, АЛЕ НЕ ПРАДУГЛЕДЖАНЫЯ】
1. Дыстыляваная або дэіянізаваная вада
2. Дакладныя піпеткі: 10 мкл, 100 мкл, 200 мкл і 1 мл
3. Аднаразовыя наканечнікі для піпетак
4. Мікрапланшэтны рыдэр, здольны счытваць паглынанне пры 450 нм.
5. Убіраючая папера
6. Міліметровая папера
7. Віхравы змяшальнік або эквівалент
【ЗБОР І ЗАХОЎВАННЕ ЎЗОРАЎ】
1. Для гэтага набору можна выкарыстоўваць узоры сыроваткі і плазмы, сабраныя ў прабіркі, якія змяшчаюць K2-EDTA.
2. Узоры павінны быць зачыненыя вечкамі і могуць захоўвацца да 48 гадзін пры тэмпературы ад 2°C да 8°C перад аналізам.
Узоры, якія захоўваюцца працяглы час (да 6 месяцаў), варта замарожваць толькі адзін раз пры тэмпературы -20 °C перад аналізам.
Пазбягайце паўторных цыклаў замарожвання-размарожвання.
ПРАТАКОЛ
【Падрыхтоўка рэагентаў】
1. Усе рэагенты павінны быць выняты з халадзільніка і дапушчаны да пакаёвай тэмпературы перад выкарыстаннем.
(ад 20° да 25°C). Захоўвайце ўсе рэагенты ў халадзільніку адразу пасля выкарыстання.
2. Усе ўзоры і кантрольныя сумесі неабходна перад выкарыстаннем змяшаць у віхравай міксеры.
3. Падрыхтоўка раствора hACE2-HRP: Развядзіце канцэнтрат hACE2-HRP у суадносінах 1:51 з дапамогай развядзення.
Буфер. Напрыклад, развядзіце 100 мкл канцэнтрату hACE2-HRP з 5,0 мл буфера для развядзення HRP да
прыгатуйце раствор hACE2-HRP.
4. Прыгатаванне 1× прамывальнага раствора: развядзіце 20× прамывальны раствор дэіянізаванай або дыстыляванай вадой з дапамогай
аб'ёмнае суадносіны 1:19. Напрыклад, развядзіце 20 мл раствора для прамывання 20× з 380 мл дэіянізаванай або
дыстыляванай вады, каб атрымаць 400 мл раствора для прамывання 1×.
【Працэдура выпрабавання】
1. У асобныя прабіркі адбярыце па 120 мкл падрыхтаванага раствора hACE2-HRP.
2. Дадайце па 6 мкл калібратараў, невядомых узораў, кантрольных узораў якасці ў кожную прабірку і добра змяшайце.
3. Перанясіце па 100 мкл кожнай сумесі, падрыхтаванай на этапе 2, у адпаведныя лункі мікрапланшэта ў адпаведнасці з інструкцыямі.
да загадзя распрацаванай канфігурацыі тэсту.
3. Накрыйце пласціну герметыкам для пласцін і інкубуйце пры тэмпературы 37°C на працягу 30 хвілін.
4. Зніміце герметычную плёнку з пласціны і прамыйце пласціну прыблізна па 300 мкл раствора для прамывання 1× на лунку чатыры разы.
5. Пасля прамывання пастукайце па пласціне папяровым ручніком, каб выдаліць рэшткі вадкасці ў лунках.
6. Дадайце 100 мкл раствора ТМБ у кожную лунку і інкубуйце пласціну ў цемры пры тэмпературы 20-25°C на працягу 20 хвілін.
7. Дадайце 50 мкл стоп-раствору ў кожную лунку, каб спыніць рэакцыю.
8. Зчытайце паглынанне ў мікрапланшэтным рыдары пры 450 нм на працягу 10 хвілін (630 нм у якасці дадатковай опцыі).
рэкамендуецца для больш высокай дакладнасці працы).