مجموعة اختبار الأجسام المضادة المحايدة لفيروس SARS-CoV-2 (ELISA) من Testsealabs
وصف مختصر:
كاسيت اختبار الأجسام المضادة المُحيِّدة لفيروس كورونا المستجد (SARS-CoV-2) هو اختبار مناعي كروماتوغرافي سريع. صُمم هذا الاختبار للكشف النوعي عن الأجسام المضادة المُحيِّدة لفيروس كورونا المستجد 2019. يمكن استخدامه مع عينات الدم البشري الكامل، أو المصل، أو البلازما. يُساعد هذا الاختبار في تقييم مستويات الأجسام المضادة المُحيِّدة لفيروس كورونا المستجد لدى البشر.
 نتائج سريعة: دقيقة في دقائق | دقة المختبر: موثوقة وجديرة بالثقة |
| اختبار في أي مكان: لا يلزم زيارة المختبر | جودة معتمدة: 13485، CE، متوافقة مع معايير MDSAP |
| بسيط ومُبسَّط: سهل الاستخدام، بدون أي متاعب | الراحة القصوى: اختبر براحة في المنزل |
【مبدأ】
تعتمد مجموعة الكشف عن الأجسام المضادة المحايدة لـ SARS-CoV-2 على منهجية ELISA التنافسية.
باستخدام مجال ربط المستقبلات النقي (RBD)، والبروتين من بروتين السنبلة الفيروسية (S) والخلية المضيفة
تم تصميم هذا الاختبار لمحاكاة التفاعل المحايد بين الفيروس والمضيف.
يتم خلط المعايرات وضوابط الجودة وعينات المصل أو البلازما بشكل فردي جيدًا في التخفيف
محلول يحتوي على مُقترن hACE2-HRP مُقسّم في أنابيب صغيرة. ثم تُنقل المخاليط إلى
آبار اللوحة الدقيقة التي تحتوي على جزء RBD المُعاد تركيبه من SARS-CoV-2 (RBD) المُثبت
الحضانة. خلال فترة الحضانة التي تبلغ 30 دقيقة، يتم تحديد الأجسام المضادة الخاصة بـ RBD في المعايرات ومراقبة الجودة و
ستتنافس العينات مع hACE2-HRP على الارتباط النوعي بـ RBD المثبت في الآبار. بعد
أثناء الحضانة، تُغسل الآبار أربع مرات لإزالة مُقترن hACE2-HRP غير المرتبط. محلول من
ثم يتم إضافة TMB وحضنها لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة، مما يؤدي إلى تطوير
اللون الأزرق. يتوقف تطور اللون بإضافة حمض الهيدروكلوريك 1N، والامتصاص هو
تم قياسها باستخدام مطياف ضوئي عند 450 نانومتر. شدة اللون المتكون تتناسب طرديًا مع
كمية الإنزيم الموجودة، وتتناسب عكسيا مع كمية المعايير التي تم تحليلها بنفس الطريقة.
من خلال المقارنة مع منحنى المعايرة الذي تم تشكيله بواسطة المعايرات المقدمة، يتم تحديد تركيز
ثم يتم حساب الأجسام المضادة المحايدة في العينة غير المعروفة.
【المواد المطلوبة ولكن غير المقدمة】
1. الماء المقطر أو منزوع الأيونات
2. ماصات دقيقة: 10 ميكرولتر، 100 ميكرولتر، 200 ميكرولتر و1 مل
3. رؤوس الماصة للاستخدام مرة واحدة
4. قارئ الصفائح الدقيقة القادر على قراءة الامتصاص عند 450 نانومتر.
5. ورق ماص
6. ورق الرسم البياني
7. خلاط الدوامات أو ما يعادله
【جمع العينات وتخزينها】
1. يمكن استخدام عينات المصل والبلازما التي تم جمعها في أنابيب تحتوي على K2-EDTA لهذه المجموعة.
2. يجب تغطية العينات ويمكن تخزينها لمدة تصل إلى 48 ساعة عند درجة حرارة تتراوح بين 2 درجة مئوية و8 درجات مئوية قبل التحليل.
يجب تجميد العينات المحفوظة لفترة أطول (تصل إلى 6 أشهر) مرة واحدة فقط عند درجة حرارة -20 درجة مئوية قبل التحليل.
تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة.
بروتوكول
【تحضير الكواشف】
1. يجب إخراج جميع الكواشف من الثلاجة والسماح لها بالعودة إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام
(20 إلى 25 درجة مئوية). احفظ جميع الكواشف في الثلاجة فورًا بعد الاستخدام.
2. يجب مزج جميع العينات والضوابط قبل الاستخدام.
3. تحضير محلول hACE2-HRP: قم بتخفيف تركيز hACE2-HRP بنسبة تخفيف 1: 51 مع التخفيف
على سبيل المثال، خفف 100 ميكرولتر من مُركّز hACE2-HRP مع 5.0 مل من مُخفّف HRP لـ
اصنع حل hACE2-HRP.
4. 1 × تحضير محلول الغسيل: قم بتخفيف محلول الغسيل 20 × بالماء منزوع الأيونات أو المقطر مع
نسبة حجم ١:١٩. على سبيل المثال، خفف ٢٠ مل من محلول الغسيل ٢٠× مع ٣٨٠ مل من الماء منزوع الأيونات أو
الماء المقطر لصنع 400 مل من محلول الغسيل 1 ×.
【إجراء الاختبار】
1. في أنابيب منفصلة، خذ 120 ميكرولترًا من محلول hACE2-HRP المحضر.
2. أضف 6 ميكرولتر من المعايرات والعينات غير المعروفة وضوابط الجودة في كل أنبوب واخلط جيدًا.
3. انقل 100 ميكرولتر من كل خليط تم تحضيره في الخطوة 2 إلى آبار اللوحة الدقيقة المقابلة وفقًا لذلك
لتكوين الاختبار المصمم مسبقًا.
3. قم بتغطية الطبق باستخدام مادة مانعة للتسرب ثم احتضنه عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
4. قم بإزالة مانع تسرب اللوحة ثم اغسل اللوحة بما يقرب من 300 ميكرولتر من محلول الغسيل 1 × لكل بئر لمدة أربع مرات.
5. قم بضرب اللوحة على منشفة ورقية لإزالة السائل المتبقي في الآبار بعد خطوات الغسيل.
6. أضف 100 ميكرولتر من محلول TMB إلى كل بئر واحتضن اللوحة في الظلام عند درجة حرارة 20 - 25 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة.
7. أضف 50 ميكرولترًا من محلول الإيقاف إلى كل بئر لإيقاف التفاعل.
8. اقرأ الامتصاصية في قارئ اللوحة الدقيقة عند 450 نانومتر خلال 10 دقائق (630 نانومتر كملحق)
يوصى به للحصول على أداء عالي الدقة).