ਟੈਸਟਸੀਲੈਬਸ SARS-CoV-2 ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ (ELISA)
ਛੋਟਾ ਵਰਣਨ:
SARS-CoV-2 ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਟੈਸਟ ਕੈਸੇਟ ਇੱਕ ਤੇਜ਼ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਇਮਯੂਨੋਐਸੇ ਹੈ। ਇਹ ਪਰਖ ਕੋਰੋਨਾਵਾਇਰਸ ਬਿਮਾਰੀ 2019 ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੀ ਗੁਣਾਤਮਕ ਖੋਜ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ। ਇਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਮਨੁੱਖੀ ਪੂਰੇ ਖੂਨ, ਸੀਰਮ, ਜਾਂ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਇਹ ਟੈਸਟ ਮਨੁੱਖੀ ਐਂਟੀ-ਨੋਵਲ ਕੋਰੋਨਾਵਾਇਰਸ ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਟਾਈਟਰਾਂ ਦੇ ਪੱਧਰਾਂ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਹਾਇਤਾ ਵਜੋਂ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਹੈ।
 ਤੇਜ਼ ਨਤੀਜੇ: ਮਿੰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਲੈਬ-ਸਹੀ | ਲੈਬ-ਗ੍ਰੇਡ ਸ਼ੁੱਧਤਾ: ਭਰੋਸੇਯੋਗ ਅਤੇ ਭਰੋਸੇਮੰਦ |
| ਕਿਤੇ ਵੀ ਟੈਸਟ ਕਰੋ: ਲੈਬ ਵਿਜ਼ਿਟ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ | ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਗੁਣਵੱਤਾ: 13485, CE, Mdsap ਅਨੁਕੂਲ |
| ਸਰਲ ਅਤੇ ਸੁਚਾਰੂ: ਵਰਤੋਂ ਵਿੱਚ ਆਸਾਨ, ਬਿਨਾਂ ਕਿਸੇ ਪਰੇਸ਼ਾਨੀ ਦੇ | ਅਤਿਅੰਤ ਸਹੂਲਤ: ਘਰ ਬੈਠੇ ਆਰਾਮ ਨਾਲ ਟੈਸਟ ਕਰੋ |
【ਸਿਧਾਂਤ】
SARS-CoV-2 ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪ੍ਰਤੀਯੋਗੀ ELISA ਵਿਧੀ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ।
ਸ਼ੁੱਧ ਰੀਸੈਪਟਰ ਬਾਈਡਿੰਗ ਡੋਮੇਨ (RBD), ਵਾਇਰਲ ਸਪਾਈਕ (S) ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਤੋਂ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਹੋਸਟ ਸੈੱਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ
ਰੀਸੈਪਟਰ ACE2, ਇਹ ਟੈਸਟ ਵਾਇਰਸ-ਹੋਸਟ ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਇੰਟਰੈਕਸ਼ਨ ਦੀ ਨਕਲ ਕਰਨ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।
ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਟਰ, ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ, ਅਤੇ ਸੀਰਮ ਜਾਂ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਵੱਖਰੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਤਲਾ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
hACE2-HRP ਕੰਜੂਗੇਟ ਵਾਲਾ ਬਫਰ ਛੋਟੀਆਂ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਅਲਕੋਲੇਟ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਫਿਰ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ
ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਖੂਹ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ SARS-CoV-2 RBD ਫ੍ਰੈਗਮੈਂਟ (RBD) ਹੁੰਦਾ ਹੈ
ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ। 30-ਮਿੰਟ ਦੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਦੌਰਾਨ, ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਟਰਾਂ ਵਿੱਚ RBD ਖਾਸ ਐਂਟੀਬਾਡੀ, QC ਅਤੇ
ਨਮੂਨੇ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ RBD ਨੂੰ ਖਾਸ ਬਾਈਡਿੰਗ ਲਈ hACE2-HRP ਨਾਲ ਮੁਕਾਬਲਾ ਕਰਨਗੇ। ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ
ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਦੌਰਾਨ, ਖੂਹਾਂ ਨੂੰ 4 ਵਾਰ ਧੋਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਅਣ-ਬਾਊਂਡ hACE2-HRP ਕੰਜੂਗੇਟ ਨੂੰ ਹਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕੇ। ਦਾ ਇੱਕ ਘੋਲ
ਫਿਰ TMB ਨੂੰ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 20 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ a ਦਾ ਵਿਕਾਸ ਹੁੰਦਾ ਹੈ
ਨੀਲਾ ਰੰਗ। 1N HCl ਦੇ ਜੋੜ ਨਾਲ ਰੰਗ ਵਿਕਾਸ ਰੁਕ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਸੋਖਣ ਸ਼ਕਤੀ
450 nm 'ਤੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੈਟ੍ਰਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ। ਬਣੇ ਰੰਗ ਦੀ ਤੀਬਰਤਾ ਦੇ ਅਨੁਪਾਤੀ ਹੈ
ਮੌਜੂਦ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਮਾਤਰਾ, ਅਤੇ ਉਸੇ ਤਰੀਕੇ ਨਾਲ ਪਰਖੇ ਗਏ ਮਿਆਰਾਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨਾਲ ਉਲਟ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ।
ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਟਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਏ ਗਏ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਵਕਰ ਨਾਲ ਤੁਲਨਾ ਕਰਕੇ, ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ
ਫਿਰ ਅਣਜਾਣ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਨੂੰ ਬੇਅਸਰ ਕਰਨ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
【ਸਮੱਗਰੀ ਲੋੜੀਂਦੀ ਹੈ ਪਰ ਪ੍ਰਦਾਨ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ】
1. ਡਿਸਟਿਲਡ ਜਾਂ ਡੀਆਇਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ
2. ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਪਾਈਪੇਟ: 10μL, 100μL, 200μL ਅਤੇ 1 ਮਿ.ਲੀ.
