टेस्टसीलॅब्स SARS-CoV-2 न्यूट्रलायझिंग अँटीबॉडी डिटेक्शन किट (ELISA)
संक्षिप्त वर्णन:
SARS-CoV-2 न्यूट्रलायझिंग अँटीबॉडी टेस्ट कॅसेट ही एक जलद क्रोमॅटोग्राफिक इम्युनोअसे आहे. ही चाचणी २०१९ च्या कोरोनाव्हायरस रोगाविरुद्ध न्यूट्रलायझिंग अँटीबॉडीजच्या गुणात्मक शोधासाठी डिझाइन केलेली आहे. ती मानवी संपूर्ण रक्त, सीरम किंवा प्लाझ्मा नमुन्यांसह वापरली जाऊ शकते. ही चाचणी मानवी अँटी-नोव्हेल कोरोनाव्हायरस न्यूट्रलायझिंग अँटीबॉडी टायटर्सच्या पातळीचे मूल्यांकन करण्यात मदत करते.
 जलद निकाल: काही मिनिटांत प्रयोगशाळेत अचूक | लॅब-ग्रेड अचूकता: विश्वासार्ह आणि विश्वासार्ह |
| कुठेही चाचणी करा: लॅबला भेट देण्याची आवश्यकता नाही | प्रमाणित गुणवत्ता: १३४८५, सीई, एमडीएसएपी अनुपालन |
| साधे आणि सुव्यवस्थित: वापरण्यास सोपे, कोणताही त्रास नाही | अंतिम सुविधा: घरी आरामात चाचणी करा |
【तत्व】
SARS-CoV-2 न्यूट्रलायझिंग अँटीबॉडी डिटेक्शन किट स्पर्धात्मक ELISA पद्धतीवर आधारित आहे.
प्युरिफाइड रिसेप्टर बाइंडिंग डोमेन (RBD), व्हायरल स्पाइक (S) प्रोटीनमधील प्रथिने आणि होस्ट सेल वापरून
रिसेप्टर ACE2, ही चाचणी व्हायरस-होस्ट न्यूट्रलायझिंग परस्परसंवादाची नक्कल करण्यासाठी डिझाइन केलेली आहे.
कॅलिब्रेटर, गुणवत्ता नियंत्रणे आणि सीरम किंवा प्लाझ्मा नमुने स्वतंत्रपणे पातळ पदार्थात चांगले मिसळले जातात.
लहान नळ्यांमध्ये hACE2-HRP संयुग्मित असलेले बफर. नंतर मिश्रणे
मायक्रोप्लेट विहिरी ज्यामध्ये स्थिर पुनर्संयोजक SARS-CoV-2 RBD फ्रॅगमेंट (RBD) आहे
उष्मायन. ३० मिनिटांच्या उष्मायन दरम्यान, कॅलिब्रेटरमधील RBD विशिष्ट अँटीबॉडी, QC आणि
विहिरींमध्ये स्थिर असलेल्या RBD ला विशिष्ट बंधनासाठी नमुने hACE2-HRP शी स्पर्धा करतील. नंतर
उष्मायनाच्या वेळी, अनबाउंड hACE2-HRP संयुग्म काढून टाकण्यासाठी विहिरी 4 वेळा धुतल्या जातात.
नंतर TMB जोडले जाते आणि खोलीच्या तपमानावर 20 मिनिटे उबवले जाते, परिणामी a चा विकास होतो
निळा रंग. 1N HCl जोडल्याने रंग विकास थांबतो आणि शोषण कमी होते
४५० एनएम वर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक पद्धतीने मोजले. तयार झालेल्या रंगाची तीव्रता
उपस्थित असलेल्या एंजाइमचे प्रमाण, आणि त्याच प्रकारे तपासलेल्या मानकांच्या प्रमाणाशी व्यस्तपणे संबंधित आहे.
प्रदान केलेल्या कॅलिब्रेटर्सनी तयार केलेल्या कॅलिब्रेशन वक्रशी तुलना करून, ची सांद्रता
त्यानंतर अज्ञात नमुन्यातील निष्क्रिय अँटीबॉडीजची गणना केली जाते.
