Sars-cov-2 nenuralizing antliboniboy anthibody detactional kit (elisa)
【【Kahi Kahua】
Ua hoʻokumuʻia ka SERS-Cov-2 Nenurazing Antiboy Ottibody i ke kitti i hoʻokumuʻia ma luna o ka hoʻokūkūʻo Elisa Methology.
Ke hoʻohana nei i ka laweʻana i ka laweʻana i ka Dinad Gredit Compor (RBD), protein i ka protec spike spike (s) i ka protein
Loaʻa iā Ace2, ua hoʻolālāʻia kēia hōʻike i ka mimic i ka maikaʻi o ka wahine.
Nā calbrator, nā pale maikaʻi, a me nā serum a iʻole nā subsma a iʻole plasma paha i hui pūʻia me nā'āpana
ʻO Buffer e pili ana i ka Hace2-HRP conjugate Aliquugate Aliquugate i loko o nā pahu liʻiliʻi. A laila e hoʻoneʻeʻia nā mika
ʻO nā polokalamu MicroPlate e loaʻa ana i nā mea i ukuʻiaʻo IMMOBILIND BERS-COV-2 RBD FEGUMENT (RBD) no
incubation. I ka manawa 30 mau minuke 30 mau minuke i ka antidabody antibody i loko o nā calibrators i nā calibrators, qc a
E hoʻokūkū nā hiʻohiʻona me ka Hace2-HRP no ka hoʻopiliʻana i ka hoʻopiliʻana i ka RBD i halaʻoleʻia ma nā pūnāwai. NA MEA
ʻO ka incubation, holoiʻia nā wells 4 mau manawa e wehe i nā mea i hanaʻoleʻiaʻo Hace2-HRP Conjugate. He hopena o
Ua hoʻohuiʻiaʻo TMB a hoʻohuiʻia no 20 mau minuke i ka mahana o ka lumi, e hopena ana i ka hoʻomohalaʻana o
polū polū. Ua pau ka hoʻomohalaʻana o ka hanaʻana me ka hoʻohui o 1N HCL, aʻo kaʻaeʻana
anaʻia spectrooppotomally ma 450 nm. ʻO ka ikaika o ke kala i hoʻohālikelikeʻia i ka
ka nui o nā enzyme i hōʻikeʻia, a he mea kūponoʻole e pili ana i ka nui o nā hui i loaʻa i keʻano like.
E ka hoʻohālikelikeʻana me ke kāʻei calibration i hoʻokumuʻia e nā callibrator i hāʻawiʻia, ka noʻonoʻo o
ʻO nā antiterizing antibodies ma keʻanoʻikeʻikeʻoleʻia e heluʻia.
【【Nā mea pono e pono ai akāʻaʻole i hāʻawiʻia】
1
2, Pihi pololei: 10μl, 100μl, 200μl a 1 ml
3
4.ʻO ka mea heluhelu microplate e hiki ai ke heluhelu i ka hoʻopiliʻana ma ka 450nm.
5.ʻO ka pepa pili
6. Kākau
7
【【Hōʻiliʻili a me ka mālamaʻana】
1
2. Pono e mālamaʻia nā SpecMisns a mālamaʻia paha no 48 mau hola ma 2 ° C - 8 ° C - 8 ° C - 8 ° C - 8 ° C - 8 ° C - 8 ° C - 8
ʻO nā kiʻi i hoʻopaʻaʻia no kahi manawa lōʻihi (a hiki i 6 mau mahina) e hoʻopau wale i hoʻokahi manawa i hoʻokahi manawa i hoʻokahi manawa ma mua o ka mea e waiwai ai.
Hōʻalo i nā hana manuahi manuahi-thaw.
Protocol
【【Hoʻomākaukau hou】
1. Pono e laweʻia nā uku āpau mai ka hoʻokaʻawaleʻana aʻaeʻia e hoʻi i ka mahana o ka lumi ma mua o ka hoʻohanaʻana
(20 ° i 25 ° C). E mālama i nā hoʻoponopono āpau i ka frijiery koke ma hope o ka hoʻohanaʻana.
2. Pono nā mea āpau a me nā pale a me nā pale e pono ai ma mua o ka hoʻohanaʻana.
3. Hace2-hrp hoʻonā hoʻoholo
Buffer. No ka laʻana, hoʻopauʻia he 100 μl o hace2-hrp e nānā me ka 5.0ml o Hrp Diling Tau
e hana i kahi hopena hace2-hrp.
4. 1
Hoʻohui Laʻina o 1:19. No ka lano, e hoʻohemo 20 ml o 20 o ka holoi holoiʻana me 380 ml o ka deionazed a iʻole
ka wai i lawe i ka wai e hana 400 ml o 1 × holoi holoi.
【【Ke kaʻina hōʻike hōʻike】
1
2. E hoʻohui i 6 μl o calibrators, nā hiʻohiʻonaʻikeʻole, nā mana kūpono i kēlā me kēia kahawai a hui pū maikaʻi.
3. E hoʻokaʻawale i kahi 100μl o kēlā me kēia mixture hoʻomākaukau i hoʻomākaukauʻia ma ka hana 2 i ka mea e pili ana i nā microplate microplate maikaʻi e like me
i ka hoʻonohonohoʻana i ka hōʻike hōʻike hōʻike.
3. E uhi i ka pā me ka papaʻaina ma ka papa kai a incubate ma 37 ° C no 30 mau minuke.
4. E wehe i ka papaʻaina papa a holoi i ka pā me kahi kokoke 300 μl o 1
5.
6. E hoʻohui i ka 100 μl o TMB Rult i kēlā me kēia pūkaʻa a hoʻokomo i ka pā i ka pōʻeleʻele ma 20 - 25 ° C no 20 mau minuke.
7. E hoʻohui i 50 μL o ka hoʻonāʻana i ka hoʻonāʻana i kēlā me kēia e hoʻopau i ka hopena.
8. E heluhelu i ka piliona ma ka leka uila ma ka mea heluhelu microplate ma 450 nm i loko o 10 mau minuke (630nm e like me ke komoʻana
ua hanaʻia no ka hanaʻoi aku ka kiʻekiʻe).