Kit de détection d'anticorps neutralisants SARS-CoV-2 (ELISA) Testsealabs
Brève description :
La cassette de test d'anticorps neutralisants anti-SARS-CoV-2 est un immuno-essai chromatographique rapide. Ce test est conçu pour la détection qualitative des anticorps neutralisants contre le coronavirus 2019. Il peut être utilisé sur des échantillons de sang total, de sérum ou de plasma humains. Il permet d'évaluer les titres d'anticorps neutralisants anti-nouveau coronavirus humains.
 Résultats rapides : précision de laboratoire en quelques minutes | Précision de qualité laboratoire : fiable et digne de confiance |
| Testez n'importe où : aucune visite en laboratoire requise | Qualité certifiée : 13485, CE, conforme Mdsap |
| Simple et rationalisé : facile à utiliser, sans tracas | Confort ultime : testez confortablement à la maison |
【PRINCIPE】
Le kit de détection d'anticorps neutralisants SARS-CoV-2 est basé sur une méthodologie ELISA compétitive.
En utilisant le domaine de liaison au récepteur purifié (RBD), la protéine de la protéine de pointe virale (S) et la cellule hôte
récepteur ACE2, ce test est conçu pour imiter l'interaction neutralisante virus-hôte.
Les calibrateurs, les contrôles de qualité et les échantillons de sérum ou de plasma sont bien mélangés individuellement en dilution
tampon contenant le conjugué hACE2-HRP, réparti en aliquotes dans de petits tubes. Les mélanges sont ensuite transférés dans
les puits de la microplaque contenant le fragment RBD recombinant immobilisé du SARS-CoV-2 (RBD) pour
incubation. Pendant l'incubation de 30 minutes, l'anticorps spécifique RBD dans les calibrateurs, le CQ et
Les échantillons entreront en compétition avec l'hACE2-HRP pour la liaison spécifique du RBD immobilisé dans les puits.
Après l'incubation, les puits sont lavés 4 fois pour éliminer le conjugué hACE2-HRP non lié. Une solution de
Le TMB est ensuite ajouté et incubé pendant 20 minutes à température ambiante, ce qui entraîne le développement d'un
couleur bleue. Le développement de la couleur est stoppé par l'ajout de HCl 1N, et l'absorbance est
mesurée par spectrophotométrie à 450 nm. L'intensité de la couleur formée est proportionnelle à la
quantité d'enzyme présente et est inversement proportionnelle à la quantité de standards dosés de la même manière.
Par comparaison avec la courbe d'étalonnage formée par les calibrateurs fournis, la concentration de
Les anticorps neutralisants dans l'échantillon inconnu sont ensuite calculés.
【MATÉRIAUX REQUIS MAIS NON FOURNIS】
1. Eau distillée ou déionisée
2. Pipettes de précision : 10 μL, 100 μL, 200 μL et 1 mL
3. Embouts de pipette jetables
4. Lecteur de microplaques capable de lire l'absorbance à 450 nm.
5. Papier absorbant
6. Papier millimétré
7. Mélangeur vortex ou équivalent
【COLLECTE ET STOCKAGE DES SPÉCIMEN】
1. Des échantillons de sérum et de plasma prélevés dans des tubes contenant du K2-EDTA peuvent être utilisés pour ce kit.
2. Les échantillons doivent être bouchés et peuvent être conservés jusqu'à 48 heures à une température comprise entre 2 °C et 8 °C avant le dosage.
Les échantillons conservés pendant une période plus longue (jusqu'à 6 mois) doivent être congelés une seule fois à -20 °C avant le dosage.
Évitez les cycles répétés de gel-dégel.
PROTOCOLE
【Préparation des réactifs】
1. Tous les réactifs doivent être sortis du réfrigérateur et laissés revenir à température ambiante avant utilisation.
(20° à 25°C). Conserver tous les réactifs au réfrigérateur immédiatement après utilisation.
2. Tous les échantillons et contrôles doivent être vortexés avant utilisation.
3. Préparation de la solution hACE2-HRP : Diluer le concentré hACE2-HRP à un rapport de dilution de 1: 51 avec la dilution
Tampon. Par exemple, diluez 100 μL de concentré hACE2-HRP avec 5,0 mL de tampon de dilution HRP pour
créer une solution hACE2-HRP.
4. Préparation de la solution de lavage 1× : diluez la solution de lavage 20× avec de l'eau déionisée ou distillée avec un
rapport volumique de 1:19. Par exemple, diluez 20 ml de solution de lavage 20× avec 380 ml d'eau déionisée ou
eau distillée pour préparer 400 ml de solution de lavage 1×.
【Procédure de test】
1. Dans des tubes séparés, aliquotez 120 μL de la solution hACE2-HRP préparée.
2. Ajouter 6 μL d'étalons, d'échantillons inconnus, de contrôles de qualité dans chaque tube et bien mélanger.
3. Transférer 100 μL de chaque mélange préparé à l'étape 2 dans les puits de microplaques correspondants selon
à la configuration de test prédéfinie.
3. Couvrir la plaque avec Plate Sealer et incuber à 37 °C pendant 30 minutes.
4. Retirez le scellant de plaque et lavez la plaque avec environ 300 μL de solution de lavage 1× par puits quatre fois.
5. Tapotez la plaque sur du papier absorbant pour éliminer le liquide résiduel dans les puits après les étapes de lavage.
6. Ajoutez 100 μL de solution TMB dans chaque puits et incubez la plaque dans l'obscurité à 20 - 25 °C pendant 20 minutes.
7. Ajoutez 50 μL de solution d’arrêt dans chaque puits pour arrêter la réaction.
8. Lisez l'absorbance dans un lecteur de microplaques à 450 nm dans les 10 minutes (630 nm comme accessoire est
recommandé pour des performances de plus grande précision).