SARS-COV-2 nøytraliserende antistoffdeteksjonssett （ELISA)
【Tiltenkt bruk】
SARS-COV-2-nøytraliserende antistoffdeteksjonssett er et konkurransedyktig enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA) beregnet på kvalitativ og semi-kvantitativ påvisning av total nøytraliserende antistoffer mot SARS-COV-2 i humant serum og plasma. SARS-COV-2-nøytraliserende antistoffdeteksjonssett kan brukes som et hjelpemiddel til å identifisere individer med en adaptiv immunrespons på SARS-COV-2, noe som indikerer nyere eller tidligere infeksjon. SARS-COV-2-nøytraliserende antistoffdeteksjonssett skal ikke brukes til å diagnostisere akutt SARS-COV-2-infeksjon.
【INTRODUKSJON】
Koronavirusinfeksjoner induserer typisk nøytraliserende antistoffresponser. Serokonversjonshastighetene hos COVID-19 pasienter er henholdsvis 50% og 100% på dag 7 og 14 postsymptomer. For å presentere kunnskap, er tilsvarende virus nøytraliserende antistoff i blod et anerkjent som et mål for å bestemme antistoffeffektivitet og høyere konsentrasjon av det nøytraliserende antistoffet indikerer høyere beskyttelseseffektivitet. Plakkreduksjons nøytraliseringstest (PRNT) er blitt anerkjent som gullstandarden for å oppdage nøytraliserende antistoffer. På grunn av dets lave gjennomstrømning og høyere krav til drift, er PRNT imidlertid ikke praktisk for serodiagnose i stor skala og vaksineevaluering. SARS-COV-2-nøytraliserende antistoffdeteksjonssett er basert på konkurrerende enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA) metodikk, som kan oppdage det nøytraliserende antistoffet i blodprøven samt spesielt tilgang til konsentrasjonsnivåene til denne typen antistoff.
【Testprosedyre】
1. I separate rør, alikvot 120 ul av den forberedte HACE2-HRP-løsningen.
2. Tilsett 6 μl kalibratorer, ukjente prøver, kvalitetskontroller i hvert rør og bland godt.
3. Overfør 100 ul av hver blanding fremstilt i trinn 2 til tilsvarende mikroplatebrønner i henhold til forhåndsdesignet testkonfigurasjon.
3. Dekk platen med plateforsegler og inkuber ved 37 ° C i 60 minutter.
4. Fjern plateforsegleren og vask platen med omtrentlig 300 ul 1 × vaskeoppløsning per brønn i fire ganger.
5. Tapp platen på papirhåndkle for å fjerne restvæske i brønnene etter å vaske trinn.
6. Tilsett 100 ul TMB -løsning til hver brønn og inkuber platen i mørket ved 20 - 25 ° C i 20 minutter.
7. Legg til 50 μl stoppløsning til hver brønn for å stoppe reaksjonen.
8. Les absorbansen i mikroplateleser ved 450 nm i løpet av 10 minutter (630 nm som tilbehør anbefales for høyere presisjonsytelse.
