Pecyn Canfod Gwrthgyrff niwtraleiddio SARS-COV-2 (ELISA)
【Defnydd a fwriadwyd】
Mae pecyn canfod gwrthgyrff niwtraleiddio SARS-COV-2 yn assay immunosorbent cystadleuol sy'n gysylltiedig ag ensym (ELISA) a fwriadwyd ar gyfer canfod ansoddol a lled-feintiol o wrthgyrff niwtraleiddio llwyr i SARS-COV-2 mewn serwm dynol a plasma dynol. Gellir defnyddio pecyn canfod gwrthgyrff niwtraleiddio SARS- cOV-2 fel cymorth i nodi unigolion ag ymateb imiwnedd addasol i SARS- cOV-2, gan nodi haint diweddar neu flaenorol. Ni ddylid defnyddio'r pecyn canfod gwrthgyrff niwtraleiddio SARS-COV-2 i wneud diagnosis o haint SARS-COV-2 acíwt.
【Cyflwyniad】
Mae heintiau coronafirws fel arfer yn cymell ymatebion gwrthgyrff niwtraleiddio. Y cyfraddau seroconversion mewn cleifion COVID-19 yw 50% a 100% ar ddiwrnod 7 a 14 ar ôl y symptomau ar ôl cychwyn, yn y drefn honno. I gyflwyno gwybodaeth, mae gwrthgorff sy'n niwtraleiddio firws cyfatebol mewn gwaed yn cael ei gydnabod fel targed ar gyfer pennu effeithiolrwydd gwrthgyrff ac mae crynodiad uwch o'r gwrthgorff niwtraleiddio yn dynodi effeithiolrwydd amddiffyn uwch. Mae prawf niwtraleiddio lleihau plac (PRNT) wedi cael ei gydnabod fel y safon aur ar gyfer canfod gwrthgyrff niwtraleiddio. Fodd bynnag, oherwydd ei drwybwn isel a'i ofyniad uwch ar gyfer gweithredu, nid yw PRNT yn ymarferol ar gyfer serodiagnosis ar raddfa fawr a gwerthuso brechlyn. Mae'r pecyn canfod gwrthgyrff niwtraleiddio SARS-COV-2 yn seiliedig ar fethodoleg assay immunosorbent cystadleuol sy'n gysylltiedig ag ensymau (ELISA), a all ganfod yr gwrthgorff niwtraleiddio mewn sampl gwaed yn ogystal â chyrchu lefelau crynodiad y math hwn o wrthgorff yn arbennig.
【Gweithdrefn Prawf】
1. Mewn tiwbiau ar wahân, aliquot 120μl o'r toddiant HACE2-HRP a baratowyd.
2.Add 6 μL o galibradwyr, samplau anhysbys, rheolyddion ansawdd ym mhob tiwb a'u cymysgu'n dda.
3.Transfer 100μl o bob cymysgedd a baratowyd yn y Cam 2 i ffynhonnau microplate cyfatebol yn unol â chyfluniad prawf a ddyluniwyd.
3.Cofiwch y plât gyda sealer plât a deori ar 37 ° C am 60 munud.
4.Gwelwch y sealer plât a golchwch y plât gyda bras 300 μl o doddiant golchi 1 × fesul ffynnon am bedair gwaith.
5.tap y plât ar dywel papur i gael gwared ar hylif gweddilliol yn y ffynhonnau ar ôl golchi grisiau.
6.Add 100 μL o doddiant TMB i bob ffynnon a deorwch y plât mewn tywyllwch ar 20 - 25 ° C am 20 munud.
7.Add 50 μL o doddiant stopio i bob ffynnon i atal yr adwaith.
8. Darllenwch yr amsugnedd mewn darllenydd microplate ar 450 nm o fewn 10 munud (630Nm wrth i affeithiwr gael ei argymell ar gyfer perfformiad manwl gywirdeb uwch.