3. ਡਿਸਪੋਸੇਬਲ ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪਸ
4. ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਰੀਡਰ 450nm 'ਤੇ ਸੋਖਣ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹਨ ਦੇ ਸਮਰੱਥ।
5. ਸੋਖਣ ਵਾਲਾ ਕਾਗਜ਼
6. ਗ੍ਰਾਫ਼ ਪੇਪਰ
7. ਵੌਰਟੈਕਸ ਮਿਕਸਰ ਜਾਂ ਬਰਾਬਰ
【ਸੰਗ੍ਰਹਿ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਲਓ】
1. ਇਸ ਕਿੱਟ ਲਈ K2-EDTA ਵਾਲੀਆਂ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਸੀਰਮ ਅਤੇ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਵਰਤੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ।
2. ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਢੱਕ ਕੇ ਰੱਖਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਜਾਂਚ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ 2 °C - 8 °C 'ਤੇ 48 ਘੰਟਿਆਂ ਤੱਕ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ (6 ਮਹੀਨਿਆਂ ਤੱਕ) ਲਈ ਰੱਖੇ ਗਏ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਪਰਖ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ -20 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਸਿਰਫ਼ ਇੱਕ ਵਾਰ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣ-ਪਿਘਲਣ ਦੇ ਚੱਕਰਾਂ ਤੋਂ ਬਚੋ।
ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ
【ਰੀਐਜੈਂਟ ਤਿਆਰੀ】
1. ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਨੂੰ ਫਰਿੱਜ ਵਿੱਚੋਂ ਬਾਹਰ ਕੱਢਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਵਾਪਸ ਜਾਣ ਦਿੱਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
(20° ਤੋਂ 25°C)। ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਨੂੰ ਫਰਿੱਜ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ।
2. ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਸਾਰੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਅਤੇ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਨੂੰ ਘੁੰਮਾਇਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
3. hACE2-HRP ਘੋਲ ਤਿਆਰੀ: hACE2-HRP ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ 1:51 ਦੇ ਡਾਇਲਿਊਸ਼ਨ ਅਨੁਪਾਤ 'ਤੇ ਡਾਇਲਿਊਸ਼ਨ ਨਾਲ ਪਤਲਾ ਕਰੋ।
ਬਫਰ। ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, 100 μL hACE2-HRP ਕੰਸੈਂਟਰੇਟ ਨੂੰ 5.0mL HRP ਡਾਇਲਿਊਸ਼ਨ ਬਫਰ ਨਾਲ ਪਤਲਾ ਕਰੋ ਤਾਂ ਜੋ
ਇੱਕ hACE2-HRP ਘੋਲ ਬਣਾਓ।
4. 1× ਵਾਸ਼ ਘੋਲ ਦੀ ਤਿਆਰੀ: 20× ਵਾਸ਼ ਘੋਲ ਨੂੰ ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਜਾਂ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਪਤਲਾ ਕਰੋ
1:19 ਦਾ ਆਇਤਨ ਅਨੁਪਾਤ। ਉਦਾਹਰਣ ਵਜੋਂ, 20 ਮਿ.ਲੀ. 20× ਵਾਸ਼ ਘੋਲ ਨੂੰ 380 ਮਿ.ਲੀ. ਡੀਆਇਨਾਈਜ਼ਡ ਜਾਂ
1× ਵਾਸ਼ ਘੋਲ ਦਾ 400 ਮਿ.ਲੀ. ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ।
【ਟੈਸਟ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ】
1. ਵੱਖ-ਵੱਖ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ, ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ hACE2-HRP ਘੋਲ ਦੇ 120μL ਨੂੰ ਅਲਕੋਹਲ ਕਰੋ।
2. ਹਰੇਕ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ 6 μL ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਟਰ, ਅਣਜਾਣ ਨਮੂਨੇ, ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਪਾਓ ਅਤੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
3. ਕਦਮ 2 ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਰੇਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੇ 100μL ਨੂੰ ਅਨੁਸਾਰੀ ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ
ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕੀਤੀ ਟੈਸਟ ਸੰਰਚਨਾ ਲਈ।
3. ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਪਲੇਟ ਸੀਲਰ ਨਾਲ ਢੱਕ ਦਿਓ ਅਤੇ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 37°C 'ਤੇ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕਰੋ।
4. ਪਲੇਟ ਸੀਲਰ ਨੂੰ ਹਟਾਓ ਅਤੇ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 300 μL 1× ਵਾਸ਼ ਸਲਿਊਸ਼ਨ ਨਾਲ ਪ੍ਰਤੀ ਖੂਹ ਚਾਰ ਵਾਰ ਧੋਵੋ।
5. ਧੋਣ ਦੇ ਕਦਮਾਂ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਬਚੇ ਹੋਏ ਤਰਲ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਪੇਪਰ ਟਾਵਲ 'ਤੇ ਟੈਪ ਕਰੋ।
6. ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 100 μL TMB ਘੋਲ ਪਾਓ ਅਤੇ ਪਲੇਟ ਨੂੰ 20 - 25°C 'ਤੇ ਹਨੇਰੇ ਵਿੱਚ 20 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਰੱਖੋ।
7. ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 50 μL ਸਟਾਪ ਸਲਿਊਸ਼ਨ ਪਾਓ।
8. ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਰੀਡਰ ਵਿੱਚ 10 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ 450 nm 'ਤੇ ਸੋਖਣ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹੋ (630nm ਸਹਾਇਕ ਵਜੋਂ ਹੈ)
ਉੱਚ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਲਈ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ)।