ชุดตรวจหาแอนติบอดีต่อต้าน SARS-CoV-2 ของ Testsealabs (ELISA)
คำอธิบายสั้น ๆ :
ชุดทดสอบ SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Test Cassette เป็นชุดทดสอบภูมิคุ้มกันแบบโครมาโทกราฟีแบบรวดเร็ว ชุดทดสอบนี้ออกแบบมาเพื่อตรวจหาแอนติบอดีที่มีฤทธิ์เป็นกลางต่อโรคโคโรนาไวรัส 2019 ในเชิงคุณภาพ สามารถใช้ได้กับตัวอย่างเลือด ซีรัม หรือพลาสมาของมนุษย์ ชุดทดสอบนี้ช่วยประเมินระดับไทเทอร์ของแอนติบอดีที่มีฤทธิ์เป็นกลางต่อเชื้อไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ในมนุษย์
 ผลลัพธ์ที่รวดเร็ว: แม่นยำระดับห้องแล็ปภายในไม่กี่นาที | ความแม่นยำระดับห้องปฏิบัติการ: เชื่อถือได้และไว้วางใจได้ |
| ทดสอบได้ทุกที่: ไม่จำเป็นต้องไปห้องแล็ป | คุณภาพที่ได้รับการรับรอง: 13485, CE, Mdsap Compliant |
| เรียบง่ายและคล่องตัว: ใช้งานง่าย ไม่ยุ่งยาก | ความสะดวกสบายสูงสุด: ทดสอบอย่างสะดวกสบายที่บ้าน |
-หลักการ-
ชุดตรวจหาแอนติบอดีที่เป็นกลาง SARS-CoV-2 ใช้หลักการ ELISA ที่มีการแข่งขันสูง
การใช้โดเมนการจับตัวรับที่บริสุทธิ์ (RBD) โปรตีนจากโปรตีนสไปก์ของไวรัส (S) และเซลล์โฮสต์
ตัวรับ ACE2 การทดสอบนี้ได้รับการออกแบบมาเพื่อเลียนแบบการโต้ตอบระหว่างไวรัสกับโฮสต์ที่ทำให้เป็นกลาง
เครื่องสอบเทียบ การควบคุมคุณภาพ และตัวอย่างซีรั่มหรือพลาสมาจะถูกผสมให้เข้ากันอย่างละอย่างในการเจือจาง
บัฟเฟอร์ที่มีคอนจูเกต hACE2-HRP แบ่งส่วนในหลอดขนาดเล็ก จากนั้นจึงถ่ายโอนส่วนผสมใน
หลุมไมโครเพลทที่มีชิ้นส่วน RBD ของ SARS-CoV-2 รีคอมบิแนนท์ที่เคลื่อนที่ไม่ได้ (RBD) สำหรับ
การฟักตัว ในระหว่างการฟักตัว 30 นาที แอนติบอดีจำเพาะ RBD ในเครื่องสอบเทียบ QC และ
ตัวอย่างจะแข่งขันกับ hACE2-HRP เพื่อจับกับ RBD ที่ถูกตรึงในหลุมอย่างเฉพาะเจาะจง หลังจาก
ในระหว่างการบ่มเพาะ ให้ล้างหลุม 4 ครั้งเพื่อกำจัดคอนจูเกต hACE2-HRP ที่ไม่จับตัวกันออก สารละลาย
จากนั้นเติม TMB ลงไปและฟักเป็นเวลา 20 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ส่งผลให้เกิดการพัฒนา
สีน้ำเงิน การพัฒนาสีจะหยุดลงด้วยการเติม 1N HCl และการดูดกลืนแสงคือ
วัดด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริกที่ 450 นาโนเมตร ความเข้มของสีที่เกิดขึ้นจะแปรผันตาม
ปริมาณเอนไซม์ที่มีอยู่ และมีความสัมพันธ์ผกผันกับปริมาณมาตรฐานที่ทดสอบในลักษณะเดียวกัน
เมื่อเปรียบเทียบกับเส้นโค้งการสอบเทียบที่สร้างขึ้นโดยเครื่องสอบเทียบที่ให้มา ความเข้มข้นของ
จากนั้นจะคำนวณแอนติบอดีที่เป็นกลางในตัวอย่างที่ไม่รู้จัก
-วัสดุที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้-
1. น้ำกลั่นหรือน้ำดีไอออนไนซ์
2. ปิเปตความแม่นยำ: 10μL, 100μL, 200μL และ 1 mL
