Testsealabs SARS-CoV-2 Neutralisierendes Antikörper-Nachweiskit (ELISA)
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【VERWENDUNGSZWECK】
Das SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit ist ein kompetitiver Enzymimmunoassay (ELISA) zum qualitativen und semiquantitativen Nachweis neutralisierender Antikörper gegen SARS-CoV-2 in menschlichem Serum und Plasma. Das SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit kann zur Identifizierung von Personen mit einer adaptiven Immunantwort auf SARS-CoV-2 verwendet werden, die auf eine kürzlich erfolgte oder frühere Infektion hinweist. Das SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit sollte nicht zur Diagnose einer akuten SARS-CoV-2-Infektion verwendet werden.
【EINFÜHRUNG】
Coronavirus-Infektionen lösen typischerweise neutralisierende Antikörperreaktionen aus. Die Serokonversionsraten bei COVID-19-Patienten liegen am 7. und 14. Tag nach Symptombeginn bei 50 % bzw. 100 %. Nach derzeitigem Kenntnisstand sind entsprechende virusneutralisierende Antikörper im Blut ein anerkanntes Ziel zur Bestimmung der Antikörperwirksamkeit, und eine höhere Konzentration der neutralisierenden Antikörper weist auf eine höhere Schutzwirksamkeit hin. Der Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) gilt als Goldstandard zur Erkennung neutralisierender Antikörper. Aufgrund seines geringen Durchsatzes und des höheren Betriebsaufwands ist PRNT jedoch für die Serodiagnose und Impfstoffbewertung im großen Maßstab nicht praktikabel. Das SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit basiert auf der Methode des Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), mit der neutralisierende Antikörper in Blutproben erkannt und insbesondere die Konzentrationsniveaus dieses Antikörpertyps ermittelt werden können.
【Testverfahren】
1. Aliquotieren Sie 120 μl der vorbereiteten hACE2-HRP-Lösung in separate Röhrchen.
2. Geben Sie 6 μl Kalibratoren, unbekannte Proben und Qualitätskontrollen in jedes Röhrchen und mischen Sie gut.
3. Übertragen Sie 100 μl jeder in Schritt 2 hergestellten Mischung gemäß der vordefinierten Testkonfiguration in die entsprechenden Mikroplattenvertiefungen.
3. Bedecken Sie die Platte mit Plate Sealer und inkubieren Sie sie 60 Minuten lang bei 37 °C.
4. Entfernen Sie den Plattenversiegler und waschen Sie die Platte viermal mit ungefähr 300 μl 1× Waschlösung pro Vertiefung.
5. Klopfen Sie die Platte auf ein Papiertuch, um nach den Waschschritten die Restflüssigkeit in den Vertiefungen zu entfernen.
6. Geben Sie 100 μl TMB-Lösung in jede Vertiefung und inkubieren Sie die Platte 20 Minuten lang im Dunkeln bei 20 – 25 °C.
7. Geben Sie 50 μl Stopplösung in jede Vertiefung, um die Reaktion zu stoppen.
8.Lesen Sie die Absorption innerhalb von 10 Minuten bei 450 nm im Mikroplatten-Lesegerät ab (für eine höhere Präzision werden 630 nm als Zubehör empfohlen).


