Testsealabs SARS-CoV-2 Nötralize Edici Antikor Tespit Kiti (ELISA)
Kısa Açıklama:
SARS-CoV-2 Nötralize Edici Antikor Test Kaseti, hızlı bir kromatografik immünolojik testtir. Bu test, Koronavirüs Hastalığı 2019'a karşı nötralize edici antikorların kalitatif tespiti için tasarlanmıştır. İnsan tam kanı, serumu veya plazma örnekleriyle kullanılabilir. Test, insan anti-yeni koronavirüs nötralize edici antikor titrelerinin değerlendirilmesinde yardımcı bir araçtır.
 Hızlı Sonuçlar: Dakikalar İçinde Laboratuvar Doğruluğunda | Laboratuvar Sınıfı Hassasiyet: Güvenilir ve Sadık |
| Her Yerde Test: Laboratuvar Ziyareti Gerekmez | Sertifikalı Kalite: 13485, CE, Mdsap Uyumlu |
| Basit ve Modern: Kullanımı Kolay, Sıfır Sorun | Üstün Kolaylık: Evde Rahatça Test Edin |
【PRENSİP】
SARS-CoV-2 Nötralize Edici Antikor Tespit Kiti, rekabetçi ELISA metodolojisine dayanmaktadır.
Saflaştırılmış reseptör bağlanma alanı (RBD), viral sivri uç (S) proteininden ve konak hücresinden protein kullanılarak
ACE2 reseptörü, bu test virüs-konak nötralize edici etkileşimi taklit edecek şekilde tasarlanmıştır.
Kalibratörler, Kalite Kontrolleri ve serum veya plazma örnekleri ayrı ayrı seyreltmede iyice karıştırılır
hACE2-HRP konjugatını içeren tampon küçük tüplere aktarılır. Daha sonra karışımlar
immobilize rekombinant SARS-CoV-2 RBD fragmanı (RBD) içeren mikro plaka kuyuları
inkübasyon. 30 dakikalık inkübasyon sırasında, kalibratörlerdeki, QC'deki ve
örnekler, kuyularda immobilize edilen RBD'ye spesifik bağlanma için hACE2-HRP ile rekabet edecektir.
İnkübasyondan sonra, bağlanmamış hACE2-HRP konjugatını uzaklaştırmak için kuyular 4 kez yıkanır.
Daha sonra TMB eklenir ve oda sıcaklığında 20 dakika inkübe edilir, bunun sonucunda bir
mavi renk. Renk gelişimi 1N HCl ilavesiyle durdurulur ve absorbans
450 nm'de spektrofotometrik olarak ölçüldü. Oluşan rengin yoğunluğu,
Mevcut enzim miktarı ile aynı şekilde test edilen standart miktarı arasında ters orantı vardır.
Sağlanan kalibratörler tarafından oluşturulan kalibrasyon eğrisi ile karşılaştırma yoluyla, konsantrasyon
Daha sonra bilinmeyen numunedeki nötralize edici antikorlar hesaplanır.
【GEREKLİ AMA SAĞLANMAYAN MALZEMELER】
1. Damıtılmış veya deiyonize su
2. Hassas pipetler: 10μL, 100μL, 200μL ve 1 mL
3. Tek kullanımlık pipet uçları
4. 450 nm'de absorbansı okuyabilen mikro plaka okuyucu.
5. Emici kağıt
6. Grafik kağıdı
7. Vorteks karıştırıcı veya eşdeğeri
【ÖRNEK TOPLAMA VE SAKLAMA】
1. Bu kit için K2-EDTA içeren tüplere toplanan serum ve plazma örnekleri kullanılabilir.
2. Numuneler kapatılmalı ve analizden önce 2 °C - 8 °C'de 48 saate kadar saklanabilir.
Daha uzun süre (6 aya kadar) saklanacak numuneler, analizden önce yalnızca bir kez -20 °C'de dondurulmalıdır.
Tekrarlanan dondurma-çözme döngülerinden kaçının.
PROTOKOL
【Reaktif Hazırlama】
1. Tüm reaktifler kullanımdan önce buzdolabından çıkarılmalı ve oda sıcaklığına getirilmelidir.
(20° ila 25°C). Tüm reaktifleri kullanımdan hemen sonra buzdolabında saklayın.
2. Tüm numuneler ve kontroller kullanılmadan önce vortekslenmelidir.
3. hACE2-HRP Çözeltisi Hazırlama: hACE2-HRP konsantresini Seyreltme ile 1: 51 seyreltme oranında seyreltin
Tampon. Örneğin, 100 μL hACE2-HRP konsantresini 5,0 mL HRP Seyreltme Tamponu ile seyreltin.
hACE2-HRP solüsyonu hazırlayın.
4. 1× Yıkama Çözeltisi Hazırlama: 20× Yıkama Çözeltisini deiyonize veya damıtılmış suyla seyreltin.
1:19 hacim oranı. Örneğin, 20 mL 20× Yıkama Çözeltisini 380 mL deiyonize veya
400 mL 1× Yıkama Çözeltisi hazırlamak için damıtılmış su.
【Test Prosedürü】
1. Hazırlanan hACE2-HRP Solüsyonundan 120 μL’yi ayrı tüplere bölün.
2. Her tüpe 6 μL kalibratör, bilinmeyen numune ve kalite kontrol ekleyin ve iyice karıştırın.
3. 2. adımda hazırlanan her karışımın 100 μL'sini ilgili mikro plaka kuyularına aktarın.
önceden tasarlanmış test yapılandırmasına.
3. Plakayı Plaka Kapatıcı ile kapatın ve 37°C’de 30 dakika inkübe edin.
4. Plaka Sızdırmazlık Cihazını çıkarın ve plakayı kuyu başına yaklaşık 300 μL 1× Yıkama Solüsyonu ile dört kez yıkayın.
5. Yıkama adımlarından sonra kuyucuklardaki kalan sıvıyı temizlemek için tabağı kağıt havlu üzerine vurun.
6. Her kuyuya 100 μL TMB Solüsyonu ekleyin ve plakayı 20 - 25°C'de karanlıkta 20 dakika inkübe edin.
7. Reaksiyonu durdurmak için her kuyucuğa 50 μL Durdurma Solüsyonu ekleyin.
8. 10 dakika içinde 450 nm'de mikro plaka okuyucuda absorbansı okuyun (aksesuar olarak 630 nm)
(Daha yüksek hassasiyetli performans için önerilir).