Testsealabs SARS-CoV-2 Neutralisearjende Antistofdeteksjekit (ELISA)
Koarte beskriuwing:
De SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Test Cassette is in rappe chromatografyske immunoassay. Dizze assay is ûntworpen foar de kwalitative deteksje fan neutralisearjende antistoffen tsjin Coronavirus Disease 2019. It kin brûkt wurde mei minsklik folslein bloed, serum of plasma-eksimplaren. De test tsjinnet as in helpmiddel by it evaluearjen fan de nivo's fan minsklike anti-nije coronavirus neutralisearjende antistoftiters.
 Snelle resultaten: Lab-akkuraat yn minuten | Presyzje fan laboratoariumkwaliteit: Betrouber en betrouber |
| Test oeral: Gjin laboratoariumbesite fereaske | Sertifisearre kwaliteit: 13485, CE, Mdsap-neilibjend |
| Ienfâldich en streamlined: maklik te brûken, gjin problemen | Ultimat gemak: Test noflik thús |
【PRINSIPE】
De SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit is basearre op kompetitive ELISA-metodyk.
Mei help fan suvere reseptorbindingsdomein (RBD), proteïne fan it firale spike (S) proteïne en de gasthearsel
reseptor ACE2, dizze test is ûntworpen om de neutralisearjende ynteraksje tusken firus en gasthear te imitearjen.
Kalibratoren, kwaliteitskontrôles en serum- of plasmamonsters wurde yndividueel goed mingd yn ferdunning
buffer mei hACE2-HRP-konjugaat ferdield yn lytse buizen. Dan wurde de mingsels oerdroegen yn
de mikroplaatputten mei immobilisearre rekombinant SARS-CoV-2 RBD-fragment (RBD) foar
ynkubaasje. Tidens de ynkubaasje fan 30 minuten wurde de RBD-spesifike antistoffen yn 'e kalibrators, QC en
samples sille konkurrearje mei de hACE2-HRP foar spesifike binding oan de RBD dy't yn 'e putten immobilisearre is. Nei
de ynkubaasje wurde de putten 4 kear wosken om net-bûne hACE2-HRP-konjugaat te ferwiderjen. In oplossing fan
TMB wurdt dan tafoege en 20 minuten by keamertemperatuer ynkubearre, wat resulteart yn 'e ûntwikkeling fan in
blauwe kleur. De kleurûntwikkeling wurdt stoppe mei de tafoeging fan 1N HCl, en de absorbânsje is
spektrofotometrysk metten by 450 nm. De yntensiteit fan 'e foarme kleur is evenredich mei de
hoemannichte oanwêzich enzyme, en is omgekeerd evenredig mei de hoemannichte standerts dy't op deselde wize analysearre binne.
Troch ferliking mei de kalibraasjekurve foarme troch de levere kalibrators, de konsintraasje fan
neutralisearjende antistoffen yn it ûnbekende stekproef wurde dan berekkene.
【MATERIALEN NEEDSK MAR NET LEVERD】
1. Destillearre of deionisearre wetter
2. Presyzjepipetten: 10μL, 100μL, 200μL en 1 mL
3. Wegwerp pipettips
4. Mikroplaatlêzer dy't absorbânsje by 450nm kin lêze.
5. Absorberend papier
6. Grafykpapier
7. Vortex-mixer of lykweardich
【SPESIMENKOLLEKSJE EN OPSLACH】
1. Serum- en plasmamonsters sammele yn buizen mei K2-EDTA kinne brûkt wurde foar dizze kit.
2. Eksimplaren moatte ôfsletten wurde en meie oant 48 oeren by 2 °C - 8 °C bewarre wurde foardat se analysearre wurde.
Eksimplaren dy't langer bewarre wurde (oant 6 moannen) moatte mar ien kear by -20 °C beferzen wurde foar de assay.
Foarkom werhelle frieze-dooisyklusen.
PROTOKOAL
【Reagens tarieding】
1. Alle reagentia moatte út 'e kuolkast helle wurde en foar gebrûk weromkomme op keamertemperatuer
(20° oant 25°C). Bewarje alle reagentia fuortendaliks nei gebrûk yn 'e kuolkast.
2. Alle samples en kontrôles moatte foar gebrûk mei in vortex wurde bewurke.
3. Tarieding fan hACE2-HRP-oplossing: Verdun hACE2-HRP-konsintraat yn in ferdunningsferhâlding fan 1:51 mei Dilution
Buffer. Bygelyks, ferdun 100 μL fan hACE2-HRP-konsintraat mei 5,0 mL fan HRP-ferdunningsbuffer om
in hACE2-HRP-oplossing meitsje.
4. Tarieding fan 1× waskoplossing: Verdun de 20× waskoplossing mei deionisearre of destillearre wetter mei in
folumeferhâlding fan 1:19. Bygelyks, ferdun 20 mL fan 20× Wash Solution mei 380 mL deionisearre of
destillearre wetter om 400 mL fan 1× waskoplossing te meitsjen.
【Testproseduere】
1. Yn aparte buizen, aliquot 120 μL fan 'e taretmakke hACE2-HRP-oplossing.
2. Foegje 6 μL kalibrators, ûnbekende samples, kwaliteitskontrôles ta yn elke buis en mingje goed.
3. Oerdrage 100 μL fan elk mingsel dat yn stap 2 taret is yn oerienkommende mikroplaatputten neffens
nei foarôf ûntworpen testkonfiguraasje.
3. Dek de plaat ôf mei Plate Sealer en ynkubearje by 37 °C foar 30 minuten.
4. Ferwiderje de plaatfersegeling en waskje de plaat fjouwer kear mei sawat 300 μL fan 1× waskoplossing per put.
5. Tik de plaat op in papierenhandoek om oerbleaune floeistof yn 'e putjes te ferwiderjen nei de waskstappen.
6. Foegje 100 μL TMB-oplossing ta oan elke put en ynkubearje de plaat yn it tsjuster by 20 - 25 °C foar 20 minuten.
7. Foegje 50 μL Stop-oplossing ta oan elke put om de reaksje te stopjen.
8. Lês de absorbânsje yn in mikroplaatlêzer by 450 nm binnen 10 minuten (630 nm as accessoire is
oanrikkemandearre foar prestaasjes mei hegere presyzje).