SARS-COV-2 Neŭtraliganta Antikorpan Detektan Kiton （ELISA)
【Celita uzo】
SARS-COV-2 Neŭtraliganta antikorpan detektan ilaron estas konkurenciva enzimo-ligita imunosorbenta provo (ELISA) destinita por kvalitaj kaj duonkvantaj detekto de totalaj neŭtraligantaj antikorpoj al SARS-COV-2 en homa serumo kaj plasmo. La SARS-COV-2 neŭtraliganta antikorpan detektan ilaron povas esti uzata kiel helpo por identigi individuojn kun adapta imuna respondo al SARS-COV-2, indikante lastatempan aŭ antaŭan infekton. La SARS-COV-2 neŭtraliganta antikorpan detekton ne devas esti uzata por diagnozi akran SARS-COV-2-infekton.
【Enkonduko】
Koronavirus -infektoj tipe induktas neŭtraligantajn antikorpajn respondojn. La seroconversion-indicoj en pacientoj kun Covid-19 estas 50% kaj 100% en la tago 7 kaj 14 post la apero de simptomoj respektive. Por prezenti scion, responda virusa neŭtraliganta antikorpo en sango estas agnoskita kiel celo por determini efikecon de antikorpoj kaj pli alta koncentriĝo de la neŭtraliga antikorpo indikas pli altan protektan efikecon. Testo pri neŭtraligo de plaka redukto (PRNT) estis rekonita kiel la ora normo por detekti neŭtraligajn antikorpojn. Tamen, pro ĝia malalta elfluo kaj pli alta postulo por operacio, PRNT ne estas praktika por grandskala serodiagnozo kaj taksado de vakcinoj. La SARS-COV-2 neŭtraliganta antikorpan detektan ilaron baziĝas sur konkurenciva enzimo-ligita imunosorbenta provo (ELISA) metodaro, kiu povas detekti la neŭtraligan antikorpon en sango-specimeno same kiel speciale aliri la koncentriĝajn nivelojn de ĉi tiu tipo de antikorpoj.
【Prova Proceduro】
1. En apartaj tuboj, alikoto 120μl de la preparita HACE2-HRP-solvo.
2. Aldonu 6 µl da kalibroj, nekonataj specimenoj, kvalitaj kontroloj en ĉiu tubo kaj miksi bone.
3.Transfer 100μl de ĉiu miksaĵo preparita en la paŝo 2 en respondajn microplatajn putojn laŭ antaŭdifinita testo -agordo.
3.Kovu la teleron per plata sigelilo kaj inkubu je 37 ° C dum 60 minutoj.
4. Malplenigu la platan sigelilon kaj lavu la teleron kun proksimume 300 µl da 1 × lavita solvo po kvar fojoj.
5.Tap la teleron sur paperan mantukon por forigi postrestantan likvaĵon en la putoj post lavado de ŝtupoj.
6. Aldonu 100 µl da TMB -solvo al ĉiu puto kaj inkubu la teleron en mallumo je 20 - 25 ° C dum 20 minutoj.
7. Aldonu 50 µl da halta solvo al ĉiu puto por ĉesigi la reagon.
8. Legu la absorbancon en microplate -leganto je 450 nm ene de 10 minutoj (630nm kiel akcesoraĵo rekomendas por pli alta preciza agado.
