Bộ xét nghiệm phát hiện kháng thể trung hòa SARS-CoV-2 (ELISA) của Testsealabs
Mô tả ngắn gọn:
Xét nghiệm kháng thể trung hòa SARS-CoV-2 là xét nghiệm miễn dịch sắc ký nhanh. Xét nghiệm này được thiết kế để phát hiện định tính kháng thể trung hòa chống lại bệnh do virus Corona 2019. Có thể sử dụng với mẫu máu toàn phần, huyết thanh hoặc huyết tương của người. Xét nghiệm này hỗ trợ đánh giá nồng độ kháng thể trung hòa kháng virus Corona chủng mới ở người.
 Kết quả nhanh chóng: Chính xác như trong phòng thí nghiệm chỉ trong vài phút | Độ chính xác cấp phòng thí nghiệm: Đáng tin cậy và đáng tin cậy |
| Xét nghiệm ở bất cứ đâu: Không cần đến phòng xét nghiệm | Chất lượng được chứng nhận: 13485, CE, Tuân thủ Mdsap |
| Đơn giản & Hợp lý: Dễ sử dụng, Không rắc rối | Sự tiện lợi tối ưu: Kiểm tra thoải mái tại nhà |
【NGUYÊN TẮC】
Bộ phát hiện kháng thể trung hòa SARS-CoV-2 dựa trên phương pháp ELISA cạnh tranh.
Sử dụng miền liên kết thụ thể tinh khiết (RBD), protein từ protein gai virus (S) và tế bào chủ
thụ thể ACE2, xét nghiệm này được thiết kế để mô phỏng tương tác trung hòa giữa virus và vật chủ.
Các chất chuẩn, chất kiểm soát chất lượng và mẫu huyết thanh hoặc huyết tương được trộn đều riêng lẻ trong quá trình pha loãng
đệm chứa liên hợp hACE2-HRP được chia thành từng phần trong các ống nhỏ. Sau đó, hỗn hợp được chuyển vào
các giếng vi mạch chứa mảnh RBD (RBD) tái tổ hợp SARS-CoV-2 cố định cho
ủ. Trong thời gian ủ 30 phút, kháng thể đặc hiệu RBD trong các chất hiệu chuẩn, QC và
các mẫu sẽ cạnh tranh với hACE2-HRP để liên kết cụ thể với RBD được cố định trong các giếng. Sau đó
trong quá trình ủ, các giếng được rửa 4 lần để loại bỏ liên hợp hACE2-HRP không liên kết. Một dung dịch
Sau đó, TMB được thêm vào và ủ trong 20 phút ở nhiệt độ phòng, dẫn đến sự phát triển của
màu xanh lam. Sự phát triển màu sắc được dừng lại bằng cách thêm 1N HCl và độ hấp thụ là
được đo bằng phương pháp quang phổ ở bước sóng 450 nm. Cường độ màu được tạo thành tỷ lệ thuận với
lượng enzyme hiện diện và có mối quan hệ nghịch đảo với lượng chuẩn được phân tích theo cùng một cách.
Thông qua việc so sánh với đường chuẩn được hình thành bởi các chất chuẩn được cung cấp, nồng độ của
sau đó tính toán kháng thể trung hòa trong mẫu chưa biết.
【VẬT LIỆU CẦN THIẾT NHƯNG KHÔNG ĐƯỢC CUNG CẤP】
1. Nước cất hoặc nước khử ion
2. Pipet chính xác: 10μL, 100μL, 200μL và 1 mL
3. Đầu pipet dùng một lần
4. Máy đọc vi mạch có khả năng đọc độ hấp thụ ở bước sóng 450nm.
5. Giấy thấm
6. Giấy kẻ ô vuông
7. Máy trộn Vortex hoặc tương đương
【THU THẬP VÀ LƯU TRỮ MẪU VẬT】
1. Các mẫu huyết thanh và huyết tương được thu thập trong các ống chứa K2-EDTA có thể được sử dụng cho bộ dụng cụ này.
2. Mẫu vật phải được đậy nắp và có thể được bảo quản trong tối đa 48 giờ ở nhiệt độ từ 2 °C đến 8 °C trước khi phân tích.
Các mẫu được lưu giữ trong thời gian dài hơn (lên đến 6 tháng) chỉ nên được đông lạnh một lần ở nhiệt độ -20 °C trước khi thử nghiệm.
Tránh lặp lại chu kỳ đông lạnh-tan băng.
GIAO THỨC
【Chuẩn bị thuốc thử】
1. Tất cả các thuốc thử phải được lấy ra khỏi tủ lạnh và để trở lại nhiệt độ phòng trước khi sử dụng
(20° đến 25°C). Bảo quản tất cả thuốc thử trong tủ lạnh ngay sau khi sử dụng.
2. Tất cả các mẫu và mẫu đối chứng phải được lắc đều trước khi sử dụng.
3. Chuẩn bị dung dịch hACE2-HRP: Pha loãng dung dịch cô đặc hACE2-HRP theo tỷ lệ pha loãng 1: 51 với Pha loãng
Đệm. Ví dụ, pha loãng 100 μL dung dịch cô đặc hACE2-HRP với 5,0 mL dung dịch đệm pha loãng HRP thành
tạo dung dịch hACE2-HRP.
4. Chuẩn bị dung dịch rửa 1×: Pha loãng dung dịch rửa 20× với nước khử ion hoặc nước cất với
tỷ lệ thể tích là 1:19. Ví dụ, pha loãng 20 mL dung dịch rửa 20× với 380 mL dung dịch khử ion hoặc
nước cất để tạo thành 400 mL dung dịch rửa 1X.
【Quy trình kiểm tra】
1. Trong các ống riêng biệt, lấy 120μL dung dịch hACE2-HRP đã chuẩn bị.
2. Thêm 6 μL chất chuẩn, mẫu chưa biết, chất kiểm soát chất lượng vào mỗi ống và trộn đều.
3. Chuyển 100μL của mỗi hỗn hợp được chuẩn bị ở bước 2 vào các giếng vi mạch tương ứng theo
để cấu hình thử nghiệm được thiết kế trước.
3. Phủ đĩa bằng Plate Sealer và ủ ở nhiệt độ 37°C trong 30 phút.
4. Tháo lớp niêm phong đĩa và rửa đĩa bằng khoảng 300 μL dung dịch rửa 1× cho mỗi giếng trong bốn lần.
5. Gõ nhẹ đĩa vào khăn giấy để loại bỏ chất lỏng còn sót lại trong các lỗ sau các bước rửa.
6. Thêm 100 μL dung dịch TMB vào mỗi giếng và ủ đĩa ở nơi tối ở nhiệt độ 20 - 25°C trong 20 phút.
7. Thêm 50 μL dung dịch dừng phản ứng vào mỗi giếng để dừng phản ứng.
8. Đọc độ hấp thụ trong máy đọc vi mạch ở bước sóng 450 nm trong vòng 10 phút (630 nm là phụ kiện)
được khuyến nghị để có hiệu suất chính xác cao hơn).