3. หัวหยดแบบใช้แล้วทิ้ง
4. เครื่องอ่านไมโครเพลตที่สามารถอ่านค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตร
5. กระดาษซับน้ำ
6. กระดาษกราฟ
7. เครื่องผสมแบบวอร์เท็กซ์หรือเทียบเท่า
-การเก็บและเก็บรักษาตัวอย่าง-
1. ตัวอย่างซีรั่มและพลาสมาที่เก็บรวบรวมในหลอดที่มี K2-EDTA สามารถนำมาใช้สำหรับชุดทดสอบนี้ได้
2. ควรปิดฝาตัวอย่างและสามารถเก็บไว้ได้นานถึง 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 2-8 องศาเซลเซียสก่อนการทดสอบ
ตัวอย่างที่เก็บไว้เป็นเวลานานกว่า (สูงสุด 6 เดือน) ควรแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20 °C เพียงครั้งเดียวก่อนทำการทดสอบ
หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ
โปรโตคอล
-การเตรียมสารเคมี-
1. สารเคมีทั้งหมดต้องนำออกจากตู้เย็นและปล่อยให้กลับมาที่อุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน
(20° ถึง 25°C) เก็บสารเคมีทั้งหมดไว้ในตู้เย็นทันทีหลังใช้งาน
2. ควรทำการวอร์เท็กซ์ตัวอย่างและตัวควบคุมทั้งหมดก่อนใช้งาน
3. การเตรียมสารละลาย hACE2-HRP: เจือจางสารเข้มข้น hACE2-HRP ในอัตราส่วนเจือจาง 1:51 ด้วยการเจือจาง
บัฟเฟอร์ ตัวอย่างเช่น เจือจางสารละลายเข้มข้น hACE2-HRP 100 μL ด้วยบัฟเฟอร์เจือจาง HRP 5.0 มล.
สร้างโซลูชัน hACE2-HRP
4. การเตรียมสารละลายล้าง 1×: เจือจางสารละลายล้าง 20× ด้วยน้ำดีไอออนไนซ์หรือน้ำกลั่นด้วย
อัตราส่วนปริมาตร 1:19 ตัวอย่างเช่น เจือจางสารละลาย 20× Wash 20 มล. ด้วยสารละลายดีไอออนไนซ์ 380 มล. หรือ
น้ำกลั่นเพื่อทำสารละลาย 1× Wash ปริมาตร 400 มล.
-ขั้นตอนการทดสอบ-
1. ในหลอดแยกกัน ให้แบ่งสารละลาย hACE2-HRP ที่เตรียมไว้ 120μL ออกเป็นสองส่วน
2. เติมสารสอบเทียบ 6 μL ตัวอย่างที่ไม่ทราบค่า และตัวควบคุมคุณภาพลงในแต่ละหลอด แล้วผสมให้เข้ากัน
3. ถ่ายโอน 100μL ของแต่ละส่วนผสมที่เตรียมไว้ในขั้นตอนที่ 2 ลงในหลุมไมโครเพลตที่สอดคล้องกันตาม
เพื่อการกำหนดค่าการทดสอบที่ออกแบบไว้ล่วงหน้า
3. ปิดจานด้วย Plate Sealer และฟักที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 30 นาที
4. ถอด Plate Sealer ออกและล้างแผ่นด้วย 1× Wash Solution ประมาณ 300 μL ต่อหลุมเป็นเวลา 4 ครั้ง
5. เคาะจานบนกระดาษเช็ดมือเพื่อเอาของเหลวที่เหลือออกจากหลุมหลังจากขั้นตอนการล้าง
6. เติมสารละลาย TMB 100 μL ลงในแต่ละหลุม และฟักแผ่นในที่มืดที่อุณหภูมิ 20 - 25°C เป็นเวลา 20 นาที
7. เติม Stop Solution 50 μL ลงในแต่ละหลุมเพื่อหยุดปฏิกิริยา
8. อ่านค่าการดูดกลืนแสงในเครื่องอ่านไมโครเพลทที่ 450 นาโนเมตรภายใน 10 นาที (630 นาโนเมตรเป็นอุปกรณ์เสริม)
แนะนำสำหรับประสิทธิภาพความแม่นยำสูงกว่า)