Testsealabs SARS-CoV-2 न्यूट्रलाइजिङ एन्टिबडी डिटेक्शन किट (ELISA)
छोटो वर्णन:
SARS-CoV-2 न्यूट्रलाइजिङ एन्टिबडी टेस्ट क्यासेट एक द्रुत क्रोमेटोग्राफिक इम्युनोएसे हो। यो परख कोरोनाभाइरस रोग २०१९ विरुद्ध न्यूट्रलाइजिङ एन्टिबडीहरूको गुणात्मक पत्ता लगाउनको लागि डिजाइन गरिएको हो। यसलाई मानव सम्पूर्ण रगत, सीरम, वा प्लाज्मा नमूनाहरूसँग प्रयोग गर्न सकिन्छ। यो परीक्षणले मानव एन्टी-नोभल कोरोनाभाइरस न्यूट्रलाइजिङ एन्टिबडी टाइटरहरूको स्तर मूल्याङ्कन गर्न मद्दतको रूपमा काम गर्दछ।
 द्रुत नतिजा: मिनेटमै प्रयोगशाला-सटीक | प्रयोगशाला-ग्रेड परिशुद्धता: भरपर्दो र भरपर्दो |
| जहाँसुकै परीक्षण गर्नुहोस्: प्रयोगशाला भ्रमण आवश्यक पर्दैन | प्रमाणित गुणस्तर: १३४८५, CE, Mdsap अनुरूप |
| सरल र सुव्यवस्थित: प्रयोग गर्न सजिलो, झन्झटमुक्त | परम सुविधा: घरमै आरामसँग परीक्षण गर्नुहोस् |
【सिद्धान्त】
SARS-CoV-2 न्यूट्रलाइजिङ एन्टिबडी डिटेक्शन किट प्रतिस्पर्धी ELISA पद्धतिमा आधारित छ।
शुद्ध रिसेप्टर बाइन्डिङ डोमेन (RBD), भाइरल स्पाइक (S) प्रोटिनबाट प्रोटिन र होस्ट सेल प्रयोग गरेर
रिसेप्टर ACE2, यो परीक्षण भाइरस-होस्ट तटस्थ अन्तरक्रियाको नक्कल गर्न डिजाइन गरिएको हो।
क्यालिब्रेटरहरू, गुणस्तर नियन्त्रणहरू, र सीरम वा प्लाज्मा नमूनाहरू व्यक्तिगत रूपमा पातलोमा राम्रोसँग मिसाइन्छ।
hACE2-HRP कन्जुगेट भएको बफरलाई साना ट्यूबहरूमा अलगाव गरिएको छ। त्यसपछि मिश्रणहरूलाई भित्र स्थानान्तरण गरिन्छ
स्थिर पुनः संयोजक SARS-CoV-2 RBD टुक्रा (RBD) भएको माइक्रोप्लेट इनारहरू
इन्क्युबेशन। ३०-मिनेट इन्क्युबेशनको समयमा, क्यालिब्रेटरहरूमा RBD विशिष्ट एन्टिबडी, QC र
इनारहरूमा स्थिर RBD लाई विशिष्ट बाइन्डिङको लागि नमूनाहरूले hACE2-HRP सँग प्रतिस्पर्धा गर्नेछन्। पछि
इन्क्युबेशनमा, अनबाउन्ड hACE2-HRP कन्जुगेट हटाउन इनारहरू ४ पटक धोइन्छ। को घोल
त्यसपछि TMB थपिन्छ र कोठाको तापक्रममा २० मिनेटको लागि इन्क्युबेट गरिन्छ, जसको परिणामस्वरूप a को विकास हुन्छ
नीलो रंग। १N HCl थपिएपछि रङको विकास रोकिन्छ, र अवशोषण हुन्छ
४५० एनएममा स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूपमा मापन गरिएको। बनेको रंगको तीव्रता समानुपातिक हुन्छ
उपस्थित इन्जाइमको मात्रा, र उही तरिकाले परीक्षण गरिएको मापदण्डको मात्रासँग उल्टो सम्बन्धित छ।
प्रदान गरिएका क्यालिब्रेटरहरूद्वारा बनाइएको क्यालिब्रेसन वक्रसँग तुलना गरेर, को सांद्रता
त्यसपछि अज्ञात नमूनामा एन्टिबडीहरूलाई तटस्थ गर्ने गणना गरिन्छ।
【आवश्यक सामग्रीहरू तर प्रदान गरिएको छैन】
१. आसुत वा विआयनीकृत पानी
२. प्रेसिजन पिपेट्स: १०μL, १००μL, २००μL र १ एमएल
