SARS-2-2 безараргардонии дӯхтаи антиджекистон (Elisa)
【Асос】
SARS-2-2 безараргардонии маҷмӯаи нимтоистие, ки ба воситаи методологияи рақобатпазирии Elisa асос ёфтааст.
Истифодаи домени ҳатмии рисораҳои пӯшонидашуда (RBD), протеин аз тахтаи вирусии сафеда ва ҳуҷайраи мизбон
Ресептор Ace2, ин санҷиш барои тақвият додани номи вирус, бепарвоӣ тарҳрезӣ шудааст.
Калибраторҳо, назорати сифат ва намунаҳои хуноба ё плазма дар алоҳидагӣ дар ҳолати хуб омехта карда мешаванд
Буфер дорои hace2-HRP conjugate дар қубурҳои хурд. Он гоҳ омехтаҳо интиқол дода мешаванд
Чоҳҳои микроэлементҳо, ки дорои пораҳои пурқувват-2 RBD-и RBD (RBD) мебошанд, ки барои
исоб. Дар давраи исоботи 30-дақиқаӣ, антиуси мушаххаси RBD дар калибаторҳо, QC ва
Намунаҳо бо hace2-hr барои безарар кардани RBD, ки дар чоҳҳо пайваст шудаанд, рақобат хоҳанд кард. Аз щафо
Масъулият, чоҳҳо 4 маротиба шуста мешаванд, то UNBONGED-HRE Conjugate UnBOND-HRP-ро тоза кунанд. Як ҳалли
TMB пас аз 20 дақиқа дар ҳарорати хонагӣ илова ва инкубатсия карда мешавад, дар ҳарорати хонагӣ, ки дар натиҷа ба инкишофи а
ранги кабуд. Рушди ранг бо илова кардани 1N HCL қатъ карда мешавад ва абадӣ аст
Spectroproproprotometometometricallicallicallically дар 450-0. Шиддатнокии ранги ташаккулёфта ба он мутаносиб аст
Миқдори фермент ҳузур дорад ва ғайримуқаррарӣ ба андозаи стандартҳо низ ҳамин тавр карда мешавад.
Тавассути муқоиса бо хати калибрченкунӣ, ки аз ҷониби калибраторҳои пешниҳодшуда иборат аст, консентратсияи
Бецибокҳо дар интихоби номаълум, пас ҳисоб карда мешаванд.
【Маводи зарурӣ, аммо пешниҳод карда намешавад】
1. Оби тарроҳишаванда ё тарбияшуда
2. Пипетаҳои дақиқ: 10μL, 100μL, 200μL ва 1 мл
3. Маслиҳатҳои pipette
4. Хонандаи микроэлементҳо қодир аст, ки азхудкунии азхудкунии хондани 45050N.
5. Ҳуҷҷати ҷаббанда
6. Коғази графикӣ
7. Vortex Micker ё эквивалент
【Ҷамъоварӣ ва нигоҳдории намуна】
1. Хусусиятҳои хуноба ва плазма дар қубурҳо, ки K2-EDTA мавҷуданд, барои ин маҷмӯа истифода мешаванд.
2. Намунаҳо бояд қодир бошанд ва метавонанд барои то 48 соат дар 2 ° C - 8 ° C қабл аз супурдани.
Намунаҳо барои вақти дарозтари вақт гузаронида мешаванд (то 6 моҳ) бояд танҳо дар -20 ° C қабл аз Desay гузаронида шаванд.
Канорагирӣ аз давраҳои такрорӣ.
Протокол
【Режинг】
1. Ҳама режентҳо бояд аз яхдон гирифта шаванд ва ба ҳарорати хонагӣ пеш аз истифода баргарданд
(20 ° то 25 ° C). Ҳама аслиҳаҳоро дар яхдон фавран пас аз истифода захира кунед.
2 бошад. Ҳама намунаҳо ва назорат бояд қабл аз истифода оташфишаванда шаванд.
3
Буфер. Масалан, dilut 100 мкл аз hacte2-hrp-hrp-hrprate бо 5.0ml аз буфери DRP Buffer
ҳалли hacher2-HRP.
4
Таносуби ҳаҷми 1:19. Масалан, dilute 20 мл аз роҳи 20 × ҳалли улро бо 380 мл тафсон ё
Оби дурдаст барои 400 мл роҳи ҳалли бишӯрии худро ташкил медиҳад.
【Тартиби санҷиш】
1. Дар қубурҳои алоҳида, alquot 120μl аз ҳалли hacher-hrp-hrp-hrp.
2 бошад. Ангузар 6 маккаи калибраторҳо, намунаҳои номаълум, назорати сифат дар ҳар як қубур илова кунед ва хуб омехта кунед.
3. Интиқоли ҳар як омехта дар қадами 2 ба чоҳҳои микроэлементҳои мувофиқ омода карда шудааст
ба конфигуратсияи озмоишии пешакӣ.
3. Плита бо мӯҳри плаза ва дар 37 ° C дар тӯли 30 дақиқа дар 37 ° C incubate пӯшед.
4. Матрати табақро тоза кунед ва ба табақе бо тақрибан 300 микл аз 1 × Ҳалли 1 × Union Soffuler Offor- Informe.
5. Ба дастмоле дар дастмоле коғазӣ клик кунед, то моеъи боқимонда дар чоҳҳо пас аз шустани қадамҳо.
6. Иловаи 100 μли TMB ҳалли TMB-ро ба ҳар як хуб ва дар торикӣ дар торикӣ дар синни 20 - 25 ° C барои 20 дақиқа ворид кунед.
7. Дар ҳалли ҳар як хуб 50 мкл ҳалли қатъро илова кунед, то аксуламалро боздорад.
8. Хондани азхудкунии хонандаи микроэлементҳо дар 450 NM дар давоми 10 дақиқа (630NM ҳамчун лавозимот)
барои иҷрои дақиқаи баландтар тавсия дода мешавад).