టెస్ట్సీలాబ్స్ SARS-CoV-2 న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ డిటెక్షన్ కిట్ (ELISA)
చిన్న వివరణ:
SARS-CoV-2 న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ టెస్ట్ క్యాసెట్ అనేది వేగవంతమైన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ఇమ్యునోఅస్సే. ఈ పరీక్ష కరోనావైరస్ వ్యాధి 2019కి వ్యతిరేకంగా తటస్థీకరించే ప్రతిరోధకాలను గుణాత్మకంగా గుర్తించడం కోసం రూపొందించబడింది. దీనిని మానవ మొత్తం రక్తం, సీరం లేదా ప్లాస్మా నమూనాలతో ఉపయోగించవచ్చు. మానవ యాంటీ-నోవెల్ కరోనావైరస్ న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ టైటర్ల స్థాయిలను అంచనా వేయడంలో ఈ పరీక్ష సహాయంగా పనిచేస్తుంది.
 వేగవంతమైన ఫలితాలు: నిమిషాల్లో ప్రయోగశాల-ఖచ్చితత్వం | ల్యాబ్-గ్రేడ్ ఖచ్చితత్వం: నమ్మదగినది & నమ్మదగినది |
| ఎక్కడైనా పరీక్షించండి: ల్యాబ్ సందర్శన అవసరం లేదు | సర్టిఫైడ్ నాణ్యత: 13485, CE, Mdsap కంప్లైంట్ |
| సరళమైనది & క్రమబద్ధీకరించబడింది: ఉపయోగించడానికి సులభం, ఇబ్బంది లేదు | అత్యున్నత సౌలభ్యం: ఇంట్లోనే సౌకర్యవంతంగా పరీక్షించుకోండి |
【సూత్రం】
SARS-CoV-2 న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ డిటెక్షన్ కిట్ పోటీ ELISA పద్దతిపై ఆధారపడి ఉంటుంది.
వైరల్ స్పైక్ (S) ప్రోటీన్ మరియు హోస్ట్ సెల్ నుండి ప్రోటీన్, ప్యూరిఫైడ్ రిసెప్టర్ బైండింగ్ డొమైన్ (RBD) ఉపయోగించి
గ్రాహక ACE2, ఈ పరీక్ష వైరస్-హోస్ట్ తటస్థీకరణ పరస్పర చర్యను అనుకరించడానికి రూపొందించబడింది.
కాలిబ్రేటర్లు, నాణ్యత నియంత్రణలు మరియు సీరం లేదా ప్లాస్మా నమూనాలను ఒక్కొక్కటిగా విలీనీకరణలో బాగా కలుపుతారు.
చిన్న గొట్టాలలో hACE2-HRP కంజుగేట్ కలిగిన బఫర్. తరువాత మిశ్రమాలను బదిలీ చేస్తారు.
స్థిరీకరించిన పునఃసంయోగ SARS-CoV-2 RBD భాగం (RBD) కలిగిన మైక్రోప్లేట్ బావులు
30 నిమిషాల ఇంక్యుబేషన్ సమయంలో, కాలిబ్రేటర్లలోని RBD నిర్దిష్ట యాంటీబాడీ, QC మరియు
బావులలో స్థిరీకరించబడిన RBD ని నిర్దిష్ట బైండింగ్ కోసం నమూనాలు hACE2-HRP తో పోటీపడతాయి. తరువాత
పొదిగే సమయంలో, అన్బౌండ్ hACE2-HRP కంజుగేట్ను తొలగించడానికి బావులను 4 సార్లు కడుగుతారు.
తరువాత TMB ని జోడించి గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 20 నిమిషాలు పొదిగిస్తారు, ఫలితంగా a అభివృద్ధి చెందుతుంది
నీలం రంగు. 1N HCl కలపడంతో రంగు అభివృద్ధి ఆగిపోతుంది మరియు శోషణ
స్పెక్ట్రోఫోటోమెట్రిక్గా 450 nm వద్ద కొలుస్తారు. ఏర్పడిన రంగు యొక్క తీవ్రత అనులోమానుపాతంలో ఉంటుంది
ఉన్న ఎంజైమ్ మొత్తం, మరియు అదే విధంగా పరీక్షించబడిన ప్రమాణాల మొత్తానికి విలోమ సంబంధం కలిగి ఉంటుంది.
అందించిన కాలిబ్రేటర్ల ద్వారా ఏర్పడిన అమరిక వక్రరేఖతో పోల్చడం ద్వారా, గాఢత
తెలియని నమూనాలోని తటస్థీకరించే ప్రతిరోధకాలను అప్పుడు లెక్కించబడుతుంది.
