Kit ta' Sejbien ta' Antikorpi Newtralizzanti tas-SARS-CoV-2 ta' Testsealabs (ELISA)
Deskrizzjoni Qasira:
Il-Kassetta tat-Test tal-Antikorpi Newtralizzanti tas-SARS-CoV-2 hija immunoassay kromatografika rapida. Dan l-assay huwa ddisinjat għad-detezzjoni kwalitattiva ta' antikorpi newtralizzanti kontra l-Marda tal-Coronavirus 2019. Jista' jintuża ma' kampjuni tad-demm sħiħ uman, tas-serum, jew tal-plażma. It-test iservi bħala għajnuna fl-evalwazzjoni tal-livelli tat-titri tal-antikorpi newtralizzanti kontra l-coronavirus ġdid uman.
 Riżultati Rapidi: Preċiżi fil-Laboratorju f'Minuti | Preċiżjoni ta' Grad ta' Laboratorju: Affidabbli u ta' Min Jistgħu Jkunu Ta ... |
| Ittestja Kullimkien: L-ebda Żjara fil-Laboratorju Meħtieġa | Kwalità Ċertifikata: 13485, CE, Konformi mal-Mdsap |
| Sempliċi u Simplifikat: Faċli biex Tuża, Bla Tbatija | Konvenjenza Massima: Ittestja bil-Kumdità fid-Dar |
【PRINĊIPJU】
Il-Kit ta' Detezzjoni ta' Antikorpi Newtralizzanti tas-SARS-CoV-2 huwa bbażat fuq metodoloġija ELISA kompetittiva.
Bl-użu ta' dominju purifikat li jorbot mar-riċettur (RBD), proteina mill-proteina tal-ispike virali (S) u ċ-ċellula ospitanti
riċettur ACE2, dan it-test huwa mfassal biex jimita l-interazzjoni newtralizzanti bejn il-virus u l-ospitant.
Il-kalibraturi, il-Kontrolli tal-Kwalità, u l-kampjuni tas-serum jew tal-plażma jitħalltu sew individwalment fid-dilwizzjoni
buffer li fih konjugat hACE2-HRP imqassam f'tubi żgħar. Imbagħad it-taħlitiet jiġu trasferiti fi
il-bjar tal-mikropjastri li fihom framment RBD (RBD) rikombinanti immobilizzat tas-SARS-CoV-2 għal
inkubazzjoni. Matul l-inkubazzjoni ta' 30 minuta, l-antikorp speċifiku għall-RBD fil-kalibraturi, QC u
Il-kampjuni se jikkompetu mal-hACE2-HRP għal rabta speċifika mal-RBD immobilizzat fil-bjar. Wara
Wara l-inkubazzjoni, il-bjar jinħaslu 4 darbiet biex jitneħħa l-konjugat hACE2-HRP mhux marbut. Soluzzjoni ta'
Imbagħad jiżdied it-TMB u jiġi inkubat għal 20 minuta f'temperatura tal-kamra, u dan jirriżulta fl-iżvilupp ta'
kulur blu. L-iżvilupp tal-kulur jitwaqqaf biż-żieda ta' 1N HCl, u l-assorbenza hija
imkejjel b'mod spettrofotometriku f'450 nm. L-intensità tal-kulur iffurmat hija proporzjonali għall-
l-ammont ta' enzima preżenti, u huwa relatat b'mod invers mal-ammont ta' standards analizzati bl-istess mod.
Permezz ta' tqabbil mal-kurva tal-kalibrazzjoni ffurmata mill-kalibraturi pprovduti, il-konċentrazzjoni ta'
Imbagħad jiġu kkalkulati l-antikorpi newtralizzanti fil-kampjun mhux magħruf.
