Testsealabs komplet za detekciju neutralizirajućih antitijela protiv SARS-CoV-2 (ELISA)
Kratak opis:
Test kaseta za neutralizirajuća antitijela SARS-CoV-2 je brzi imunološki hromatografski test. Ovaj test je dizajniran za kvalitativnu detekciju neutralizirajućih antitijela protiv koronavirusne bolesti 2019. Može se koristiti s uzorcima ljudske krvi, seruma ili plazme. Test služi kao pomoć u procjeni nivoa titara neutralizirajućih antitijela protiv novog koronavirusa kod ljudi.
 Brzi rezultati: Laboratorijski tačni za nekoliko minuta | Preciznost laboratorijskog kvaliteta: Pouzdano i pouzdano |
| Testirajte bilo gdje: Nije potrebna posjeta laboratoriju | Certificirani kvalitet: 13485, CE, u skladu sa Mdsap standardima |
| Jednostavno i optimizirano: Lako za korištenje, bez muke | Vrhunska praktičnost: Testirajte udobno kod kuće |
【PRINCIP】
Komplet za detekciju neutralizirajućih antitijela protiv SARS-CoV-2 zasnovan je na kompetitivnoj ELISA metodologiji.
Korištenjem pročišćenog domena za vezivanje receptora (RBD), proteina iz proteina virusnog šiljka (S) i ćelije domaćina
receptor ACE2, ovaj test je dizajniran da oponaša neutralizirajuću interakciju virusa i domaćina.
Kalibratori, kontrole kvalitete i uzorci seruma ili plazme se pojedinačno dobro miješaju u razrjeđivanju
pufer koji sadrži hACE2-HRP konjugat alikvotiran u male epruvete. Zatim se smjese prenose u
jažice mikroploče koje sadrže imobilizirani rekombinantni RBD fragment SARS-CoV-2 (RBD) za
inkubacija. Tokom 30-minutne inkubacije, RBD specifična antitijela u kalibratorima, QC i
Uzorci će se takmičiti sa hACE2-HRP za specifično vezivanje RBD-a imobiliziranog u jažicama. Nakon
Nakon inkubacije, jamice se isperu 4 puta kako bi se uklonio nevezani hACE2-HRP konjugat. Otopina
Zatim se dodaje TMB i inkubira 20 minuta na sobnoj temperaturi, što rezultira razvojem
plava boja. Razvoj boje se zaustavlja dodatkom 1N HCl, a apsorbancija je
mjereno spektrofotometrijski na 450 nm. Intenzitet formirane boje proporcionalan je
količina prisutnog enzima i obrnuto je proporcionalna količini standarda analiziranih na isti način.
Poređenjem sa kalibracionom krivuljom koju su formirali dati kalibratori, koncentracija
Zatim se izračunava količina neutralizirajućih antitijela u nepoznatom uzorku.
【POTREBNI MATERIJALI KOJI NISU Obezbijeđeni】
1. Destilirana ili deionizirana voda
2. Precizne pipete: 10μL, 100μL, 200μL i 1 mL
3. Vrhovi pipeta za jednokratnu upotrebu
4. Čitač mikroploča sposoban za očitavanje apsorbancije na 450 nm.
5. Upijajući papir
6. Milimetarski papir
7. Vrtložni mikser ili ekvivalent
【PRIKUPLJANJE I SKLADIŠTENJE UZORAKA】
1. Uzorci seruma i plazme prikupljeni u epruvete koje sadrže K2-EDTA mogu se koristiti za ovaj komplet.
2. Uzorke treba zatvoriti i mogu se čuvati do 48 sati na temperaturi od 2 °C do 8 °C prije testiranja.
Uzorke koji se čuvaju duže vrijeme (do 6 mjeseci) treba zamrznuti samo jednom na -20 °C prije analize.
Izbjegavajte ponovljene cikluse smrzavanja i odmrzavanja.
PROTOKOL
【Priprema reagensa】
1. Svi reagensi moraju se izvaditi iz hladnjaka i ostaviti da se vrate na sobnu temperaturu prije upotrebe.
(20° do 25°C). Sve reagense odmah nakon upotrebe čuvajte u frižideru.
2. Sve uzorke i kontrole treba protresti u vrtlogu prije upotrebe.
3. Priprema hACE2-HRP rastvora: Razrijediti hACE2-HRP koncentrat u omjeru 1:51 sa sredstvom za razrjeđivanje
Pufer. Na primjer, razrijedite 100 μL hACE2-HRP koncentrata sa 5,0 mL HRP pufera za razrjeđivanje da biste
Napravite hACE2-HRP rastvor.
4. Priprema 1× rastvora za pranje: Razrijedite 20× rastvor za pranje deioniziranom ili destiliranom vodom sa
omjer zapremine 1:19. Na primjer, razrijedite 20 mL 20× rastvora za pranje sa 380 mL deioniziranog ili
destilovane vode da se napravi 400 mL 1× rastvora za pranje.
【Postupak ispitivanja】
1. U odvojene epruvete, alikvotirajte po 120 μL pripremljenog hACE2-HRP rastvora.
2. U svaku epruvetu dodajte 6 μL kalibratora, nepoznatih uzoraka i kontrola kvaliteta i dobro promiješajte.
3. Prebacite 100 μL svake smjese pripremljene u koraku 2 u odgovarajuće jažice mikroploče prema
na unaprijed dizajniranu konfiguraciju testiranja.
3. Pokrijte ploču folijom za zaptivanje ploča i inkubirajte na 37°C tokom 30 minuta.
4. Uklonite zaštitnu foliju za ploču i operite ploču sa približno 300 μL 1× rastvora za pranje po jažici četiri puta.
5. Kucnite ploču o papirni ubrus kako biste uklonili preostalu tekućinu u udubljenjima nakon pranja.
6. Dodajte 100 μL TMB rastvora u svaku jažicu i inkubirajte ploču u mraku na 20 - 25°C tokom 20 minuta.
7. Dodajte 50 μL otopine za zaustavljanje reakcije u svaku jažicu.
8. Očitajte apsorbanciju u čitaču mikroploča na 450 nm u roku od 10 minuta (630 nm kao dodatak je
preporučuje se za veće precizne performanse).