Testsealabs SARS-CoV-2 Neŭtraliga Antikorpa Detekto-Kompleto (ELISA)
Mallonga Priskribo:
La Kasedo por Testo de Neŭtraligaj Antikorpoj por SARS-CoV-2 estas rapida kromatografia imunanalizo. Ĉi tiu analizo estas destinita por la kvalita detekto de neŭtraligaj antikorpoj kontraŭ la Koronavirusa Malsano 2019. Ĝi povas esti uzata kun homaj specimenoj de tuta sango, serumo aŭ plasmo. La testo servas kiel helpo en taksado de la niveloj de homaj kontraŭnova koronavirusaj neŭtraligaj antikorpoj.
 Rapidaj Rezultoj: Laboratorie Precizaj en Minutoj | Laboratoria-Nivela Precizeco: Fidinda kaj Fidinda |
| Testu Ie Ajne: Neniu Laboratoria Vizito Necesas | Atestita Kvalito: 13485, CE, Konforma al Mdsap |
| Simpla & Flulinia: Facile Uzebla, Senĝena | Plej bona komforto: Testu komforte hejme |
【PRINCIPLO】
La ilaro por detekto de SARS-CoV-2 neŭtraliga antikorpo baziĝas sur konkurenciva ELISA-metodaro.
Uzante purigitan receptoran ligdomajnon (RBD), proteinon de la virusa pikilo (S) proteino kaj la gastiga ĉelo
receptoro ACE2, ĉi tiu testo estas desegnita por imiti la viruso-gastiganton neŭtraligantan interagadon.
Kalibriloj, Kvalitkontroloj, kaj serumaj aŭ plasmaj specimenoj estas individue bone miksitaj en diluo.
bufro enhavanta hACE2-HRP-konjugaĵon por alikvotoj en malgrandaj tuboj. Poste la miksaĵoj estas translokigitaj en
la mikroplataj putoj enhavantaj imobilizitan rekombinitan SARS-CoV-2 RBD-fragmenton (RBD) por
inkubacio. Dum la 30-minuta inkubacio, la RBD-specifa antikorpo en la kalibriloj, kvalitkontrolo kaj
specimenoj konkuros kun la hACE2-HRP por specifa ligado de la RBD senmovigita en la putoj. Post
la inkubacio, la putoj estas lavitaj 4 fojojn por forigi neligitan hACE2-HRP-konjugaĵon. Solvaĵo de
TMB estas poste aldonita kaj inkubata dum 20 minutoj je ĉambra temperaturo, rezultante en la disvolviĝo de
blua koloro. La kolordisvolviĝo estas haltigita per aldono de 1N HCl, kaj la absorbado estas
mezurita spektrofotometrie je 450 nm. La intenseco de la formita koloro estas proporcia al la
kvanto de ĉeestanta enzimo, kaj estas inverse rilata al la kvanto de normoj analizitaj sammaniere.
Per komparo kun la kalibrada kurbo formita de la provizitaj kalibrigiloj, la koncentriĝo de
neŭtraligantaj antikorpoj en la nekonata specimeno estas tiam kalkulitaj.
【MATERIALOJ BEZONATAJ SED NE PROVIZITAJ】
1. Distilita aŭ dejonigita akvo
2. Precizaj pipetoj: 10μL, 100μL, 200μL kaj 1 mL
3. Unuuzaj pipetaj pintoj
4. Mikroplata legilo kapabla legi absorbadon je 450nm.
5. Sorba papero
6. Grafika papero
7. Vorteksa miksilo aŭ ekvivalento
【SPECIMENA KOLEKTO KAJ STOKADO】
1. Serumaj kaj plasmo-specimenoj kolektitaj en tuboj enhavantaj K2-EDTA-on uzeblas por ĉi tiu ilaro.
2. Specimenoj estu kovritaj kaj povas esti konservitaj ĝis 48 horojn je 2 °C - 8 °C antaŭ la analizo.
Specimenoj konservitaj dum pli longa tempo (ĝis 6 monatoj) estu frostigitaj nur unufoje je -20 °C antaŭ la analizo.
Evitu ripetajn frostigo-degelado-ciklojn.
PROTOKOLO
【Preparado de Reakciaĵoj】
1. Ĉiuj reakciaĵoj devas esti elprenitaj el la fridujo kaj lasitaj reveni al ĉambra temperaturo antaŭ uzo.
(20° ĝis 25°C). Konservu ĉiujn reakciaĵojn en fridujo tuj post uzo.
2. Ĉiuj specimenoj kaj kontroloj estu kirligitaj antaŭ uzo.
3. Preparado de hACE2-HRP Solvaĵo: Diluu hACE2-HRP koncentraĵon je dilua proporcio de 1:51 kun Diluo
Bufro. Ekzemple, diluigu 100 μL da hACE2-HRP-koncentraĵo kun 5.0 mL da HRP-Dilua Bufro por
faru hACE2-HRP-solvaĵon.
4. Preparado de 1× Lavsolvaĵo: Diluu la 20× Lavsolvaĵon per dejonigita aŭ distilita akvo per
volumena proporcio de 1:19. Ekzemple, diluigu 20 mL da 20× Lavsolvaĵo kun 380 mL da dejonigita aŭ
distilita akvo por fari 400 mL da 1× Lavsolvaĵo.
【Testa Proceduro】
1. En apartaj tuboj, alikvotu 120 μL de la preparita hACE2-HRP Solvaĵo.
2. Aldonu 6 μL da kalibriloj, nekonatajn specimenojn, kvalito-kontrolojn en ĉiun tubon kaj bone miksu.
3. Translokigu 100 μL de ĉiu miksaĵo preparita en paŝo 2 en respondajn mikroplacajn putojn laŭ
al antaŭdizajnita testa agordo.
3. Kovru la platon per Plate Sealer kaj inkubu je 37 °C dum 30 minutoj.
4. Forigu la Plato-Sigelilon kaj lavu la platon per proksimume 300 μL da 1× Lavsolvaĵo por ĉiu puto kvar fojojn.
5. Frapetu la platon sur papertukon por forigi restan likvaĵon en la putoj post la lavado.
6. Aldonu 100 μL da TMB-solvaĵo al ĉiu puto kaj kovu la platon en mallumo je 20-25 °C dum 20 minutoj.
7. Aldonu 50 μL da haltiga solvaĵo al ĉiu puto por haltigi la reakcion.
8. Legu la absorbadon en mikroplata legilo je 450 nm ene de 10 minutoj (630nm kiel akcesoraĵo estas)
rekomendita por pli alta precizeco).