【MATERJALI MEĦTIEĠA IŻDA MHUX IPPROVDUTI】
1. Ilma distillat jew dejonizzat
2. Pipetti ta' preċiżjoni: 10μL, 100μL, 200μL u 1 mL
3. Ponot tal-pipetta li jintremew
4. Qarrej tal-mikropjastri kapaċi jaqra l-assorbenza f'450nm.
5. Karta assorbenti
6. Karta grafika
7. Mixer vortex jew ekwivalenti
【ĠBIR U ĦAŻNA TA' KAMPJUNI】
1. Kampjuni tas-serum u tal-plażma miġbura f'tubi li fihom K2-EDTA jistgħu jintużaw għal dan il-kit.
2. Il-kampjuni għandhom ikunu mgħottija b'tapp u jistgħu jinħażnu sa 48 siegħa f'temperatura ta' 2 °C - 8 °C qabel l-analiżi.
Kampjuni miżmuma għal żmien itwal (sa 6 xhur) għandhom jiġu ffriżati darba biss f'-20 °C qabel l-analiżi.
Evita ċikli ripetuti ta' ffriżar u tidwib.
PROTOKOLL
【Preparazzjoni tar-Reaġent】
1. Ir-reaġenti kollha għandhom jitneħħew mir-refriġerazzjoni u jitħallew jerġgħu lura għat-temperatura tal-kamra qabel l-użu.
(20° sa 25°C). Żomm ir-reaġenti kollha fil-friġġ minnufih wara l-użu.
2. Il-kampjuni u l-kontrolli kollha għandhom jiġu vortexjati qabel l-użu.
3. Preparazzjoni tas-Soluzzjoni hACE2-HRP: Iddilwixxi l-konċentrat hACE2-HRP fi proporzjon ta' dilwizzjoni ta' 1:51 bid-Dilwizzjoni
Buffer. Pereżempju, iddilwixxi 100 μL ta' konċentrat hACE2-HRP ma' 5.0mL ta' Buffer ta' Dilwizzjoni HRP biex
agħmel soluzzjoni ta' hACE2-HRP.
4. Tħejjija tas-Soluzzjoni tal-Ħasil 1×: Iddilwixxi s-Soluzzjoni tal-Ħasil 20× b'ilma dejonizzat jew distillat b'
proporzjon tal-volum ta' 1:19. Pereżempju, iddilwixxi 20 mL ta' Soluzzjoni tal-Ħasil 20× ma' 380 mL ta' ilma dejonizzat jew
ilma distillat biex tagħmel 400 mL ta' Soluzzjoni tal-Ħasil 1×.
【Proċedura tat-Test】
1. F'tubi separati, alikwottja 120μL tas-Soluzzjoni hACE2-HRP ippreparata.
2. Żid 6 μL ta' kalibraturi, kampjuni mhux magħrufa, kontrolli tal-kwalità f'kull tubu u ħawwad sew.
3. Ittrasferixxi 100μL ta' kull taħlita ppreparata fil-pass 2 fil-bjar tal-mikropjastri korrispondenti skont
għal konfigurazzjoni tat-test iddisinjata minn qabel.
3. Għatti l-pjanċa bil-Plate Sealer u inkubaha f'temperatura ta' 37°C għal 30 minuta.
4. Neħħi l-Plate Sealer u aħsel il-pjanċa b'madwar 300 μL ta' 1× Wash Solution għal kull bir għal erba' darbiet.
5. Tektek il-pjanċa fuq xugaman tal-karti biex tneħħi l-likwidu residwu fil-bjar wara l-passi tal-ħasil.
6. Żid 100 μL ta' Soluzzjoni TMB ma' kull bir u inkuba l-pjanċa fid-dlam f'temperatura ta' 20 - 25°C għal 20 minuta.
7. Żid 50 μL ta' Soluzzjoni ta' Waqfien ma' kull bir biex twaqqaf ir-reazzjoni.
8. Aqra l-assorbenza fil-qarrej tal-mikropjastri f'450 nm fi żmien 10 minuti (630nm bħala aċċessorju huwa)
rakkomandat għal prestazzjoni ta' preċiżjoni ogħla).