„Testsealabs“ SARS-CoV-2 neutralizuojančių antikūnų aptikimo rinkinys (ELISA)
Trumpas aprašymas:
SARS-CoV-2 neutralizuojančių antikūnų testo kasetė yra greitas chromatografinis imunologinis tyrimas. Šis tyrimas skirtas kokybiniam neutralizuojančių antikūnų prieš 2019 m. koronaviruso ligą nustatymui. Jį galima naudoti su žmogaus viso kraujo, serumo ar plazmos mėginiais. Tyrimas padeda įvertinti žmogaus anti-naujojo koronaviruso neutralizuojančių antikūnų titrų lygį.
 Greiti rezultatai: Tikslūs kaip laboratorijoje per kelias minutes | Laboratorinės klasės tikslumas: patikimas ir patikimas |
| Testuokite bet kur: nereikia lankytis laboratorijoje | Sertifikuota kokybė: 13485, CE, atitinka MDSAP reikalavimus |
| Paprasta ir supaprastinta: lengva naudoti, jokių rūpesčių | Maksimalus patogumas: patogiai atlikite testą namuose |
【PRINCIPAS】
SARS-CoV-2 neutralizuojančių antikūnų aptikimo rinkinys pagrįstas konkurencine ELISA metodika.
Naudojant išgrynintą receptorių surišantį domeną (RBD), viruso smaigalio (S) baltymą ir šeimininko ląstelę
Šis testas yra skirtas imituoti viruso ir šeimininko neutralizuojančią sąveiką, nes tai yra ACE2 receptorius.
Kalibratoriai, kokybės kontrolės ir serumo arba plazmos mėginiai yra atskirai gerai sumaišomi skiedimo metu.
buferis, kuriame yra hACE2-HRP konjugato, padalintas į mažus mėgintuvėlius. Tada mišiniai perkeliami į
mikroplokštelių šulinėlius, kuriuose yra imobilizuotas rekombinantinis SARS-CoV-2 RBD fragmentas (RBD),
inkubacija. 30 minučių inkubacijos metu kalibratoriuose, kokybės kontrolės ir
mėginiai konkuruos su hACE2-HRP dėl specifinio prisijungimo prie šulinėliuose imobilizuoto RBD. Po to
Inkubacijos metu šulinėliai plaunami 4 kartus, kad būtų pašalintas nesurištas hACE2-HRP konjugatas. Tirpalas, kuriame yra
Tada pridedama TMB ir inkubuojama 20 minučių kambario temperatūroje, dėl ko susidaro
mėlyna spalva. Spalvos vystymasis sustabdomas pridedant 1N HCl, o absorbcija yra
matuojama spektrofotometriškai esant 450 nm bangos ilgiui. Susidariusios spalvos intensyvumas yra proporcingas
esančio fermento kiekio ir yra atvirkščiai proporcingas tuo pačiu būdu ištirtų standartų kiekiui.
Palyginus su pateiktų kalibratorių sudaryta kalibravimo kreive, koncentracija
Tada apskaičiuojamas neutralizuojančių antikūnų kiekis nežinomame mėginyje.
【REIKALINGOS, BET NEPRIDĖTOS MEDŽIAGOS】
1. Distiliuotas arba dejonizuotas vanduo
2. Tikslios pipetės: 10 μL, 100 μL, 200 μL ir 1 ml
3. Vienkartiniai pipetės antgaliai
4. Mikroplokštelių skaitytuvas, galintis nuskaityti absorbciją esant 450 nm bangos ilgiui.
5. Sugeriamasis popierius
6. Milimetrinis popierius
7. Sūkurinis maišytuvas arba lygiavertis įrenginys
【MĖGINIŲ RINKIMAS IR LAIKYMAS】
1. Šiam rinkiniui gali būti naudojami serumo ir plazmos mėginiai, surinkti mėgintuvėliuose su K2-EDTA.
2. Mėginiai turi būti uždengti ir prieš tyrimą gali būti laikomi iki 48 valandų 2–8 °C temperatūroje.
Ilgesnį laiką (iki 6 mėnesių) laikomi mėginiai prieš tyrimą turėtų būti užšaldyti tik vieną kartą -20 °C temperatūroje.
Venkite pasikartojančių užšaldymo-atšildymo ciklų.
PROTOKOLAS
【Reagento paruošimas】
1. Prieš naudojimą visus reagentus reikia išimti iš šaldytuvo ir leisti jiems sušilti iki kambario temperatūros.
(20–25 °C). Visus reagentus iškart po naudojimo laikykite šaldytuve.
2. Prieš naudojimą visus mėginius ir kontrolines medžiagas reikia sumaišyti sūkuriniame maišelyje.
3. hACE2-HRP tirpalo paruošimas: Praskieskite hACE2-HRP koncentratą santykiu 1:51 su skiedimo tirpalu
Buferis. Pavyzdžiui, 100 μL hACE2-HRP koncentrato praskieskite 5,0 ml HRP skiedimo buferio, kad
Paruoškite hACE2-HRP tirpalą.
4. 1× plovimo tirpalo paruošimas: 20× plovimo tirpalą praskieskite dejonizuotu arba distiliuotu vandeniu,
tūrio santykis 1:19. Pavyzdžiui, 20 ml 20× plovimo tirpalo praskieskite 380 ml dejonizuoto arba
distiliuoto vandens, kad pagamintumėte 400 ml 1× plovimo tirpalo.
【Bandymo procedūra】
1. Atskiruose mėgintuvėliuose paimkite 120 μL paruošto hACE2-HRP tirpalo.
2. Į kiekvieną mėgintuvėlį įpilkite 6 μL kalibratorių, nežinomų mėginių, kokybės kontrolės ir gerai išmaišykite.
3. Į atitinkamas mikroplokštelės duobutes pagal nurodymus perkelkite po 100 μL kiekvieno 2 veiksme paruošto mišinio.
pagal iš anksto parengtą bandymo konfigūraciją.
3. Uždenkite plokštelę plokštelių sandarikliu ir inkubuokite 37 °C temperatūroje 30 minučių.
4. Nuimkite plokštelės sandariklį ir keturis kartus praplaukite plokštelę maždaug po 300 μL 1× ploviklio kiekvienam šulinėliui.
5. Po plovimo pašalinkite likusį skystį iš šulinių, pastuksendami plokštelę į popierinį rankšluostį.
6. Į kiekvieną šulinėlį įpilkite 100 μL TMB tirpalo ir inkubuokite plokštelę tamsoje 20–25 °C temperatūroje 20 minučių.
7. Į kiekvieną šulinėlį įpilkite 50 μL stabdymo tirpalo, kad sustabdytumėte reakciją.
8. Per 10 minučių nuskaitykite absorbcijos rodmenis mikroplokštelių skaitytuve esant 450 nm bangos ilgiui (630 nm bangos ilgis yra priedas).
rekomenduojama didesniam tikslumui).