Testsealabs SARS-CoV-2 neutralizáló antitest kimutató készlet (ELISA)
Rövid leírás:
A SARS-CoV-2 neutralizáló antitest tesztkazetta egy gyors kromatográfiás immunvizsgálati módszer. Ez a vizsgálat a 2019-es koronavírus-betegség elleni neutralizáló antitestek kvalitatív kimutatására szolgál. Használható emberi teljes vér-, szérum- vagy plazmamintákhoz. A teszt segédanyagként szolgál az új koronavírus elleni neutralizáló antitest titerek szintjének értékeléséhez.
 Gyors eredmények: Laboratóriumi pontosságú percek alatt | Laboratóriumi pontosság: Megbízható és hiteles |
| Bárhol tesztelhet: Nincs szükség laborlátogatásra | Tanúsított minőség: 13485, CE, MDSAP megfelelőség |
| Egyszerű és letisztult: Könnyen használható, nulla gond | Maximális kényelem: Kényelmesen teszteljen otthon |
【ALAPELV】
A SARS-CoV-2 neutralizáló antitest kimutatási készlet kompetitív ELISA módszertanon alapul.
Tisztított receptorkötő domén (RBD), a vírus tüskefehérjéből (S) származó fehérje és a gazdasejt felhasználásával
Az ACE2 receptorhoz kapcsolódó teszt célja a vírus-gazdaszervezet neutralizáló kölcsönhatásának utánzása.
A kalibrátorokat, a minőségellenőrzéseket és a szérum- vagy plazmamintákat egyenként jól össze kell keverni a hígítás során.
A hACE2-HRP konjugátumot tartalmazó puffert kis csövekbe osztjuk. Ezután a keverékeket átvisszük
az immobilizált rekombináns SARS-CoV-2 RBD-fragmentumot (RBD) tartalmazó mikrotiterlemez-kutak
inkubáció. A 30 perces inkubáció során az RBD-specifikus antitest a kalibrátorokban, a minőségellenőrzőben és a
a minták versenyezni fognak a hACE2-HRP-vel a kutakban immobilizált RBD-hez való specifikus kötődésért. Utána
Az inkubáció során a kutak négyszer mosódnak a nem kötött hACE2-HRP konjugátum eltávolítása érdekében.
Ezután TMB-t adunk hozzá, és 20 percig szobahőmérsékleten inkubáljuk, aminek eredményeként kialakul a
kék színű. A színfejlődést 1N HCl hozzáadásával állítjuk le, és az abszorbanciát
spektrofotometriásan mérve 450 nm-en. A képződött szín intenzitása arányos a
a jelenlévő enzim mennyiségétől függ, és fordítottan arányos az ugyanígy vizsgált standardok mennyiségével.
A mellékelt kalibrátorok által létrehozott kalibrációs görbével összehasonlítva a koncentrációja
Ezután kiszámítják az ismeretlen mintában lévő neutralizáló antitestek mennyiségét.
【SZÜKSÉGES, DE NEM BIZTOSÍTOTT ANYAGOK】
1. Desztillált vagy ioncserélt víz
2. Precíziós pipetták: 10 μL, 100 μL, 200 μL és 1 ml
3. Eldobható pipettahegyek
4. Mikrotiterlemez-leolvasó, amely képes 450 nm-en leolvasni az abszorbanciát.
5. Nedvszívó papír
6. Milliméterpapír
7. Vortex keverő vagy azzal egyenértékű
【MINTAGGYŰJTÉS ÉS TÁROLÁS】
1. Ehhez a készlethez K2-EDTA-t tartalmazó kémcsövekbe gyűjtött szérum- és plazmaminták használhatók.
2. A mintákat le kell fedni, és a vizsgálat előtt legfeljebb 48 órán át tárolhatók 2 °C és 8 °C között.
A hosszabb ideig (legfeljebb 6 hónapig) tárolt mintákat a vizsgálat előtt csak egyszer szabad -20 °C-on lefagyasztani.
Kerülje az ismételt fagyasztás-olvadás ciklusokat.
JEGYZŐKÖNYV
【Reagens előkészítése】
1. Használat előtt minden reagenst ki kell venni a hűtőszekrényből, és hagyni kell szobahőmérsékletűre melegedni.
(20°C és 25°C között). Használat után azonnal tárolja a reagenseket hűtőszekrényben.
2. Minden mintát és kontrollt használat előtt vortexelni kell.
3. hACE2-HRP oldat elkészítése: Hígítsa a hACE2-HRP koncentrátumot 1:51 hígítási arányban a hígító oldattal
Puffer. Például hígítson fel 100 μL hACE2-HRP koncentrátumot 5,0 ml HRP hígítópufferrel
Készítsen hACE2-HRP oldatot.
4. 1× Mosóoldat elkészítése: Hígítsa fel a 20× Mosóoldatot ioncserélt vagy desztillált vízzel,
1:19 térfogatarány. Például hígítson fel 20 ml 20× mosóoldatot 380 ml ioncserélt vagy
desztillált vizet 400 ml 1× mosóoldat elkészítéséhez.
【Vizsgálati eljárás】
1. Külön kémcsövekben mérjen ki 120 μL-t az elkészített hACE2-HRP oldatból.
2. Adjon 6 μL kalibrátort, ismeretlen mintát és minőségellenőrzőt minden csőbe, majd keverje jól össze.
3. A 2. lépésben elkészített keverékekből vigyen át 100 μL-t a megfelelő mikrotiter lemez kutakba a leírásnak megfelelően.
előre megtervezett tesztkonfigurációhoz.
3. Fedje le a lemezt Plate Sealerrel, és inkubálja 37°C-on 30 percig.
4. Távolítsa el a lemezzáró fóliát, és mossa le a lemezt körülbelül 300 μL 1× Mosóoldattal kutakonként négyszer.
5. A mosási lépések után kopogtassa meg a lemezt egy papírtörlőn, hogy eltávolítsa a kútoszlopokból a maradék folyadékot.
6. Adjon 100 μL TMB oldatot minden egyes lyukba, és inkubálja a lemezt sötétben, 20–25 °C-on 20 percig.
7. Adjon 50 μL leállítóoldatot minden egyes lyukba a reakció leállításához.
8. Olvassa le az abszorbanciát mikroplate-leolvasóban 450 nm-en 10 percen belül (630 nm-en, mivel tartozékként kapható).
(nagyobb pontosságú teljesítményhez ajánlott).