३. डिस्पोजेबल पिपेट टिप्स
४. ४५०nm मा अवशोषण पढ्न सक्षम माइक्रोप्लेट रिडर।
५. अवशोषक कागज
६. ग्राफ पेपर
७. भोर्टेक्स मिक्सर वा समकक्ष
【सङ्कलन र भण्डारणको नमुना दिनुहोस्】
१. यस किटको लागि K2-EDTA भएको ट्यूबहरूमा सङ्कलन गरिएका सीरम र प्लाज्मा नमूनाहरू प्रयोग गर्न सकिन्छ।
२. नमूनाहरूलाई बन्द गर्नुपर्छ र परीक्षण गर्नु अघि २°C - ८°C मा ४८ घण्टासम्म भण्डारण गर्न सकिन्छ।
लामो समयसम्म (६ महिनासम्म) राखिएका नमूनाहरूलाई परीक्षण गर्नुअघि -२० डिग्री सेल्सियसमा एक पटक मात्र फ्रिज गर्नुपर्छ।
बारम्बार जम्ने-पग्लने चक्रबाट बच्नुहोस्।
प्रोटोकल
【अभिकर्मक तयारी】
१. प्रयोग गर्नु अघि सबै अभिकर्मकहरूलाई रेफ्रिजरेसनबाट बाहिर निकालेर कोठाको तापक्रममा फर्कन दिनुपर्छ।
(२०° देखि २५° सेल्सियस)। प्रयोग पछि तुरुन्तै सबै अभिकर्मकहरूलाई फ्रिजमा राख्नुहोस्।
२. प्रयोग गर्नु अघि सबै नमुना र नियन्त्रणहरूलाई भोर्टेक्स गर्नुपर्छ।
३. hACE2-HRP घोलको तयारी: hACE2-HRP कन्सेन्ट्रेटलाई १:५१ डिल्युसन अनुपातमा डिल्युसनको साथ पातलो पार्नुहोस्।
बफर। उदाहरणका लागि, १०० μL hACE2-HRP कन्सेन्ट्रेटलाई ५.० मिलीलीटर HRP डिल्युसन बफरसँग पातलो पार्नुहोस्।
hACE2-HRP घोल बनाउनुहोस्।
४. १× धुने घोलको तयारी: २०× धुने घोललाई डिआयोनाइज्ड वा डिस्टिल्ड पानीले पातलो पार्नुहोस्।
१:१९ को आयतन अनुपात। उदाहरणका लागि, २० एमएल २०× वाश सोल्युसनलाई ३८० एमएल डिआयोनाइज्ड वा
४०० एमएल १× वाश सोल्युसन बनाउन डिस्टिल्ड वाटर।
【परीक्षण प्रक्रिया】
१. छुट्टाछुट्टै ट्यूबहरूमा, तयार गरिएको hACE2-HRP घोलको १२०μL मात्रा मिलाउनुहोस्।
२. प्रत्येक ट्यूबमा ६ μL क्यालिब्रेटरहरू, अज्ञात नमूनाहरू, गुणस्तर नियन्त्रणहरू थप्नुहोस् र राम्रोसँग मिलाउनुहोस्।
३. चरण २ मा तयार पारिएको प्रत्येक मिश्रणको १००μL लाई सम्बन्धित माइक्रोप्लेट इनारहरूमा स्थानान्तरण गर्नुहोस्।
पूर्व डिजाइन गरिएको परीक्षण कन्फिगरेसनमा।
३. प्लेटलाई प्लेट सिलरले छोप्नुहोस् र ३७°C मा ३० मिनेटको लागि इन्क्युबेट गर्नुहोस्।
४. प्लेट सिलर हटाउनुहोस् र प्लेटलाई लगभग ३०० μL १× वाश सोल्युसनले प्रति इनार चार पटक धुनुहोस्।
५. धुने चरणहरू पछि इनारमा रहेको अवशिष्ट तरल पदार्थ हटाउन पेपर तौलियामा प्लेट ट्याप गर्नुहोस्।
६. प्रत्येक इनारमा १०० μL TMB घोल थप्नुहोस् र प्लेटलाई २० - २५°C मा २० मिनेटको लागि अँध्यारो ठाउँमा राख्नुहोस्।
७. प्रतिक्रिया रोक्न प्रत्येक इनारमा ५० μL स्टप सोल्युसन थप्नुहोस्।
८. १० मिनेट भित्र ४५० एनएममा माइक्रोप्लेट रिडरमा अवशोषण पढ्नुहोस् (सहायकको रूपमा ६३० एनएम)
उच्च परिशुद्धता प्रदर्शनको लागि सिफारिस गरिएको)।