【అవసరమైన సామాగ్రి కానీ అందించబడలేదు】
1. స్వేదన లేదా డీయోనైజ్డ్ నీరు
2. ప్రెసిషన్ పైపెట్లు: 10μL, 100μL, 200μL మరియు 1 mL
3. డిస్పోజబుల్ పైపెట్ చిట్కాలు
4. 450nm వద్ద శోషణను చదవగల మైక్రోప్లేట్ రీడర్.
5. శోషక కాగితం
6. గ్రాఫ్ పేపర్
7. వోర్టెక్స్ మిక్సర్ లేదా తత్సమానం
【నమూనా సేకరణ మరియు నిల్వ】
1. K2-EDTA ఉన్న ట్యూబ్లలో సేకరించిన సీరం మరియు ప్లాస్మా నమూనాలను ఈ కిట్ కోసం ఉపయోగించవచ్చు.
2. నమూనాలను మూతతో కప్పాలి మరియు పరీక్షించే ముందు 2 °C - 8 °C వద్ద 48 గంటల వరకు నిల్వ చేయవచ్చు.
ఎక్కువ కాలం (6 నెలల వరకు) ఉంచిన నమూనాలను పరీక్షకు ముందు -20 °C వద్ద ఒకసారి మాత్రమే స్తంభింపజేయాలి.
పదే పదే ఫ్రీజ్-థా సైకిల్స్ను నివారించండి.
ప్రోటోకాల్
【రియాజెంట్ తయారీ】
1. అన్ని కారకాలను శీతలీకరణ నుండి బయటకు తీసి, ఉపయోగించే ముందు గది ఉష్ణోగ్రతకు తిరిగి రావడానికి అనుమతించాలి.
(20° నుండి 25°C) ఉపయోగించిన వెంటనే అన్ని రియాజెంట్లను రిఫ్రిజిరేటర్లో భద్రపరచండి.
2. అన్ని నమూనాలు మరియు నియంత్రణలను ఉపయోగించే ముందు వోర్టెక్స్ చేయాలి.
3. hACE2-HRP సొల్యూషన్ తయారీ: 1: 51 డైల్యూషన్ నిష్పత్తిలో డైల్యూషన్తో hACE2-HRP గాఢతను పలుచన చేయండి.
బఫర్. ఉదాహరణకు, 100 μL hACE2-HRP గాఢతను 5.0mL HRP డైల్యూషన్ బఫర్తో కరిగించండి
hACE2-HRP ద్రావణాన్ని తయారు చేయండి.
4. 1× వాష్ సొల్యూషన్ తయారీ: 20× వాష్ సొల్యూషన్ను డీయోనైజ్డ్ లేదా డిస్టిల్డ్ వాటర్తో కరిగించండి a తో
వాల్యూమ్ నిష్పత్తి 1:19. ఉదాహరణకు, 20 మి.లీ. 20× వాష్ సొల్యూషన్ను 380 మి.లీ. డీయోనైజ్డ్ లేదా
1× వాష్ సొల్యూషన్లో 400 mL తయారు చేయడానికి స్వేదనజలం.
【పరీక్షా విధానం】
1. ప్రత్యేక గొట్టాలలో, తయారుచేసిన hACE2-HRP ద్రావణంలో దాదాపు 120μL కలపండి.
2. ప్రతి ట్యూబ్లో 6 μL కాలిబ్రేటర్లు, తెలియని నమూనాలు, నాణ్యత నియంత్రణలను వేసి బాగా కలపండి.
3. దశ 2 లో తయారుచేసిన ప్రతి మిశ్రమంలో 100μL ను సంబంధిత మైక్రోప్లేట్ బావులలోకి బదిలీ చేయండి
ముందుగా రూపొందించిన పరీక్ష కాన్ఫిగరేషన్కు.
3. ప్లేట్ సీలర్ తో ప్లేట్ ను కప్పి, 37°C వద్ద 30 నిమిషాలు పొదిగించండి.
4. ప్లేట్ సీలర్ను తీసివేసి, ప్లేట్ను ప్రతి బావికి సుమారు 300 μL 1× వాష్ సొల్యూషన్తో నాలుగు సార్లు కడగాలి.
5. దశలను కడిగిన తర్వాత బావులలోని అవశేష ద్రవాన్ని తొలగించడానికి ప్లేట్ను కాగితపు టవల్పై తట్టండి.
6. ప్రతి బావికి 100 μL TMB ద్రావణాన్ని వేసి, ప్లేట్ను 20 - 25°C వద్ద చీకటి ప్రదేశంలో 20 నిమిషాలు పొదిగించండి.
7. ప్రతిచర్యను ఆపడానికి ప్రతి బావికి 50 μL స్టాప్ సొల్యూషన్ జోడించండి.
8. 450 nm వద్ద మైక్రోప్లేట్ రీడర్లో శోషణను 10 నిమిషాల్లోపు చదవండి (630nm అనుబంధంగా ఉంటుంది)
అధిక ఖచ్చితత్వ పనితీరుకు సిఫార్సు చేయబడింది).