【आवश्यक साहित्य परंतु प्रदान केलेले नाही】
१. डिस्टिल्ड किंवा डीआयोनाइज्ड पाणी
२. अचूक पिपेट्स: १०μL, १००μL, २००μL आणि १ मिली
३. डिस्पोजेबल पिपेट टिप्स
४. ४५०nm वर शोषकता वाचण्यास सक्षम मायक्रोप्लेट रीडर.
५. शोषक कागद
६. आलेख कागद
७. व्होर्टेक्स मिक्सर किंवा समतुल्य
【संकलन आणि साठवणूक नमुना】
१. K2-EDTA असलेल्या नळ्यांमध्ये गोळा केलेले सीरम आणि प्लाझ्मा नमुने या किटसाठी वापरले जाऊ शकतात.
२. नमुने झाकलेले असावेत आणि तपासणीपूर्वी २°C - ८°C तापमानावर ४८ तासांपर्यंत साठवले जाऊ शकतात.
जास्त काळ (६ महिन्यांपर्यंत) ठेवलेले नमुने तपासणीपूर्वी -२० डिग्री सेल्सिअस तापमानावर फक्त एकदाच गोठवले पाहिजेत.
वारंवार गोठवण्याचे-वितळण्याचे चक्र टाळा.
प्रोटोकॉल
【अभिकर्मक तयारी】
१. सर्व अभिकर्मक रेफ्रिजरेशनमधून बाहेर काढले पाहिजेत आणि वापरण्यापूर्वी खोलीच्या तापमानाला परत येऊ दिले पाहिजेत.
(२०° ते २५°C). वापरल्यानंतर लगेच सर्व अभिकर्मक रेफ्रिजरेटरमध्ये ठेवा.
२. वापरण्यापूर्वी सर्व नमुने आणि नियंत्रणे भोवरा फिरवावीत.
३. hACE2-HRP द्रावण तयार करणे: hACE2-HRP सांद्रता १:५१ च्या प्रमाणात डायल्युशनने पातळ करा.
बफर. उदाहरणार्थ, १०० μL hACE2-HRP कॉन्सन्ट्रेट ५.० मिली HRP डायल्युशन बफरने पातळ करा जेणेकरून
hACE2-HRP द्रावण तयार करा.
४. १× वॉश सोल्यूशन तयार करणे: २०× वॉश सोल्यूशनला डीआयोनाइज्ड किंवा डिस्टिल्ड वॉटरने पातळ करा.
१:१९ च्या आकारमानाचे प्रमाण. उदाहरणार्थ, २० मिली २०× वॉश सोल्युशन ३८० मिली विआयनीकृत किंवा
४०० मिली १× वॉश सोल्युशन बनवण्यासाठी डिस्टिल्ड वॉटर.
【चाचणी प्रक्रिया】
१. वेगवेगळ्या नळ्यांमध्ये, तयार केलेल्या hACE2-HRP द्रावणाचे १२०μL प्रमाण मिसळा.
२. प्रत्येक नळीमध्ये ६ μL कॅलिब्रेटर, अज्ञात नमुने, गुणवत्ता नियंत्रणे घाला आणि चांगले मिसळा.
३. चरण २ मध्ये तयार केलेल्या प्रत्येक मिश्रणाचे १००μL संबंधित मायक्रोप्लेट विहिरींमध्ये त्यानुसार हस्तांतरित करा.
पूर्व-डिझाइन केलेल्या चाचणी कॉन्फिगरेशनसाठी.
३. प्लेट सीलरने झाकून ठेवा आणि ३७°C वर ३० मिनिटे उबवा.
४. प्लेट सीलर काढा आणि प्लेट सुमारे ३०० μL १× वॉश सोल्युशनने प्रत्येक विहिरीत चार वेळा धुवा.
५. धुण्याच्या टप्प्यांनंतर विहिरींमधील उरलेले द्रव काढून टाकण्यासाठी प्लेटला कागदी टॉवेलवर दाबा.
६. प्रत्येक विहिरीत १०० μL TMB द्रावण घाला आणि प्लेट २० - २५°C तापमानात २० मिनिटे अंधारात ठेवा.
७. अभिक्रिया थांबवण्यासाठी प्रत्येक विहिरीत ५० μL स्टॉप सोल्युशन घाला.
८. मायक्रोप्लेट रीडरमध्ये १० मिनिटांत ४५० एनएमवर शोषकता वाचा (६३० एनएम अॅक्सेसरी म्हणून)
उच्च अचूक कामगिरीसाठी शिफारसित).