Комплект за откриване на неутрализиращи антитела срещу SARS-CoV-2 (ELISA) на Testsealabs
Кратко описание:
Касетата за тест за неутрализиращи антитела срещу SARS-CoV-2 е бърз имунохроматографски анализ. Този анализ е предназначен за качествено откриване на неутрализиращи антитела срещу коронавирусна болест 2019. Може да се използва с проби от човешка пълна кръв, серум или плазма. Тестът служи като помощно средство при оценка на нивата на титрите на човешки неутрализиращи антитела срещу новия коронавирус.
 Бързи резултати: Лабораторно точни за минути | Лабораторна прецизност: Надежден и надежден |
| Тествайте навсякъде: Не се изисква посещение в лаборатория | Сертифицирано качество: 13485, CE, съвместим с Mdsap |
| Просто и опростено: Лесно за използване, безпроблемно | Максимално удобство: Тествайте удобно у дома |
【ПРИНЦИП】
Комплектът за откриване на неутрализиращи антитела срещу SARS-CoV-2 е базиран на конкурентна ELISA методология.
Използвайки пречистен рецептор-свързващ домен (RBD), протеин от вирусния шип (S) протеин и клетката гостоприемник
рецептор ACE2, този тест е предназначен да имитира неутрализиращото взаимодействие между вируса и гостоприемника.
Калибраторите, контролите за качество и пробите от серум или плазма се смесват добре поотделно при разреждане.
буфер, съдържащ hACE2-HRP конюгат, аликвотирани в малки епруветки. След това смесите се прехвърлят в
ямките на микроплаката, съдържащи имобилизиран рекомбинантен RBD фрагмент (RBD) на SARS-CoV-2
инкубация. По време на 30-минутната инкубация, RBD специфичното антитяло в калибраторите, QC и
пробите ще се конкурират с hACE2-HRP за специфично свързване с RBD, имобилизиран в ямките. След
инкубацията, ямките се промиват 4 пъти, за да се отстрани несвързаният hACE2-HRP конюгат. Разтвор от
След това се добавя TMB и се инкубира в продължение на 20 минути при стайна температура, което води до развитието на
син цвят. Развитието на цвета се спира с добавянето на 1N HCl и абсорбцията е
измерено спектрофотометрично при 450 nm. Интензитетът на образувания цвят е пропорционален на
количеството наличен ензим и е обратнопропорционално пропорционално на количеството стандарти, анализирани по същия начин.
Чрез сравнение с калибрационната крива, образувана от предоставените калибратори, концентрацията на
След това се изчисляват неутрализиращите антитела в неизвестната проба.
【НЕОБХОДИМИ МАТЕРИАЛИ, КОИТО НЕ СА ПРЕДОСТАВЕНИ】
1. Дестилирана или дейонизирана вода
2. Прецизни пипети: 10μL, 100μL, 200μL и 1 mL
3. Накрайници за пипети за еднократна употреба
4. Четец на микроплаки, способен да отчита абсорбция при 450 nm.
5. Абсорбираща хартия
6. Милиметрова хартия
7. Вихров миксер или еквивалент
【СЪБИРАНЕ И СЪХРАНЕНИЕ НА ПРОБИ】
1. За този комплект могат да се използват серумни и плазмени проби, събрани в епруветки, съдържащи K2-EDTA.
2. Пробите трябва да бъдат затворени с капачки и могат да се съхраняват до 48 часа при 2°C - 8°C преди анализа.
Пробите, съхранявани за по-дълъг период от време (до 6 месеца), трябва да се замразяват само веднъж при -20°C преди анализа.
Избягвайте многократни цикли на замразяване и размразяване.
ПРОТОКОЛ
【Приготвяне на реагенти】
1. Всички реактиви трябва да бъдат извадени от хладилника и оставени да се върнат до стайна температура преди употреба.
(20° до 25°C). Съхранявайте всички реактиви в хладилник веднага след употреба.
2. Всички проби и контроли трябва да се разбъркат на вортекс преди употреба.
3. Приготвяне на разтвор на hACE2-HRP: Разредете концентрата на hACE2-HRP в съотношение 1:51 с разтвор за разреждане.
Буфер. Например, разредете 100 μL концентрат hACE2-HRP с 5,0 mL буфер за разреждане на HRP до
Направете hACE2-HRP разтвор.
4. Приготвяне на 1× промивен разтвор: Разредете 20× промивен разтвор с дейонизирана или дестилирана вода с
обемно съотношение 1:19. Например, разредете 20 mL 20× Wash Solution с 380 mL дейонизиран или
дестилирана вода, за да се получат 400 мл 1× промивен разтвор.
【Процедура за изпитване】
1. В отделни епруветки, разпределете аликвотни части от 120 μL от приготвения разтвор hACE2-HRP.
2. Добавете 6 μL калибратори, неизвестни проби, контроли за качество във всяка епруветка и разбъркайте добре.
3. Прехвърлете 100 μL от всяка смес, приготвена в стъпка 2, в съответните ямки на микроплаката съгласно
към предварително проектирана тестова конфигурация.
3. Покрийте плаката с уплътнител за плаки и инкубирайте при 37°C за 30 минути.
4. Отстранете уплътнителя за плака и измийте плаката с приблизително 300 μL от 1× Wash Solution на ямка в продължение на четири пъти.
5. Почукайте плаката върху кухненска хартия, за да отстраните остатъчната течност в ямките след измиването.
6. Добавете 100 μL TMB разтвор към всяка ямка и инкубирайте плаката на тъмно при 20 - 25°C в продължение на 20 минути.
7. Добавете 50 μL стоп разтвор към всяка ямка, за да спрете реакцията.
8. Отчетете абсорбцията в четец на микроплаки при 450 nm в рамките на 10 минути (630 nm е като аксесоар).
препоръчително за по-висока прецизност).