Testsealabs SARS-CoV-2 Neutralisierender Antikörper-Nachweiskit (ELISA)
Kurze Beschreibung:
Die SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Test Cassette ist ein schneller chromatographischer Immunoassay. Dieser Test dient dem qualitativen Nachweis neutralisierender Antikörper gegen die Coronavirus-Krankheit 2019. Er kann mit menschlichen Vollblut-, Serum- oder Plasmaproben verwendet werden. Der Test dient zur Bestimmung der neutralisierenden Antikörpertiter gegen das neuartige Coronavirus.
 Schnelle Ergebnisse: Laborgenau in Minuten | Präzision in Laborqualität: Zuverlässig und vertrauenswürdig |
| Überall testen: Kein Laborbesuch erforderlich | Zertifizierte Qualität: 13485, CE, Mdsap-konform |
| Einfach und optimiert: Benutzerfreundlich, kein Aufwand | Ultimativer Komfort: Bequem zu Hause testen |
【PRINZIP】
Das SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit basiert auf der kompetitiven ELISA-Methode.
Unter Verwendung gereinigter Rezeptorbindungsdomäne (RBD), Protein aus dem viralen Spike-Protein (S) und der Wirtszelle
Dieser Test basiert auf dem Rezeptor ACE2 und ist darauf ausgelegt, die neutralisierende Interaktion zwischen Virus und Wirt nachzuahmen.
Kalibratoren, Qualitätskontrollen und Serum- oder Plasmaproben werden einzeln gut in Verdünnung gemischt
Puffer mit hACE2-HRP-Konjugat, aliquotiert in kleinen Röhrchen. Anschließend werden die Mischungen in
die Mikroplattenvertiefungen mit immobilisiertem rekombinanten SARS-CoV-2 RBD-Fragment (RBD) für
Inkubation. Während der 30-minütigen Inkubation werden die RBD-spezifischen Antikörper in den Kalibratoren, QC und
Die Proben konkurrieren mit dem hACE2-HRP um die spezifische Bindung an die in den Vertiefungen immobilisierte RBD. Nach
Nach der Inkubation werden die Vertiefungen 4-mal gewaschen, um ungebundenes hACE2-HRP-Konjugat zu entfernen. Eine Lösung von
Anschließend wird TMB hinzugefügt und 20 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert, was zur Entwicklung eines
blaue Farbe. Die Farbentwicklung wird durch Zugabe von 1N HCl gestoppt, und die Absorption wird
spektrophotometrisch bei 450 nm gemessen. Die Intensität der gebildeten Farbe ist proportional zur
Die Menge des vorhandenen Enzyms ist umgekehrt proportional zur Menge der auf die gleiche Weise getesteten Standards.
Durch Vergleich mit der Kalibrierkurve der mitgelieferten Kalibratoren kann die Konzentration von
Anschließend werden die neutralisierenden Antikörper in der unbekannten Probe berechnet.
【BENÖTIGTE, ABER NICHT MITGELIEFERTE MATERIALIEN】
1. Destilliertes oder deionisiertes Wasser
2. Präzisionspipetten: 10 μl, 100 μl, 200 μl und 1 ml
3. Einweg-Pipettenspitzen
4. Mikroplatten-Lesegerät, das die Absorption bei 450 nm messen kann.
5. Saugfähiges Papier
6. Millimeterpapier
7. Vortex-Mischer oder gleichwertig
【Probenentnahme und -aufbewahrung】
1. Für dieses Kit können Serum- und Plasmaproben verwendet werden, die in Röhrchen mit K2-EDTA gesammelt wurden.
2. Die Proben sollten verschlossen werden und können vor der Analyse bis zu 48 Stunden bei 2 °C – 8 °C gelagert werden.
Proben, die über einen längeren Zeitraum (bis zu 6 Monate) aufbewahrt werden, sollten vor der Analyse nur einmal bei -20 °C eingefroren werden.
Vermeiden Sie wiederholte Gefrier- und Auftauzyklen.
PROTOKOLL
【Reagenzienvorbereitung】
1. Alle Reagenzien müssen aus dem Kühlschrank genommen und vor Gebrauch wieder auf Raumtemperatur gebracht werden.
(20 °C bis 25 °C). Bewahren Sie alle Reagenzien sofort nach Gebrauch im Kühlschrank auf.
2. Alle Proben und Kontrollen sollten vor der Verwendung gevortext werden.
3. Zubereitung der hACE2-HRP-Lösung: Verdünnen Sie das hACE2-HRP-Konzentrat im Verhältnis 1:51 mit Verdünnungslösung
Puffer. Verdünnen Sie beispielsweise 100 μL hACE2-HRP-Konzentrat mit 5,0 ml HRP-Verdünnungspuffer, um
Stellen Sie eine hACE2-HRP-Lösung her.
4. 1× Waschlösungsvorbereitung: Verdünnen Sie die 20× Waschlösung mit deionisiertem oder destilliertem Wasser mit einem
Volumenverhältnis von 1:19. Verdünnen Sie beispielsweise 20 ml 20× Waschlösung mit 380 ml deionisiertem oder
destilliertes Wasser, um 400 ml 1× Waschlösung herzustellen.
【Testverfahren】
1. Aliquotieren Sie 120 μl der vorbereiteten hACE2-HRP-Lösung in separate Röhrchen.
2. Geben Sie 6 μl Kalibratoren, unbekannte Proben und Qualitätskontrollen in jedes Röhrchen und mischen Sie gut.
3. Übertragen Sie 100 μL jeder in Schritt 2 hergestellten Mischung in die entsprechenden Mikroplattenvertiefungen gemäß
zur vorgefertigten Testkonfiguration.
3. Bedecken Sie die Platte mit Plate Sealer und inkubieren Sie sie 30 Minuten lang bei 37 °C.
4. Entfernen Sie den Plattenversiegler und waschen Sie die Platte viermal mit etwa 300 μl 1× Waschlösung pro Vertiefung.
5. Klopfen Sie die Platte auf ein Papiertuch, um nach den Waschschritten die Restflüssigkeit in den Vertiefungen zu entfernen.
6. Geben Sie 100 μl TMB-Lösung in jede Vertiefung und inkubieren Sie die Platte 20 Minuten lang im Dunkeln bei 20 – 25 °C.
7. Geben Sie 50 μl Stopplösung in jede Vertiefung, um die Reaktion zu stoppen.
8. Lesen Sie die Absorption im Mikroplatten-Lesegerät bei 450 nm innerhalb von 10 Minuten ab (630 nm als Zubehör ist
empfohlen für eine höhere Präzisionsleistung).