Testsealabs комплет за детекцију неутралишућих антитела против SARS-CoV-2 (ELISA)
Кратак опис:
Касета за тест неутрализујућа антитела на SARS-CoV-2 је брзи хроматографски имунолошки тест. Овај тест је намењен за квалитативно откривање неутрализујућих антитела против коронавируса 2019. Може се користити са узорцима људске крви, серума или плазме. Тест служи као помоћ у процени нивоа титара неутрализујућих антитела против новог коронавируса.
 Брзи резултати: Лабораторијски тачни за неколико минута | Лабораторијска прецизност: Поуздано и поуздано |
| Тестирајте било где: Није потребна посета лабораторији | Сертификовани квалитет: 13485, CE, у складу са Mdsap стандардима |
| Једноставно и поједностављено: Лако за коришћење, без муке | Врхунска практичност: Тестирајте удобно код куће |
【ПРИНЦИП】
Комплет за детекцију неутралишућих антитела против SARS-CoV-2 заснован је на компетитивној ELISA методологији.
Користећи пречишћени домен везивања рецептора (RBD), протеин из протеина вирусног шиљка (S) и ћелију домаћина
рецептор ACE2, овај тест је дизајниран да имитира интеракцију неутрализације вируса и домаћина.
Калибратори, контроле квалитета и узорци серума или плазме се појединачно добро мешају у разблажењу
пуфер који садржи hACE2-HRP коњугат аликвотирано у мале епрувете. Затим се смеше преносе у
јажице микроплоче које садрже имобилисани рекомбинантни RBD фрагмент SARS-CoV-2 (RBD) за
инкубација. Током 30-минутне инкубације, RBD специфична антитела у калибраторима, QC и
Узорци ће се такмичити са hACE2-HRP за специфично везивање за RBD имобилизован у бунарима. Након
инкубације, бунарићи се испирају 4 пута да би се уклонио невезани hACE2-HRP коњугат. Раствор
ТМБ се затим додаје и инкубира 20 минута на собној температури, што резултира развојем
плава боја. Развој боје се зауставља додатком 1N HCl, а апсорбанција је
мерено спектрофотометријски на 450 nm. Интензитет формиране боје је пропорционалан
количина присутног ензима и обрнуто је пропорционална количини стандарда анализираних на исти начин.
Поређењем са калибрационом кривом коју су формирали обезбеђени калибратори, концентрација
затим се израчунавају неутралишућа антитела у непознатом узорку.
【ПОТРЕБНИ МАТЕРИЈАЛИ КОЈИ НИСУ ОБЕЗБЕЂЕНИ】
1. Дестилована или дејонизована вода
2. Прецизне пипете: 10μL, 100μL, 200μL и 1 mL
3. Врхови пипета за једнократну употребу
4. Читач микроплоча способан за очитавање апсорбанције на 450 нм.
5. Упијајући папир
6. Милиметарски папир
7. Вртложни миксер или еквивалент
【ПРИКУПЉАЊЕ И СКЛАДИШТЕЊЕ УЗОРКА】
1. Узорци серума и плазме сакупљени у епрувете које садрже K2-EDTA могу се користити за овај комплет.
2. Узорке треба затворити поклопцем и могу се чувати до 48 сати на температури од 2 °C до 8 °C пре анализе.
Узорке који се чувају дуже време (до 6 месеци) треба замрзнути само једном на -20 °C пре анализе.
Избегавајте поновљене циклусе замрзавања и одмрзавања.
ПРОТОКОЛ
【Припрема реагенса】
1. Све реагенсе треба извадити из фрижидера и оставити да достигну собну температуру пре употребе.
(20° до 25°C). Све реагенсе одмах након употребе чувати у фрижидеру.
2. Све узорке и контроле треба промућкати пре употребе.
3. Припрема раствора hACE2-HRP: Разблажити концентрат hACE2-HRP у односу 1:51 са раствором за разблаживање
Пуфер. На пример, разблажите 100 μL hACE2-HRP концентрата са 5,0 mL HRP пуфера за разблаживање да бисте
Направите хАЦЕ2-ХРП раствор.
4. Припрема 1× раствора за прање: Разблажите 20× раствор за прање дејонизованом или дестилованом водом са
запремински однос 1:19. На пример, разблажите 20 мл раствора за прање 20× са 380 мл дејонизованог или
дестилована вода да би се направило 400 мл 1× раствора за прање.
【Поступак испитивања】
1. У одвојеним епруветама, разделите по 120 μL припремљеног hACE2-HRP раствора.
2. Додати 6 μL калибратора, непознатих узорака, контрола квалитета у сваку епрувету и добро промешати.
3. Пребаците 100 μL сваке смеше припремљене у кораку 2 у одговарајуће јажице микроплоче према
на унапред дизајнирану конфигурацију теста.
3. Покријте плочу заптивачем за плоче и инкубирајте на 37°C током 30 минута.
4. Уклоните заптивач плоче и оперите плочу са приближно 300 μL 1× раствора за прање по бунарићу четири пута.
5. Куцните плочу о папирни убрус да бисте уклонили преосталу течност у бунарићима након прања.
6. Додати 100 μL TMB раствора у сваки бунарчић и инкубирати плочу у мраку на 20 - 25°C током 20 минута.
7. Додајте 50 μL раствора за стоп реакцију у сваки отвор да бисте зауставили реакцију.
8. Очитајте апсорбанцију у читачу микроплоча на 450 nm у року од 10 минута (630 nm је додатна опрема).
препоручује се за веће прецизне перформансе).