SARS-COV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit （ELISA)
【Inilaan na paggamit】
Ang SARS-COV-2 na neutralisado na antibody detection kit ay isang mapagkumpitensya na naka-link na immunosorbent assay (ELISA) na inilaan para sa husay at semi-quantitative detection ng kabuuang neutralizing antibodies sa SARS-Cov-2 sa serum ng tao at plasma. Ang SARS-COV-2 neutralizing antibody detection kit ay maaaring magamit bilang isang tulong sa pagkilala sa mga indibidwal na may adaptive na immune response sa SARS-COV-2, na nagpapahiwatig ng kamakailan o naunang impeksyon. Ang SARS-CoV-2 neutralizing antibody detection kit ay hindi dapat gamitin upang masuri ang talamak na impeksyon sa SARS-CoV-2.
【Panimula】
Ang mga impeksyon sa Coronavirus ay karaniwang nagpapahiwatig ng pag -neutralize ng mga tugon ng antibody. Ang mga rate ng seroconversion sa mga pasyente ng CovID-19 ay 50% at 100% sa araw na 7 at 14 na post na sintomas ng pagsisimula, ayon sa pagkakabanggit. Upang ipakita ang kaalaman, ang kaukulang virus na neutralisahin ang antibody sa dugo ay kinikilala bilang isang target para sa pagtukoy ng pagiging epektibo ng antibody at mas mataas na konsentrasyon ng neutralizing antibody ay nagpapahiwatig ng mas mataas na pagiging epektibo sa proteksyon. Ang Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) ay kinikilala bilang ang pamantayang ginto para sa pagtuklas ng neutralizing antibodies. Gayunpaman, dahil sa mababang throughput at mas mataas na kinakailangan para sa operasyon, ang PRNT ay hindi praktikal para sa malaking scale serodiagnosis at pagsusuri sa bakuna. Ang SARS-CoV-2 neutralizing antibody detection kit ay batay sa mapagkumpitensyang pamamaraan na naka-link na immunosorbent assay (ELISA), na maaaring makita ang neutralizing antibody sa sample ng dugo pati na rin ang espesyal na pag-access sa mga antas ng konsentrasyon ng ganitong uri ng antibody.
【Pamamaraan sa Pagsubok】
1. Sa hiwalay na mga tubo, aliquot 120μl ng handa na solusyon ng HACE2-HRP.
2.Add 6 μl ng mga calibrator, hindi kilalang mga sample, mga kontrol sa kalidad sa bawat tubo at ihalo nang mabuti.
3.Transfer 100μl ng bawat halo na inihanda sa Hakbang 2 sa kaukulang mga balon ng mikropono ayon sa paunang pagsasaayos ng pagsubok.
3.Pagtapos ang plato na may plate sealer at incubate sa 37 ° C sa loob ng 60 minuto.
4.Basahin ang plate sealer at hugasan ang plato na may tinatayang 300 μl ng 1 × hugasan na solusyon bawat maayos sa loob ng apat na beses.
5.Tap ang plato sa tuwalya ng papel upang alisin ang natitirang likido sa mga balon pagkatapos ng mga hakbang sa paghuhugas.
6.Add 100 μl ng solusyon ng TMB sa bawat balon at mapupuksa ang plato sa madilim sa 20 - 25 ° C sa loob ng 20 minuto.
7.Add 50 μl ng paghinto ng solusyon sa bawat balon upang ihinto ang reaksyon.
8. Iread ang pagsipsip sa microplate reader sa 450 nm sa loob ng 10 minuto (630nm bilang inirerekomenda ang accessory para sa mas mataas na pagganap ng katumpakan.
