SARS-COV-2 Неутрализиращ комплект за откриване на антитела （ELISA)
【Предвидена употреба】
SARS-COV-2 Неутрализиращо се комплект за откриване на антитела е конкурентен ензим-свързан имуносорбентен анализ (ELISA), предназначен за качествено и полуколичествено откриване на тотално неутрализиращи антитела към SARS-COV-2 в човешки серум и плазма. Комплектът за откриване на антитела SARS-COV-2 може да се използва като помощно средство за идентифициране на индивиди с адаптивен имунен отговор на SARS-COV-2, което показва скорошна или предишна инфекция. Комплектът за откриване на антитела SARS-COV-2 не трябва да се използва за диагностициране на остра инфекция на SARS-COV-2.
【Въведение】
Коронавирусните инфекции обикновено индуцират неутрализиращи реакции на антитела. Степента на сероконверсия при пациенти с Covid-19 е съответно 50% и 100% на ден 7 и 14 след симптомите. За представяне на знания, съответното вирусно неутрализиращо антитяло в кръвта е признато като цел за определяне на ефикасността на антителата, а по -високата концентрация на неутрализиращото антитяло показват по -висока ефикасност на защитата. Тестът за неутрализиране на плаката (PRNT) е разпознат като златен стандарт за откриване на неутрализиращи антитела. Въпреки това, поради ниската си пропускателна способност и по -голямото изискване за работа, PRNT не е практичен за мащабна серодиагностика и оценка на ваксината. Комплектът за откриване на антитела SARS-COV-2 се основава на методологията на имуносорбента (ELISA), свързана с конкурентен ензим (ELISA), която може да открие неутрализиращото антитяло в кръвната проба, както и специално достъпа до нивата на концентрация на този тип антитяло.
【Процедура за изпитване】
1. В отделни тръби, аликвот 120 μl от подготвения HACE2-HRP разтвор.
2.Дод 6 μl калибратори, неизвестни проби, контрол на качеството във всяка епруветка и разбъркайте добре.
3. Предайте 100 μl от всяка смес, приготвена в стъпка 2 в съответните микропластни кладенци съгласно предварително проектирана тестова конфигурация.
3. Покрийте плочата с уплътнител на плочата и инкубирайте при 37 ° С за 60 минути.
4. Настанете уплътнителя на плочата и измийте плочата с приблизително 300 μl 1 × разтвор за промиване на ямка в продължение на четири пъти.
5. Запишете чинията върху хартиена кърпа, за да премахнете остатъчната течност в кладенците след етапите на измиване.
6.Ад 100 μl разтвор на TMB за всяка ямка и инкубирайте плаката в тъмно при 20 - 25 ° С за 20 минути.
7.DD 50 μL Стоп разтвор на всеки ямка, за да спре реакцията.
8. Прочетете абсорбцията в четеца на микроплаки при 450 nm в рамките на 10 минути (630 nm, тъй като аксесоарът се препоръчва за по -висока точност.
